血型鑒定與交叉配血錯誤干擾及避免方法

戰(zhàn)振宇，李曉陽

（吉林通化市第二人民醫(yī)院 檢驗科，吉林 通化）

0 引言

在臨床上，許多疾病的救治過程中，有一部分患者可能出現(xiàn)失血過多而發(fā)生休克的現(xiàn)象，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的患者，往往需要進行輸血治療[1]。在患者的輸血臨床治療中，血型鑒定和交叉配血都是十分重要的步驟，實驗進行的情況會對進行輸血治療患者的生命安全造成直接影響[2]。如，在受患者自身冷凝集素增加的影響，會對患者的ABO血型抗體的鑒定以及Rh血型抗體的鑒定產(chǎn)生影響，還有相關研究表明，患者體內(nèi)冷凝集素的增加會對血型鑒定與交叉配血實驗的結(jié)果造成較大的影響[3]?？傊?，臨床上對血型鑒定與交叉配血的干擾因素較多，應采取對應的措施避免干擾的發(fā)生，為患者的治療提供更加安全可靠的保障。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院檢查的受血者或供血者652例進行分析，其中男性 304例，女性 348例，年齡為 20～82歲，平均（46.27±1.68）歲。本次實驗的所有參與者均無嚴重的心、腎等重要器質(zhì)病變，均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 試劑

ABO、RhO血型定性檢測卡（長春博迅生物試劑有限公司）；抗人球蛋白檢測卡（長春博迅生物試劑有限公司）。

1.2.2 血型鑒定

血型的鑒定主要就是鑒定ABO血型，即為ABH血型抗原檢測。是根據(jù)各血型中所含抗原的不同進行區(qū)分的，所謂的A型血則是指紅細胞中含有A抗原，B型則含有B抗原，而同時含有A抗原與B抗原的即為AB血型，若在血液紅細胞中這兩種抗原都未檢測出，而含H抗原，則血型為O型血。進行血型鑒定主要是為臨床的輸血工作做準備。在為患者進行輸血前，應當選擇相同血型作為患者的供血者，在進行交叉配血實驗證實后，才能為患者開展輸血操作，血型鑒定方法如下。

（1）將微柱凝膠試劑卡的六支凝膠管標號；（2）將待檢者0.5%～0.8%紅細胞懸液分別加入第一至第四支微管中，每管50 μL；（3）將待檢者血清分別加入第五和第六支微管中，每管50 μL；（4）將已知A型和B型紅細胞0.5%～0.8%濃度懸液分別加入第五和第六微管中，每管50 μL；（5）即刻使用專用離心機離心 5 min，900 rpm 2 min，1500 rpm 3 min，取出用肉眼判定結(jié)果。

1.2.3 交叉配血

交叉配血是臨床輸血過程中的重要依據(jù)之一，在兩側(cè)血液不凝集的情況下即可為患者開展輸血工作。交叉配血實驗即將受血者的紅細胞與血清、供血者的血清及紅細胞進行混合后，對兩組血液的混合進行觀察，是否發(fā)生凝集反應。若發(fā)生凝集現(xiàn)象，則不能為患者進行輸血，若出現(xiàn)次側(cè)凝集現(xiàn)象，若患者需要立即進行輸血，可以給予患者少量輸血。交叉配血實驗是以血型鑒定為基礎，進行交叉配血實驗，確認受血者與供血者間的血型無不合抗原-抗體反應的存在，為患者的輸血安全性提供重要保障。由于輸血會直接影響患者的生命安全，因此，只能在確認受血者與供血者的血型一致后才可進行交叉配血。此外，進行交叉配血實驗不能僅僅采用鹽水介質(zhì)進行配血，即使實驗室的條件較差也需在進行膠體介質(zhì)配血后才能使不完全抗體存在的危害有所減少，以最大化地減少由輸血導致的不良反應。交叉配血實驗的方式如下。

