分光光度法測定不同產地苦楝子總三萜的含量

陳維冉，王 雙，蔡梅超，李學燕，于 帥，張宏斌，周洪雷

(山東中醫藥大學，山東 濟南 250355 )

苦楝子為常用中藥，該藥為楝科植物楝Melia azedarach L.的果實，在我國苦楝作為藥物使用至少已有兩千多年的歷史。苦楝子性寒，味苦，有小毒。歸肝、胃經。具有行氣止痛、殺蟲的功效，臨床上用于治療脘腹脅肋疼痛、疝痛、蟲積腹痛、頭癬、凍瘡等。苦楝的化學成分主要有三萜、甾體、生物堿、黃酮、木脂素等，還含有糖、蛋白質等[1-2]。萜類成分是苦楝子有效成分之一[3]，本文測定了不同產地苦楝子中的三萜含量，為該藥材的質量評價提供依據。

1 儀器與試藥

UV-3600Plus紫外分光光度計(島津)；旋轉蒸發器(SY-2000，上海亞榮生化儀器廠)，Mettler AE240 電子天平 (瑞士梅特勒)；采集或購買于不同產地的苦楝子藥材，經山東中醫藥大學中藥鑒定教研室李峰教授鑒定為楝科植物楝Melia azedarach L.的果實。川楝素對照品，自制，純度大于98%。甲醇和乙腈均為色譜純，其他試劑均為國產分析純。

2 方法與結果

1.2.1 對照品溶液制備

精確稱取川楝素對照品10 mg，甲醇溶解并定容于10 mL 容量瓶，搖勻，得濃度為 1.022 mg/mL 的標準儲備液。

1.2.2 供試品溶液制備

精密稱粉碎的苦楝子1.0 g，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇100 mL，稱定重量，加熱回流1 h，冷卻至室溫，稱重，甲醇補重，搖勻，過濾，即得。

1.2.3 測定波長及顯色條件

精密吸取 50 μL川楝素對照品甲醇溶液，置于具塞試管中，水浴蒸干，精密加入0.8 mL高氯酸穩定劑、0.2 mL 5%香草醛-冰乙酸顯色劑，60 ℃水浴加熱15 min后，立即移入冰水浴，精密加入5 mL冰乙酸，搖勻，室溫放置。取相應的空白試劑校正基線后，于200～600 nm波長范圍內進行全波長掃描，結果表明在515 nm處有最大吸收峰，故樣品測定波長確定為515 nm[4]。

1.2.4 線性關系考察

分別精密量取川楝素對照品甲醇溶液20,40,60,80,100 μL，分別置于具塞試管中，按上述方法制備測試樣品，在波長 515 nm 下分別測定吸光度，以吸光度 Y 對絕對量 X (μg) 繪制標準曲線，計算回歸方程。結果表明川楝素在20.44～102.20 μg 范圍內與吸光度具有良好的線性關系。Y=0.0067X-0.0046，r=0.9996。

1.2.5 精密度試驗

取川楝素對照品甲醇溶液，在上述色譜條件下，重復進樣5次測定峰面積，RSD為1.85%，表明精密度良好。

1.2.6 重復性試驗

分別精密量取苦楝子生品粉末 6 份，按供試品溶液的制備進行操作并測定，計算含量及相對標準偏差，RSD為2.47%。表明該方法重復性較好。

1.2.7 穩定性試驗

精密取苦楝子供試品溶液，按上述方法顯色后，置于室溫，分別在 0,10,20、30,40,50,60 min測定各自吸光度，測定含量，計算其相對標準偏差，RSD為2.26%，表明60 min內樣品穩定性良好。

1.2.8 回收率試驗

精密稱定已知含量的苦楝子5份，每份約0.5 g，分別精密加入川楝素對照品溶液，按上述方法分別制備供試品溶液，顯色后測定吸光度，計算總三萜含量及回收率，結果表明回收率為97.55，RSD%2.31，回收率良好，見表1。

表1 回收率試驗結果

1.2.9 樣品測定

取粉碎的苦楝子藥材，按上述方法分別制備供試品溶液，精密量取供試品溶液1 mL，按上述測定方法測定，計算含量。結果表明12批次藥材含量在4.96～8.47 mg/g之間。見表2。

表2 不同產地苦楝子中三萜含量

3 討論

3.1 含有多種化學成分，主要包括有三萜類、黃酮類、甾醇類、有機酸類、酚類多糖等化學成分，其中三萜是其驅蟲、鎮痛、抗菌抗病毒等作用的主要藥效物質[5-6]。本文以苦楝子中的川楝素為對照品，采用紫外分光光度法測定了苦楝子總三萜的含量，可以更好地了解控制藥材質量。

3.2 采用紫外分光光度法測定苦楝子藥材中總三萜的含量，該方法精密度、重復性及線性關系好，回收率滿意，可用于川楝子總三萜含量測定。