食品中低聚果糖的高效液相色譜檢測(cè)法研究

馮博洪 曹萍 趙娜

摘 要：目的：采用高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)食品中低聚果糖（FOS）的含量。方法：選擇某品牌奶粉和米粉為對(duì)象進(jìn)行HPLC檢測(cè)，測(cè)定樣品中蔗果三糖（GF2）、蔗果四糖（GF3）、蔗果五糖（GF4）的含量。結(jié)果：在0.67～

14.0 mg/mL范圍內(nèi)，奶粉GF2、GF3、GF4含量分別是7.78、6.67、5.29 mg/g，米粉含量分別是8.92、6.09、5.97 mg/g。結(jié)論：HPLC法檢測(cè)食品中低聚果糖含量，準(zhǔn)確性和回收率較高，是一種可靠的檢測(cè)方法。

關(guān)鍵詞：食品;低聚果糖;HPLC;含量檢測(cè)

在食品生產(chǎn)領(lǐng)域，低聚果糖（FOS）成為一種新型甜味劑，在乳制品、糖果、飲料中廣泛應(yīng)用。檢測(cè)食品中FOS的含量，對(duì)于控制食品質(zhì)量具有重要意義。

1 材料和方法

1.1 材料來(lái)源

本研究材料是從市場(chǎng)上購(gòu)買(mǎi)得到的某品牌奶粉和米粉。

1.2 儀器試劑

儀器主要有：HPLC儀，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，NH2色譜柱，離心機(jī)，超聲波清洗器、電子天平等。試劑主要有：GF2標(biāo)品、GF3標(biāo)品、GF4標(biāo)品，乙腈，石油醚，乙酸鋅與六氰合亞鐵酸鉀等。

1.3 溶液配制

配制FOS標(biāo)準(zhǔn)溶液：取3個(gè)10 mL

容量瓶，分別精準(zhǔn)稱(chēng)量GF2、GF3、GF4標(biāo)品各200 g，將標(biāo)品置于瓶?jī)?nèi)，加入超純水直至刻度線，然后將其液稀釋到不同濃度，分別是0.5、5、50 mg/mL，然后超聲處理，時(shí)間為

3 min，經(jīng)0.5 μm的濾膜過(guò)濾。再取等量配好的標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于容量瓶中，加入超純水直至刻度線，重復(fù)超聲、過(guò)濾的處理步驟，待檢。

1.4 樣品預(yù)處理

脫脂。取2個(gè)100 mL燒杯，精準(zhǔn)稱(chēng)量奶粉、米粉各3.0 g，將其置于燒杯內(nèi)，放在通風(fēng)櫥中;先加入50 mL

石油醚，進(jìn)行超聲處理，時(shí)間為20 min

再離心處理，轉(zhuǎn)速為4 800 r/min、時(shí)間5 min;最后去除上層清液，留下沉渣在通風(fēng)櫥內(nèi)揮發(fā)，于60 ℃下干燥，研磨為粉末狀待檢。

提取。取樣本粉末2.0 g，加入

20 mL蒸餾水，先進(jìn)行超聲提取，溫度為60 ℃，時(shí)間15 min;再離心處理，轉(zhuǎn)速為8 000 r/min，時(shí)間為5 min;取上層清液置于25 mL容量瓶?jī)?nèi)。

脫蛋白。采用亞鐵氰化鉀-乙酸鋅法，對(duì)樣品溶液進(jìn)行脫蛋白處理，然后離心，轉(zhuǎn)速為8 000 r/min、時(shí)間

5 min;取上層清液置于25 mL容量瓶?jī)?nèi)，加入蒸餾水定容。

1.5 HPLC色譜條件

色譜柱是NH2分析柱，4.6 mm×

300 mm，5 μm。使用乙腈和水作為流動(dòng)相，實(shí)施梯度洗脫，洗脫程序是：①前20 min，70%～65%的乙腈，30%～35%的水;②第20～

22 min，65%的乙腈，35%的水;③第22～25 min，65%～70%的乙腈，35%～30%的水;④第25～

28 min，70%的乙腈，30%的水。氣體壓力恒定為0.5 MPa，漂移管的溫度為85 ℃，載氣流速為2.0 L/min。

2 結(jié)果和分析

2.1 回歸方程

標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，根據(jù)溶液濃度和峰面積，計(jì)算回歸方程。其中，GF2是y=1.271x+5.387，R2值=0.999 6，定量范圍是0.67～14.0 mg/mL;GF3是y=1.339x+5.337，R2值=0.999 7，定量范圍是0.67～14.0 mg/mL;GF4是y=1.250x+5.361，R2值=0.999 8，定量范圍是1～20 mg/mL。可見(jiàn)，F(xiàn)OS的檢測(cè)范圍是0.67～14.0 mg/mL，線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R2均>99.9%，標(biāo)準(zhǔn)曲線的可信度高。

2.2 色譜圖

按照色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)加標(biāo)圖譜的保留時(shí)間，確定FOS組分。對(duì)色譜圖（圖1、圖2）分析，可見(jiàn)食品樣本經(jīng)超聲處理、梯度洗脫后，F(xiàn)OS的分離度高、基線平穩(wěn)，沒(méi)有雜質(zhì)出現(xiàn)。

2.3 含量測(cè)定值

根據(jù)回歸方程，計(jì)算奶粉和米粉中的FOS含量，見(jiàn)下表1。①?gòu)氖称窐悠穪?lái)看，米粉中的GF2、GF3、GF4含量均高于奶粉;②從FOS的組分來(lái)看，GF2含量最高、GF4含量最低、GF3居中。

2.4 回收率

奶粉和米粉的樣品溶液各選取3份，加入定量的FOS混標(biāo)溶液，檢測(cè)3次計(jì)算回收率。奶粉的加標(biāo)回收率分別是98.8%、97.1%、95.2%，米粉分別是100%、99.6%、97.3%。可見(jiàn)，這兩種樣品的回收率在95.2%～100%，說(shuō)明HPLC法的回收率良好。

3 結(jié)論

文章以奶粉和米粉為對(duì)象，采用HPLC法測(cè)定FOS含量。結(jié)果顯示：該方法的精密度和回收率高，檢測(cè)過(guò)程中沒(méi)有雜質(zhì)干擾，是一種可靠的檢測(cè)方法。