肺癌患者血漿腫瘤異常糖鏈蛋白（TAP）的表達(dá)及其臨床分析

廖信輝 張桂娟

[摘要] 目的 探討肺癌患者血漿腫瘤異常糖鏈蛋白（TAP）的表達(dá)及其臨床分析。 方法 回顧性分析2018年1月～2019年1月在我院呼吸內(nèi)科治療的100例肺癌患者的臨床資料，將其作為觀察組，選取同期100例健康體檢者作為對(duì)照組，比較兩組血標(biāo)本中TAP濃度，分析TAP表達(dá)的差異性及臨床資料。 結(jié)果 觀察組血TAP凝聚物面積為（187.92±52.28）μm2，對(duì)照組為（67.38±21.62）μm2，觀察組顯著高于對(duì)照組（P<0.05）;觀察組化療后TAP凝聚物面積為（136.84±36.59）μm2，明顯低于化療前（P<0.05）;觀察組TAP陽(yáng)性率為84.00%，對(duì)照組為3.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;TAP檢測(cè)的敏感度為84%（84/100），特異度為97%（97/100），約登指數(shù)為84%+97%-1≈0.81;TAP陽(yáng)性與胸水、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有明顯關(guān)聯(lián)（P<0.05），與性別、年齡、臨床分期等無(wú)明顯關(guān)聯(lián)（P>0.05）。 結(jié)論 肺癌患者血漿TAP表達(dá)明顯升高，對(duì)肺癌的早發(fā)現(xiàn)、早診斷有重要意義，并可用于療效監(jiān)測(cè)，評(píng)估治療效果及預(yù)后。

[關(guān)鍵詞] 肺癌;血漿腫瘤異常糖鏈蛋白（TAP）;臨床診斷;療效監(jiān)測(cè)

[中圖分類號(hào)] R734.2? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-9701（2020）22-0033-04

Expression and clinical analysis of plasma tumor abnormal protein（TAP）in the patients with lung cancer

LIAO Xinhui? ?ZHANG Guijuan

Department of Respiratory Medicine，the First Affiliated Hospital of Gan'nan Medical University，Ganzhou? ?341000，China

[Key words] Objective To investigate the expression and clinical analysis of plasma tumor abnormal protein（TAP） in the patients with lung cancer. Methods The clinical data of 100 patients with lung cancer who were treated in the Department of Respiratory Medicine of our hospital from January 2018 to January 2019 were retrospectively analyzed， and they were assigned to the observation group. 100 healthy subjects receiving physical examination during the same period of time were selected as the control group. The TAP concentration in the blood samples was compared between the two groups，and the difference in TAP expression and the correlation with clinical data were analyzed. Results The area of blood TAP aggregates in the observation group was（187.92±52.28）μm2. The area of blood TAP aggregate in the control group was（67.38±21.62）μm2. The observation group was significantly higher than the control group（P<0.05）; the area of TAP aggregate in the observation group after chemotherapy was（136.84±36.59）μm2， which was significantly lower than before chemotherapy（P<0.05）; the positive rate of TAP in the observation group was 84 cases（84%）， and the positive rate of TAP in the control group was 3 cases（3%）. The difference was statistically significant（P<0.05）; the sensitivity of TAP detection was 84%（84/100）， and the specificity was 97%（97/100）. The Youden Index was 84%+97%-1≈0.81; positive TAP was significantly associated with the presence or absence of pleural effusion and distant metastasis（P<0.05）， but was no significantly associated with age， gender， and clinical stage（P>0.05）. Conclusion Plasma TAP expression in the patients with lung cancer is significantly increased， which is of great significance for the early detection and early diagnosis of lung cancer， and can be used for monitoring curative effect and evaluating the treatment effect and prognosis.

