恒河猴自發性脂肪瘤的病例分析?

楊鳳梅 李艷艷 劉 權 陳麗雄 王俊斌 趙 遠 馬 進 徐鴻界 禹文海 和占龍

(中國醫學科學院/北京協和醫學院醫學生物學研究所,云南省重大傳染病疫苗研發重點實驗室,昆明 650118)

脂肪瘤(Lipoma)是一種常見的來源于間葉組織由增生的成熟脂肪組織形成的無功能性良性腫瘤,多見于 40～60歲的成年人,男性多于女性[1]。脂肪瘤可單發或多發于體表的任何部位,但多發生于肩、背、臀部及大腿內側等富含脂肪組織的部位,外科切除術后復發率極低[2]。近年來,關于動物脂肪瘤的報道常見于豬、牛、兔、犬、梅花鹿等[3-7],自發性腫瘤的報道還有SD大鼠[8],而關于非人靈長類動物如恒河猴等的脂肪瘤報道較為少見。因此,對該病例進行較為系統診斷、分析和治療,并將相關結果報道如下。

1 病例資料

1.1 病史

恒河猴來源于中國醫學科學院醫學生物學研究所靈長類中心,實驗動物生產許可證號:SCXK(滇)2015-0004,雄性,13歲,體質量 6.2 kg,圈養,健康狀況良好。2017年6月發現腹部有一隆起腫塊,采食、飲水、排便等皆正常。

1.2 臨床檢查

腫塊位于腹部肚臍正下方,呈圓柱狀不規則突起,直徑約10 cm,觸診發現腫塊邊界明顯,質地硬,實質感較強,腫塊不與表皮粘連且不移動,皮膚完整,按壓腫塊無明顯痛感(圖1)。用7號采樣針刺入腫塊組織進行抽取動作,未抽出任何內容物。體溫檢測(肛溫)為38.8℃。

圖1 腹部腫塊Fig.1 Abdominalmass

2 B超檢查

使用彩色超聲診斷系統(深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司;型號:DC-3VET)檢查,B超影像學結果:該腫塊位于腹部皮膚下層,肌肉層外。腫塊形狀不規則,邊界清晰,可見包膜回聲及少許血流信號,內部呈纖維素樣變(圖2A);在同樣檢查儀器條件和檢查部位,對正常猴子進行B超檢查進行對照,正常猴B超呈現結構清晰的皮膚層、肌肉層、腹腔內腸管等(圖2B)。

圖2 腹部脂肪瘤瘤體和正常腹部的B超成像注:A:腹部脂肪瘤瘤體;B:正常腹部Fig.2 B-ultrasound im aging of abdominallipom a and the normal part of the abdomenNote:A:abdominal lipoma;B:normal part of the abdomen

3 實驗室檢查

3.1 血樣采集

將恒河猴保定后進行后肢小隱靜脈采血4 mL,用于生理生化和血常規檢測。同時,采集10只同年齡段、雄性健康恒河猴靜脈血4 mL,作為正常對照組。檢測結果見表1和表2。堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)含量明顯高于對照組,大約是超出正常值的0.19～3.98倍;而總蛋白(TP)、白蛋白(Albumin,ALB)、總膽固醇(Total cholesterol,TC)含量則低于對照組;紅細胞(Red blood cell,RBC)、紅細胞比容(Red blood cell specific volume,HCT)低于對照組。其他指標如谷草轉氨酶(Aspartate transam inase,AST)、球蛋白(Globulin,GLB)、丙氨酸氨基轉移酶(Alanine aminotransfease,ALT)等與對照組相比均無明顯差異。

4 組織學檢查

4.1 組織固定

采集瘤體和正常猴同一部位組織,經4%甲醛溶液固定后進行病理切片,HE染色。

4.2 大體形態觀察

肉眼可見瘤體及其切面特征:①瘤體有包膜,呈圓球形。②切面淡黃色,油膩狀,質地較堅實。③局部脂肪組織壞死(圖3)。

表1 血液生化檢測結果Table 1 Blood biochemical test results

表2 血常規生理檢測結果Table 2 Blood routine test results

圖3 脂肪瘤瘤體及其切面圖注:A:切除的瘤體;B:瘤體的切面Fig.3 L ipom a tum or and its cut surfaceNote:A:excised tumor;B:section of the tumor

4.3 鏡下觀察

光學顯微鏡下觀察瘤體,結果:①由成熟的脂肪細胞組成,②瘤組織由纖維組織分割成大小不規則的小葉狀。③瘤組織各處毛細血管數量及分布不均。④有纖維性包膜(圖4A、圖4C、圖 4D)。⑤淋巴細胞浸潤。正常脂肪組織檢查結果:因脂肪被酒精及二甲苯溶解,細胞呈空泡狀。并因擠壓而呈橢圓或多角形,又因許多細胞聚集在一起,形成蜂窩狀(圖 4B)。