（1）將受血者與供血者的紅細胞和血清（或血漿）分離。（2）生理鹽水分別將受血者血清和供血者紅細胞配成0.5%～0.8%紅細胞懸液。（3）將供血者的紅細胞懸液50 μL與受血者血清（或血漿）50 μL加入主側(cè)凝膠中。受血者紅細胞懸液50 μL與供血者血清（或血漿）50 μL加入次側(cè)凝膠管中。（4）將檢測卡置于37 ℃孵育器中15 min。即刻使用專用離心機離心 5 min（900 rpm 2 min，1500 rpm 3 min），取出，肉眼判定結(jié)果。

2 結(jié)果

對參與本次研究的所有調(diào)查者進行交叉配血及血型鑒定，僅出現(xiàn)了2例干擾事件，對出現(xiàn)的這2例錯誤干擾問題進行分析探討，并針對這種情況，提出了相應的對策。發(fā)現(xiàn)導致錯誤干擾的主要因素包括了假陰性反應、自身抗體免疫增高、假陽性反應、冷自身抗體增高及責任性錯誤等方面。

3 討論

3.1 假陽性反應

①形成緡錢狀。當血清在37 ℃的室溫下進行水浴時，可能導致紅細胞凝集情況發(fā)生，常見于巨球蛋白血癥、多發(fā)性骨髓瘤等常規(guī)病理血清中。可通過洗滌紅細胞的方式來克服這種情況。在完成洗滌后，滴入1滴混合，應用高倍鏡觀察結(jié)果[4]。②低溫凝集。這種情況是對冷凝集素效價過高導致的，可通過采用溫度為37 ℃的生理鹽水將紅細胞洗滌的方式排除該干擾因素[5]。③類B抗原。若患者本身受到了革蘭氏陰性桿菌的感染，就會引發(fā)抗紅細胞發(fā)生凝集?？赏ㄟ^采用標準的紅細胞標本對血清中的抗體、唾液型物質(zhì)進行測量。④T凝集。這種凝集反應是血清中抗體受到細菌污染而導致的，針對這種情況應當對標準血清中的T冷凝特異性感染進行定期檢查，檢查紅細胞凝集現(xiàn)象及污染情況，避免標準血清受到污染。解決措施如下：選擇AB血型的血清樣本與標準紅細胞樣本進行凝集試驗，對凝集現(xiàn)象進行證實[6]。采用標準的紅細胞抗體血清，為患者開展唾液吸收抑制試驗或紅細胞的吸收釋放試驗，最后在為患者輸血時，將O型血輸入。⑤患者抗體因素。在本身患有免疫性疾病的患者血清及紅細胞中，有著自身抗體的存在，直接對患者紅細胞產(chǎn)生影響，導致凝集現(xiàn)象的出現(xiàn)?？刹捎脺厮礈旒t血細胞的方式克服這種情況，做抗球蛋白血[7]。

3.2 假陰性

假陰性是應當發(fā)生凝集現(xiàn)象而未發(fā)生的情況。①弱抗原性。在老年人或新生兒的紅細胞、標本放置時間過長容易導致該種情況的發(fā)生。困擾通過堅持正反定型的方式避免差錯的發(fā)生。②血清效價標準過低，可能是采集的標本時間過長或儲存方式不當。應采用有效價格血清，將正反定型流程進行完善。③缺乏合適的紅細胞懸液濃度。應在配置懸液時注意生理鹽水與標本的比例，直至調(diào)配至標準濃度。④混合物不符標準，應將實驗流程進行嚴格規(guī)范[8]。

3.3 操作者因素

導致錯誤干擾情況發(fā)生的主要原因之一即為操作者缺乏較強的責任心。如在操作過程中忘記加入血清或抗體、離心速度掌握不合適、試劑選擇錯誤等。根據(jù)這種情況，應當加強對相關操作者綜合素質(zhì)的培養(yǎng)，提升其責任心，嚴格規(guī)范其操作標準，以提升患者輸血的安全性。