不同免疫檢驗(yàn)法對乙肝病毒感染血清標(biāo)志物檢驗(yàn)的效果評價(jià)研究

楊 婷 陳正徐

（合肥市瑤海區(qū)第二人民醫(yī)院，安徽合肥 230011）

感染乙肝病毒后，患者可出現(xiàn)肝功能異常、惡心、嘔吐等癥狀，甚至部分患者還會出現(xiàn)黃疸、發(fā)熱等癥狀[1]，乙肝是一種全球性的病毒感染疾病。近年來，隨著我國發(fā)病率的逐年上升，部分患者可發(fā)展為肝癌和肝硬化，對患者的生命安全造成了嚴(yán)重影響。為此，對乙肝患者進(jìn)行早期診斷意義重大，酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）是常見的檢測方法，在臨床上被廣泛應(yīng)用。而近年來，化學(xué)發(fā)光免疫分析法（ECLIA）檢測方法也逐漸得到了廣泛的應(yīng)用，具有較高的臨床價(jià)值。因此，為了對比研究兩種檢測方法的實(shí)際應(yīng)用效果，本研究選取合肥市瑤海區(qū)第二人民醫(yī)院收治的臨床確診為乙肝的患者40例（乙肝指標(biāo)處于臨界值附近）為研究對象，旨在探索ELISA與ECLIA兩種檢測方法的實(shí)際應(yīng)用效果，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取合肥市瑤海區(qū)第二人民醫(yī)院2019年5月至2020年5月收治的臨床確診為乙肝的患者40例（乙肝指標(biāo)處于臨界值附近）為研究對象，其中男性23例，女性17例；年齡49～53歲，平均年齡（51.07±1.98）歲。本研究經(jīng)合肥市瑤海區(qū)第二人民醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均經(jīng)臨床診斷確診為乙肝病毒感染[2]；②所有患者均對本研究知情，并簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有器官功能異常者；②患有免疫疾病者；③感染其他類型肝病毒者。

1.3 方法

分別進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測和化學(xué)發(fā)光免疫分析法（ECLIA）檢測，并對兩種檢測方式的檢出率和成本進(jìn)行對比分析。清晨抽取患者的空腹肘靜脈血5 mL作為樣本，放置于離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司，型號：XiangYiL500）中進(jìn)行離心處理，設(shè)定離心速度為3 000 r/min，時(shí)間為10 min，并置于-20 ℃低溫環(huán)境中進(jìn)行保存。①ELISA檢測：使用酶聯(lián)免疫檢測儀（雷博公司，型號：MULISKAN MK3）和試劑[北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司，乙型肝炎病毒e抗原檢測試劑盒（ELISA）]進(jìn)行樣本檢測，并記錄檢測結(jié)果。②ECLIA檢測：使用全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，型號：CL-2200i）和試劑[北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司，乙型肝炎病毒e抗原檢測試劑盒（使用ECLIA）]進(jìn)行樣本檢測，并記錄檢測結(jié)果。

1.4 觀察指標(biāo)

①統(tǒng)計(jì)兩種檢測方法對血清標(biāo)志物的檢出情況，主要為乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗體（HBsAb）、乙肝肝炎e抗原（HBeAg）、乙肝e抗體（HBeAb）、乙肝核心抗體（HBcAb）。②對比兩種檢測方法的檢出準(zhǔn)確率和檢測成本。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析。計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[例（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方法病毒血清標(biāo)志物陽性檢出率比較

ECLIA方法檢測出HBsAg 37例（92.50%），HBeAg 15例（37.50%），HBeAb 16例（40.00%），均顯著高于ELISA檢測方法，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表 1。

表1 兩種檢測方法患者病毒血清標(biāo)志物陽性檢出率比較[例（%）]

2.2 兩種檢測方法的準(zhǔn)確率和成本比較

ECLIA檢測方法的準(zhǔn)確例數(shù)為38例（95.00%），成本為（170.00±5.00）元，均優(yōu)于ELISA檢測方法，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩種檢測方法的準(zhǔn)確率和成本比較

3 討論

由于乙肝病毒體積很小，潛伏期長，患者感染后，會由潛伏期發(fā)展為乙型肝炎。乙肝病毒有泛酸特點(diǎn)，能夠?qū)颊吣懝芗?xì)胞、腎小管細(xì)胞及胃黏膜細(xì)胞產(chǎn)生損傷，造成患者身體素質(zhì)降低[3]，影響其生活質(zhì)量。因此，及早進(jìn)行干預(yù)治療，有助于緩解肝臟的損傷，預(yù)防肝硬化，有利改善預(yù)后效果。由于乙肝病毒具有強(qiáng)大的耐熱、耐低溫及耐紫外線能力，臨床治療難度高，早期診斷治療對控制病情和預(yù)后效果有重要意義。據(jù)相關(guān)研究顯示[4]，我國攜帶乙肝病毒的人群已經(jīng)超過了7%，目前尚不存在特異性藥物和治療方法，在推廣乙肝疫苗的同時(shí)，需要不斷提高乙肝病毒早期檢出率，及早干預(yù)治療，預(yù)防病情惡化，這對于控制乙肝病毒的傳播具有重要意義。

HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb是乙肝病毒幾種常見血清標(biāo)志物，在臨床中常用于診斷病情及判斷治療效果。使用免疫檢驗(yàn)方法檢測各個(gè)血清標(biāo)志物水平，能夠根據(jù)檢測結(jié)果判斷患者是否感染乙肝病毒，評估病情進(jìn)展。HBsAg是一種乙肝病毒外殼成分，通過檢測HBsAg水平可判斷患者是否感染，一般情況下感染后1～2周可檢測出HBsAg水平升高[5]。HBeAb由HBeAg刺激產(chǎn)生，可反映病毒復(fù)制狀態(tài)，根據(jù)該項(xiàng)指標(biāo)，可指導(dǎo)醫(yī)護(hù)人員判斷患者病情進(jìn)展和治療轉(zhuǎn)歸情況。HBsAb作為一種中和性抗體，可以反映患者免疫反應(yīng)水平，若患者該項(xiàng)指標(biāo)升高，代表患者受到感染免疫力提高[6]。HBeAg作為一種可溶性蛋白，若檢測結(jié)果為陽性，代表患者具有較強(qiáng)的病毒感染性。HBcAb可以反映患者感染乙肝病毒，且具備強(qiáng)大的復(fù)制活躍度。由于乙肝病毒具有較強(qiáng)的傳染性，若HBsAg、HBeAb、HBcAb指標(biāo)檢測結(jié)果為陽性，可診斷出患者感染乙肝病毒，但病毒復(fù)制較少，存在一定傳染性。

目前臨床上最常使用的檢測方法就是ECLIA和ELISA法檢測，相比于ECLIA檢測，ELISA檢測的應(yīng)用范圍更廣，其檢測成本低，但操作復(fù)雜，影響因素較多，可造成檢測結(jié)果受到影響。ELISA檢測主要是利用樣本和酶標(biāo)抗原、抗體、固相載體表面抗原發(fā)生特異性反應(yīng)，利用樣本和酶的特異顏色進(jìn)行檢測[7]。該方法能夠測定抗原和抗體，檢測成本較低，具有一定應(yīng)用優(yōu)勢。ECLIA是在ELISA檢測的基礎(chǔ)上研發(fā)出來的，主要是利用微粒子化學(xué)發(fā)光，對藥物濃度和微量成分進(jìn)行檢測，操作簡單，檢出效率高，應(yīng)用價(jià)值較高[8]。由于ECLIA是利用電磁鐵控制微粒進(jìn)行檢測，可避免由于人為因素導(dǎo)致的失誤，可檢測項(xiàng)目較多，也增加了成本費(fèi)用。

由于ELISA只能進(jìn)行定量檢測，容易出現(xiàn)漏診和誤診的情況，影響陽性檢出率。而ECLIA檢測方法為自動化操作，有效減少了人為失誤的概率，可最大限度保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。本研究結(jié)果顯示，ELISA方法檢測出HBsAg 30例（75.00%），HBeAg 7例（17.50%），HBeAb7例（17.50%），而ECLIA方法檢測出HBsAg37例（92.50%），HBeAg 15例（37.50%），HBeAb16例（40.00%），兩 種 檢測方法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。但HBsAb、HBcAb的檢出率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。由此可見，在血清標(biāo)志物陽性檢出率上，ECLIA檢測的檢出率更高，能夠控制影響因素，具有臨床推廣應(yīng)用價(jià)值。另外，ELISA方法檢測的準(zhǔn)確例數(shù)為33例（82.50%），成本為（20.00±2.00）元，而ECLIA方法檢測的準(zhǔn)確例數(shù)為38例（95.00%），成本為（170.00±5.00）元，兩種檢測方法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說明兩種檢測方法各具優(yōu)勢，還需根據(jù)臨床的實(shí)際情況靈活選擇，以提高乙肝病毒感染患者的早期檢出率。

綜上所述，在檢測乙肝病毒血清標(biāo)志物中，應(yīng)用ECLIA檢測方法更能達(dá)到理想陽性檢測率，相比于ELISA檢測方法，HBsAb和HBcAb 陽性檢出率比較并無差異，而在HBsAg、HBeAg、HBeAb陽性檢出率上，ECLIA檢測檢出率更高，但檢測成本遠(yuǎn)高于ELISA檢測，因此，應(yīng)當(dāng)根據(jù)臨床實(shí)際情況進(jìn)行選擇。