不同干燥方法對白芍藥材初加工過程中品質的影響*

俞葉飛 王 盼 陳子林 浦錦寶 胡軼娟 徐 攀 梁衛青#

1 浙江省大盤山國家級自然保護區管理局 浙江 金華 322300

2 浙江省中醫藥研究院 浙江 杭州 310007

白芍為毛茛科植物芍藥（Paeonia lactiflora Pall.）的干燥根[1]。本實驗以浙產道地藥材白芍為研究對象，采用自然曬干、烘箱干燥、真空干燥、微波干燥、微波真空干燥等方式，探討不同干燥方法對白芍藥材初加工過程中品質的影響。

1 儀器與材料

1.1 儀器：高效液相色譜儀(VARIAN，Prostar 230型三元泵，330型二極管陣列檢測器，410型自動進樣器)、色譜柱Hypersil C18柱(250×46mm,5μm)，電熱恒溫鼓風干燥箱、真空干燥箱、真空微波干燥儀、酸度計、電子恒溫水浴鍋、旋轉蒸發儀、十萬分子一電子天平。

1.2 材料：白芍采自浙江磐安中藥材種植基地，經浦錦寶研究員鑒定為毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall.的干燥根。芍藥苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號：110736-200833)，苯甲酸對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號：100419-200301)，葡萄糖(中國藥品生物制品檢定所，批號：110833-200503)。乙腈、甲醇、異丙醇均為色譜純，水為超純水，乙醇、磷酸、氫氧化鈉、冰醋酸均為分析純。

2 方法與結果

2.1 加工方法：同一批新鮮白芍藥材除去泥沙，洗凈，除去頭尾和細根，作為實驗材料備用。每個加工處理方法重復3次。鮮品切片曬干（不經煮制）：取新鮮白芍樣品，去皮后切片，切片厚度為2.0～3.0mm，平鋪于樣品盤中，置室外陽光下晾曬至干。自然曬干：取新鮮白芍樣品，置沸水中煮制，去皮后切片，平鋪于樣品盤中，置室外陽光下晾曬至干。烘干：取新鮮白芍樣品，置沸水中煮制，去皮后切片，平鋪于樣品盤中，置干燥箱進行干燥。真空干燥：取新鮮白芍樣品煮制，去皮后切片，平鋪于樣品盤中，置真空干燥箱下進行干燥。微波干燥：取新鮮白芍樣品煮制，去皮后切片，平鋪于微波爐專用托盤上，均勻鋪開，于微波下干燥。微波真空干燥：取新鮮白芍樣品煮制，去皮后切片，平鋪于微波爐專用托盤上，均勻鋪開，設置真空度，于微波下干燥。

2.2 芍藥苷含量測定：色譜條件：色譜柱：Hypersil C18柱(250mm×46mm，5μm)；流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）；流速：1.0ml/min；檢測波長：230nm；柱溫：30℃，進樣量：10μl。參考中華人民共和國藥典2015年版一部白芍項下，理論塔板數按芍藥苷峰計算不應低于2000，在此條件下，芍藥苷與相鄰成分達到基線分離。

標準品溶液的配制：精密稱取芍藥苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得。供試品溶液的配制：取本品中粉約0.1g，精密稱定，置50ml量瓶中，加稀乙醇35ml，超聲處理30min，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過，取濾液，即得。樣品含量測定：稱取白芍樣品，按上述方法制備供試品溶液，在上述色譜條件下進行分析，測定樣品中芍藥苷的含量，每個加工方法重復測定3次，取其平均值作為最終結果，見表1。

2.3 白芍總苷含量測定：色譜條件：色譜柱：Hypersil C18柱(250mm×46mm，5μm)。流動相：甲醇-0.1%磷酸-異丙醇-冰乙酸（85∶155∶4∶6）；流速：1.0ml/min；檢測波長：230nm，柱溫：30℃，進樣量：10μl。

