干雞糞中水分、蛋白質(zhì)和粗灰分含量的測(cè)定

湯承浩,汪玉容,周邦華，韓雪雪

(1.凱里學(xué)院 大健康學(xué)院,貴州 凱里 556011；2.凱里學(xué)院 建筑工程學(xué)院,貴州 凱里 556011；3.凱里學(xué)院附屬中學(xué),貴州 凱里 556011)

目前我國已建有的養(yǎng)雞場數(shù)量在萬只以上的蛋雞場有2208個(gè)，7938個(gè)肉雞場，除了規(guī)模比較大的工廠這種飼養(yǎng)形式外，還存在大量的養(yǎng)雞數(shù)量在萬只以下的團(tuán)體飼養(yǎng)和農(nóng)戶飼養(yǎng)的養(yǎng)雞場[1-3]，整個(gè)中國一天會(huì)產(chǎn)生高達(dá)10萬噸[4]以上雞的排泄物。較短的消化道，致使雞的體內(nèi)留下了大量未被利用的營養(yǎng)物質(zhì)及消化吸收過程中的代謝產(chǎn)物。如果沒有較好的利用，每天產(chǎn)生的大量的雞糞，不僅嚴(yán)重污染雞場環(huán)境，而且還會(huì)影響雞的發(fā)育，這樣環(huán)境會(huì)被污染而資源也會(huì)被浪費(fèi)[5-6]。

雞糞中含有大量的營養(yǎng)物質(zhì)，測(cè)定其中水分[7]、蛋白質(zhì)[8-11]和粗灰分[12-13]的含量，以確保雞糞可以作為有機(jī)肥料的主要原料。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 實(shí)驗(yàn)原料

采自貴州省黔東南凱里市下司地區(qū)養(yǎng)雞場。

2.2 實(shí)驗(yàn)試劑

國家蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品溶液(購于阿拉丁網(wǎng))、粉碎后雞糞溶液、CuSO4、C4H4K2O6、KI、NaOH、蒸餾水(實(shí)驗(yàn)室用均為分析純?cè)噭?。

2.3 實(shí)驗(yàn)儀器

容量瓶(100 mL)、具塞玻璃試管(25 mL)、坩堝、坩堝鉗、干燥器、玻璃燒杯(500 mL、1000 mL)、標(biāo)準(zhǔn)分樣篩(孔徑40目)、可調(diào)式電熱板(北京科偉永興儀器有限公司)、電子天平(FA2004 上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司)、高速中藥粉碎機(jī)(XFB - 500吉首市中誠制藥機(jī)械廠)、紫外/可見分光光度計(jì)(UV-2550 島津企業(yè)管理有限公司)、電熱鼓風(fēng)干燥箱(BGZ - 246上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)、箱式電阻爐(SX-4-10 北京科偉永興儀器有限公司)。

2.4 實(shí)驗(yàn)方法

2.4.1 干雞糞中水分的測(cè)定

將收集到的新鮮雞糞在空地自然曬干，曬干后稱取3份重量均為0.250 kg的雞糞，分別裝于3個(gè)盤中，并在盤子上貼上標(biāo)簽(1號(hào)、2號(hào)、3號(hào))。將電熱鼓風(fēng)干燥箱溫度設(shè)置為80 ℃，待干燥箱保溫穩(wěn)定后，把事前貼好標(biāo)簽的3個(gè)盤子放入，烘干6 h，取出。

2.4.2 干雞糞中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定

2.4.2.1 試劑配制

雙縮脲試液：稱取1.5 g CuSO4、6.0 g C4H4K2O6和5.0 g KI，加進(jìn)裝有500 mL蒸餾水的燒杯中，用玻璃棒攪拌溶解，邊溶解攪拌邊加入300 mL的10 % NaOH溶液，用蒸餾水水稀釋至1000 mL，攪拌均勻，即得。

對(duì)照品溶液的制備：將蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品置于燒杯中，加蒸餾水?dāng)嚢枞芙猓瞥珊繛槊? mL中含10 mg的溶液。