[Key words] Lung cancer; Plasma tumor abnormal protein（TAP）; Clinical diagnosis; Efficacy monitoring

肺癌是我國(guó)高發(fā)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率均較高，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。臨床研究顯示，早期發(fā)現(xiàn)并手術(shù)切除治療是改善肺癌預(yù)后的有效手段，但早期肺癌的癥狀不明顯，診斷和治療率較低，當(dāng)患者出現(xiàn)明顯癥狀時(shí)，大多已處于中晚期，錯(cuò)過(guò)了最佳手術(shù)時(shí)機(jī)，僅能行放化療等綜合治療，整體預(yù)后較差[1]。臨床對(duì)肺癌的檢查主要依靠胸部X線、CT等影像學(xué)手段，雖然CT能有效發(fā)現(xiàn)肺部病灶，但難以鑒別腫瘤與活動(dòng)性炎性結(jié)節(jié)，特別是早期肺癌的鑒別診斷能力一般。血清學(xué)通過(guò)癌胚抗原（Carcinoembryonic antigen，CEA）、細(xì)胞角蛋白19的可溶性片段（Cytokeratin-19-fragment CYFRA21-1）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（Neuronal-specific enolase，NSE）等檢測(cè)對(duì)肺癌有輔助診斷作用，但最終的診斷仍需通過(guò)病理檢查確定[2]。臨床研究顯示，正常細(xì)胞惡變過(guò)程中細(xì)胞膜表面的聚糖結(jié)構(gòu)會(huì)發(fā)生明顯變化，通過(guò)一系列的反應(yīng)生成腫瘤異常糖鏈蛋白（Tumor abnormal protein，TAP），當(dāng)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的TAP累積到一定數(shù)量時(shí)，可在外周血漿中檢出。因此，TAP可在癌細(xì)胞異常增殖中表達(dá)明顯增加[3]。TAP檢測(cè)技術(shù)是一種新型的腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)技術(shù)，集合了多種腫瘤標(biāo)志物在同一反應(yīng)體系中進(jìn)行一次組合檢驗(yàn)，具有較高的敏感度和準(zhǔn)確度[4]。本研究進(jìn)一步分析肺癌患者血漿TAP的表達(dá)及其臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2018年1月～2019年1月在我院呼吸內(nèi)科治療的100例肺癌患者的臨床資料，將其作為觀察組，其中男54例，女46例，年齡37～82歲，平均（61.5±10.4）歲;腺癌49例，鱗癌36例，其他15例，按TNM分期，Ⅰ～Ⅱ期68例，Ⅲ～Ⅳ期32例;所有患者均經(jīng)經(jīng)皮肺部穿刺或經(jīng)纖維支氣管鏡取得活檢組織或由胸水細(xì)胞學(xué)檢查確診為肺癌，均未曾接受過(guò)放化療或靶向治療。選取同期100例健康體檢者作為對(duì)照組，男52例，女48例，年齡35～80歲，平均（61.1±10.2）歲;兩組均無(wú)嚴(yán)重心肝腎疾病、全身感染、代謝性疾病、血液系統(tǒng)疾病等;兩組的年齡、性別等一般資料比較無(wú)明顯差異（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

①檢測(cè)儀器與試劑。TAP檢測(cè)試劑盒、TAP檢測(cè)用圖像分析儀或生物顯微鏡由浙江瑞生醫(yī)療儀器廠提供。②收集標(biāo)本。抽取兩組晨起空腹靜脈血5 mL，在載玻片上推成超過(guò)玻片長(zhǎng)度2/3的均勻血片，平放待干，選取兩張為檢測(cè)標(biāo)本。在18℃～25℃的工作室溫下，血片適應(yīng)10 min，取TAP試劑在每張血片上均勻滴三滴，每滴約50 μL，形成10～12 mm/φ的斑點(diǎn)，干燥2 h后在TAP檢測(cè)系統(tǒng)圖像分析儀顯微鏡下，通過(guò)顯示屏觀察，逐個(gè)掃描血片標(biāo)本的三個(gè)斑點(diǎn)，尋找特異形態(tài)的凝聚物，遇可疑圖像時(shí)轉(zhuǎn)用高倍鏡分辨[5]。③TAP凝聚物面積標(biāo)準(zhǔn)。按形態(tài)結(jié)果分為正常/無(wú)明顯凝聚物、異常/凝聚物較小、異常/凝聚物較大。面積在0～121 μm2為正常/無(wú)明顯凝聚物，面積在121～225 μm2為異常/凝聚物較小，面積>225 μm2為異常/凝聚物較大[6]。④TAP陽(yáng)性率標(biāo)準(zhǔn)。TAP凝聚物直徑>30 μm，呈圓形、不規(guī)則圓形或多邊形，邊緣較完整，顆粒顏色以淡綠色、淡黃色或棕褐色為主，周圍有深色底紋，具有屈光性[7]。