標準品溶液的制備：精密稱取苯甲酸對照品適量，加流動相制成每1ml含200μg的溶液，即得。標準曲線的制備：分別精密吸取對照品溶液0.5ml、1ml、2ml、4ml、5ml、10ml置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，分別精密吸取10μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積，以峰面積積分值Y為縱坐標，苯甲酸量X（μg）為橫坐標，繪制標準曲線，回歸方程為：Y=2.4657×107X-1.5343×106，r=0.9998。供試品溶液的制備：取本品粉末0.1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入稀乙醇50ml，超聲處理30min，濾過，水浴揮干，殘渣用5%氫氧化鈉溶液5ml溶解，取該溶液0.5ml，置5ml具塞試管中，沸水浴水解2h，取出，冷卻至室溫，加流動相至2.5ml，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過。根據峰面積測定苯甲酸的含量，再計算出白芍總苷的含量，公式為白芍總苷含量=[（水解后總苯甲酸含量-游離苯甲酸含量）×480.27/122.12]×100%。樣品含量測定：取供試品溶液，注入高效液相色譜儀，按上述色譜條件進行測定，根據相應線性關系計算樣品中白芍總苷的含量，每個加工方法重復測定3次，取其平均值作為最終結果，見表1。

2.4 多糖含量測定：標準曲線的繪制：精密稱取干燥至恒重的無水葡萄糖對照品適量，加蒸餾水溶解制成每1ml含200μg的標準溶液，依次移取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml于10ml棕色具塞試管中，各加蒸餾水至2.0ml，搖勻，另取2.0ml蒸餾水作空白管，然后各管加入5%苯酚1.0ml和濃硫酸5.0ml，混勻，置100℃水浴中加熱15min，取出，置冰水浴中5min，取出，室溫放置10min后，照紫外-可見分光光度法（2015版中國藥典一部附錄VA），在490nm波長處以空白溶液做參比，測定吸光度。以葡萄糖濃度(μg/ml)為橫坐標，吸光度（A）為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程：Y=0.05900X+0.1299(r=0.9989)。供試品溶液的制備：稱取白芍粉末約1.0g，分別加水100ml水，精密稱定重量，加熱回流提取2h，提取完成后放冷，用蒸餾水補足重量，過濾，精密吸取濾液5.0ml，加入無水乙醇20ml，混勻5min，3000r/min離心5min，沉淀用80%乙醇洗滌數次，用水溶解并轉移50 ml容量瓶，定容至刻度，即得。樣品測定：精密吸取供試品溶液2.0ml于10ml棕色具塞試管中，照標準曲線制備項下顯色，于490nm下掃描，測定吸光度值，以相應試劑為空白，按標準曲線計算樣品中多糖含量。每個加工方法重復測定3次，取其平均值作為最終結果，見表1。

表1 樣品含量測定結果（n=3）

結果顯示，不同干燥方法對白芍藥材中芍藥苷、白芍總苷、多糖、苯甲酸的含量均有影響。不同加工干燥方法樣品的芍藥苷和白芍總苷含量存在一定差異，但水煮與否的加工方法對芍藥苷和白芍總苷含量差異較大，尤其是游離苯甲酸的含量降低較為明顯，同時，微波真空干燥方法大大縮短了白芍藥材的干燥時間。

3 討論

3.1 白芍水煮與否對白芍藥材質量的影響：從芍藥、白芍總苷、游離苯甲酸、多糖的含量變化來看，白芍水煮與否對白芍藥材的質量有明顯差異，且對芍藥苷和白芍總苷含量的影響大于多糖含量的影響。結果表明，白芍經水煮制后，芍藥苷和白芍總苷的含量均有所增加，可能因煮制過程使酶活力喪失，起到了殺酶保苷作用，同時多糖含量下降，而作為有害成分的游離苯甲酸則明顯降低，苯甲酸在白芍中視為無效成分[2]，攝入一定量后還會增加肝臟的解毒負擔，因此，白芍在產地加工過程中，應首先進行水煮制，再進行去皮切片干燥的方法。

3.2 不同干燥方法對白芍藥材質量的影響：從芍藥苷、白芍總苷、總多糖三種指標性成分的含量測定結果來看，不同干燥方法對白芍藥材質量產生一定影響[3]，且對白芍總苷含量的影響大于芍藥苷，加工干燥方法對白芍質量的影響已有一些報道[4-5]，比較分析的方法各異，結論也不盡相同。本研究結果顯示：白芍微波真空干燥加工的芍藥苷和白芍總苷含量都是最高，白芍經水煮后多糖含量有部分損失，而不同的干燥方式對多糖含量的影響相對較大，真空干燥和微波真空干燥由于在真空狀態下，干燥溫度低，時間短，多糖含量的損失較小。因此綜合考慮，選擇不同加工方法時，為盡可能保留白芍的指標性成分，同時又提高白芍的干燥效率，還是采用微波真空干燥法作為白芍的干燥加工方法較好。