圖4 瘤體鏡下觀察(HE染色)注:A:瘤體組×10;B:對照組×10;C:瘤體組×20;D:瘤體組×40Fig.4 Observation of tumor under stereoscope(HE staining)Note:A:Tumor group×10;B:Control group×10;C:Tumor group ×20;D:Tumor group×40

5 討論

5.1 鏡下結構

脂肪瘤是一種正常脂肪樣組織的瘤狀物,鏡下結構與正常脂肪組織的關鍵差異在于有無薄包膜以及纖維間隔[9],脂肪瘤的瘤體周有一層薄的結締組織包囊,內有被結締組織束分成葉狀成群的脂肪細胞以及較多的結締組織或血管。脂肪瘤可在多個部位發生,但多發生于皮下組織,瘤體大小不一,大多呈扁圓形或分葉,分界清楚。

5.2 生理生化

該病例相應生理生化指標與正常猴子相比較,多數指標均在正常范圍內,部分指標有變化,如:生化指標TP和ALB均下降,血常規檢測中,指標RBC和HCT也均有所下降,本研究中的這一結果與陳麗玲[10]在狗的腫瘤性疾病研究中的結果較為一致;生化指標ALP比正常值高,這與程健瑞和吳杰敏[11]在腫瘤患者中的研究結果基本一致;而指標TC降低則與袁宏銀和張步延[12]等在良性腫瘤和惡性實體瘤患者血漿Lp(a)和其他脂類的變化研究中的結果基本一致。同時,我們對猴場內年齡和性別一致的119只肥胖的猴子進行了腹部、四肢、軀干的觸診均未發現脂肪瘤病例,初步估計恒河猴脂肪瘤的發病率低于1%。該猴子外科手術切除后預后良好。

5.3 臨床表現

人脂肪瘤患病之后一般無疼痛等不適感,在發病初期,脂肪瘤大多數體積小,為形狀規則的小腫塊,生長緩慢,對機體無明顯影響,此時,臨床上如無明顯癥狀可不作任何處理。但是隨著時間的推移腫塊會逐漸變大,并對周圍的血管和局部組織產生壓迫,最嚴重時可能會壓迫周圍的神經組織,從而導致患者出現脹痛、麻木等不適癥,最終或可出現運動障礙[13]。另外,由于供血不足和外傷可發生出血、壞死、局限性脂肪液化、囊性變和鈣化等改變,在細胞間隙和脂肪細胞周圍可見成簇吞噬脂質的泡沫狀組織細胞,伴多核巨細胞反應、散在炎癥細胞(淋巴細胞和漿細胞)浸潤,形成脂質肉芽腫和纖維化等繼發性改變。在本案例中,脂肪瘤的局部脂肪組織出現壞死,淋巴細胞浸潤,瘤體過大等明顯病理變化。

5.4 影響

脂肪瘤可發生于體表的任何地方,一般無需治療,但是脂肪瘤也有著不容小覷的危害。第一,影響日常行動。若瘤體較大,影響活動,尤其是頜面部脂肪瘤,會造成面部不對稱,影響進食等。第二,脂肪瘤本身的蔓延性可能帶來的危害。如瘤體越長越大、向其他部位擴散,甚至蔓延到全身脂肪組織,則會進一步影響恒河猴的身心健康和日常活動。第三,壓迫神經組織。少數脂肪瘤會引起疼痛感,一種是因脂肪瘤過大壓迫到神經,另一種是脂肪瘤長在內臟上,壓迫周圍的內臟器官,引起梗阻,最終威脅生命。第四,可能惡化。在某些情況下,脂肪瘤可能會惡化成脂肪肉瘤,也就是癌癥。例如長時間的輻射、化學物質的刺激、長期不規律的飲食等都有可能導致脂肪瘤的惡化。因此,對于該疾病的研究需要引起更多關注。

5.5 展望

目前對本病的發病機制尚不完全清楚,研究表明體內增強的脂肪瘤致瘤因子與機體正常細胞中某些基因片斷相結合后發生基因異常突變,導致機體局部脂肪細胞與其周圍組織細胞異常增生。同時有研究認為該脂肪瘤的發生與內分泌異常、遺傳以及脂肪增多等因素有著重要的關系[14-15]。在本病例中,病猴與同年齡的雄性恒河猴飼養于同一籠內,長期處于緊張的狀態下,導致內分泌紊亂,同時此猴體型偏胖,這也可能是該恒河猴脂肪瘤的誘因之一。

我們將在后期工作中跟蹤該病例猴術后有無復發的情況,進一步開展調查確證該病例猴的家族是否患有脂肪瘤,進而從遺傳學的角度對該疾病進行分析;同時利用超聲診斷技術來篩查自發性脂肪瘤的模型,建立有家族性、遺傳性的恒河猴種群,系統了解和研究自發性脂肪瘤疾病的發病機制,建立生理學、遺傳學、免疫學等數據庫,為開展人類脂肪瘤疾病比較醫學研究、藥物研發、治療等提供自發性恒河猴模型和相關數據支撐。