1.3 觀察指標(biāo)

記錄兩組的血TAP凝聚物面積，記錄觀察組化療前后的血TAP凝聚物面積;統(tǒng)計(jì)兩組TAP陽(yáng)性率，計(jì)算TAP診斷的敏感度、特異度和約登指數(shù)。敏感度=真陽(yáng)性例數(shù)/（真陽(yáng)性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%;特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽(yáng)性例數(shù)）×100%;約登指數(shù)=敏感度+特異度-1;分析TAP表達(dá)的差異性及與臨床資料的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血TAP凝聚物面積比較

見(jiàn)表1。觀察組血TAP凝聚物面積為（187.92±52.28）μm2，對(duì)照組為（67.38±21.62）μm2，觀察組顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.2 觀察組化療前后血TAP凝聚物面積比較

見(jiàn)表2。觀察組化療后血TAP凝聚物面積為（136.84±36.59）μm2，明顯低于化療前（187.92±52.28）μm2，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.3 兩組TAP陽(yáng)性率比較

見(jiàn)表3。觀察組TAP陽(yáng)性率為84.00%，對(duì)照組為3.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.4 TAP診斷肺癌的敏感度及特異度分析

TAP檢測(cè)的敏感度為84%（84/100），特異度為97%（97/100），約登指數(shù)為84%+97%-1≈0.81。

2.5 TAP與肺癌各臨床特征之間的關(guān)系

見(jiàn)表4。TAP陽(yáng)性與胸水、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有明顯關(guān)聯(lián)（P<0.05），與性別、年齡、臨床分期等無(wú)明顯關(guān)聯(lián)（P>0.05）。

3 討論

我國(guó)2017年癌癥流行病學(xué)統(tǒng)計(jì)顯示，肺癌的發(fā)病率位居前三位，且大多數(shù)患者在確診時(shí)已處于中晚期，已錯(cuò)過(guò)最佳手術(shù)時(shí)機(jī)，預(yù)后較差[8]。而早期肺癌行手術(shù)根治的效果較好，5年生存率較高，因此，加強(qiáng)對(duì)肺癌的早期診斷及治療至關(guān)重要。

國(guó)內(nèi)外許多健康體檢時(shí)僅檢查胸部X線，對(duì)肺癌的敏感度低，許多微小或隱匿病灶不易發(fā)現(xiàn)，使得早期肺癌的診斷效果較差[9]。CT或增強(qiáng)CT雖然對(duì)肺部結(jié)節(jié)病灶的診斷率較高，對(duì)于中晚期肺癌的浸潤(rùn)程度、有無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移等顯示效果較好，但對(duì)于炎性結(jié)節(jié)和早期肺癌的鑒別診斷效果一般，仍需通過(guò)病理活檢明確診斷。而常規(guī)的腫瘤標(biāo)志物，如CEA、NSE、CYFRA21-1等僅能作為輔助診斷方式，這些指標(biāo)的敏感度均低于60%，并不能作為診斷的主要參考指標(biāo)[10]。

TAP是一種糖和蛋白質(zhì)的復(fù)合物，屬于糖蛋白。其為正常細(xì)胞膜表面的聚糖結(jié)構(gòu)受到異常刺激后發(fā)生一系列的變化而產(chǎn)生的異常蛋白質(zhì)，即發(fā)生編碼糖蛋白基因突變。當(dāng)細(xì)胞惡變時(shí)，細(xì)胞表面聚糖結(jié)構(gòu)產(chǎn)生變化，N-鏈聚糖分支增加，誘發(fā)多級(jí)反應(yīng)，產(chǎn)生TAP，當(dāng)TAP濃度升高到一定程度，可在外周血液中檢測(cè)出，從而臨床可發(fā)現(xiàn)早期癌癥的跡象[11-12]。因此，臨床可將TAP檢查應(yīng)用于早期肺癌的診斷篩查中。血TAP檢測(cè)中包含多種腫瘤標(biāo)志物，即同一項(xiàng)檢查中可檢測(cè)出多種腫瘤細(xì)胞，有助于提高腫瘤檢測(cè)的敏感度和準(zhǔn)確度。臨床研究已證實(shí)，TAP在腫瘤的早期診斷、發(fā)生發(fā)展及預(yù)后監(jiān)測(cè)中有重要作用[13-14]。

臨床研究證實(shí)，腫瘤細(xì)胞糖蛋白的糖鏈結(jié)構(gòu)與正常細(xì)胞有明顯差異，在致癌基因的刺激下，正常糖蛋白糖鏈發(fā)生糖基化修飾改變，引起糖鏈結(jié)構(gòu)質(zhì)變，產(chǎn)生TAP，激發(fā)腫瘤細(xì)胞的克隆性增殖[15]。因此，糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)變化與腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，為臨床早期腫瘤篩查奠定了理論基礎(chǔ)[16]。另有研究證實(shí)，肺癌、食管癌、乳腺癌、肝癌等多種原發(fā)性惡性腫瘤中均可檢測(cè)血漿TAP的表達(dá)[17]。

本研究結(jié)果顯示，觀察組血TAP凝聚物面積為（187.92±52.28）μm2，對(duì)照組為（67.38±21.62）μm2，觀察組顯著高于對(duì)照組（P<0.05）;觀察組化療后TAP凝聚物面積為（136.84±36.59）μm2，明顯低于化療前（P<0.05）;觀察組TAP陽(yáng)性率為84.00%，對(duì)照組為3.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;TAP檢測(cè)的敏感度為84%（84/100），特異度為97%（97/100），約登指數(shù)為84%+97%-1≈0.81;TAP陽(yáng)性與胸水、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有明顯關(guān)聯(lián)（P<0.05），與性別、年齡、臨床分期等無(wú)明顯關(guān)聯(lián)（P>0.05），充分證明血漿TAP檢查具有較高的敏感度和特異度，其水平明顯高于健康人，且檢測(cè)的TAP陽(yáng)性率較高，使臨床更容易發(fā)現(xiàn)癌前病變及早期癌變患者[18]。同時(shí)，分析TAP與臨床資料顯示，發(fā)生胸水及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的肺癌，TAP陽(yáng)性率較高，臨床可根據(jù)TAP水平判斷腫瘤發(fā)展的嚴(yán)重程度[19]。

吳永梅等[20]研究顯示，血TAP在Barrett食管組患者中的陽(yáng)性率為81.33%，在食管腺癌組中為85.25%，而在正常人群中為12.50%（P<0.05），認(rèn)為TAP可作為新的腫瘤檢測(cè)指標(biāo)，可以更早期的發(fā)現(xiàn)癌前病變，有助于早期診斷腫瘤，早期采取措施，改善預(yù)后。與本研究結(jié)果基本一致。

綜上所述，肺癌患者血漿TAP的表達(dá)較高，為臨床早期診斷和治療肺癌提供了可靠依據(jù)，值得在臨床推廣使用。

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（收稿日期：2020-03-18）