供試品溶液的制備：將干雞糞的溶液置于燒杯中，加蒸餾水?dāng)嚢枞芙猓瞥珊繛槊? mL中含10 mg的溶液。

2.4.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

用0.1 mol/L NaOH溶液將蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至4 mg/mL，并裝入玻璃燒杯中。五支具塞試管(25 mL)分別標(biāo)記為零、一、二、三、四、五號(hào)管，量取蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液(4 mg/mL)0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5 mL，依次加入蒸餾水至1.0 mL再加入雙縮脲試液4.0 mL，立即搖勻，25 ℃下放置30 min。參照2015年藥典的紫外-可見光分光光度法可知，測(cè)定吸光度在540 nm的波長處可測(cè)得。以干雞糞原料的蛋白質(zhì)含量(μg/mL)為橫坐標(biāo)，測(cè)定的吸光值為縱坐標(biāo)，在橫縱坐標(biāo)內(nèi)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖1示。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)蛋白的標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖1表示蛋白質(zhì)在的0～2.0 mg/mL濃度范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。

2.4.2.3 樣品處理

同樣取具塞試管(25 mL)，裝入待用的過篩雞糞原料0.2000 g，往裝有原料的試管中加入10 % KOH溶液10 mL，0.5 h的沸水浴，待起溫度與室溫接近時(shí)，用蒸餾水將其定容至25 mL，過濾，將過濾液取出。提取出來的濾液需要加1.0 mL蒸餾水以及4.0 mL雙縮脲試劑，在25 ℃下靜置0.5 h。然后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得濃度值。

2.4.3 干雞糞中粗灰分含量的測(cè)定

2.4.3.1 坩堝的灼燒

將電熱鼓風(fēng)干燥箱的溫度設(shè)置為200 ℃，待電熱鼓風(fēng)干燥箱保溫穩(wěn)定后，放入50 mL的干凈瓷坩堝，烘烤0.5 h，取出，放入事先制作好的干燥器中冷卻0.5 h。準(zhǔn)確稱量，重復(fù)此操作，直至坩堝兩次稱重之差小于0.0005 g即為恒重。

2.4.3.2 稱樣

稱取事先干燥并粉碎好的原料粉末2～3 g(精確至0.0001 g)，稱取3份，置于3個(gè)已恒重的坩堝中，并在坩堝底部標(biāo)上序號(hào)。

2.4.3.3 測(cè)定

將馬弗爐的溫度設(shè)置在550 ± 25 ℃，待溫度穩(wěn)定后，用坩堝夾將裝有雞糞粉末的3個(gè)坩堝放入馬弗爐中炭化，灼燒4 h，灼燒過程中坩堝蓋與坩堝間要留有縫隙。當(dāng)馬弗爐溫度降到到200 ℃左右，用坩堝夾取出坩堝，放入干燥器中冷卻0.5 h，稱量，重復(fù)上訴方法灼燒直至前后兩次重量之差小于0.0010 g為恒重。

3 結(jié)果與討論

3.1 干雞糞中水分含量的測(cè)定

表1 雞糞烘干前后的重量變化結(jié)果

3.2 干雞糞中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定

雞糞中蛋白質(zhì)的含量見表2。

表2 雞糞中蛋白質(zhì)的含量

3.3 干雞糞中粗灰分含量的測(cè)定

表3 坩堝恒重變化結(jié)果

表3中的坩堝灼燒前后相差重量依次為0.0004 ,0.0002,0.0002 g均小于0.001 g，故這3個(gè)坩堝均符合要求，可以使用。樣品重量變化結(jié)果見表4，樣品灼燒重量變化結(jié)果見表5。

表4 樣品重量變化結(jié)果

表5 樣品灼燒重量變化結(jié)果

W1(%)=[(33.9773-33.0933)/(35.0988-33.0933)]×100%=44.07 %

W2(%)=[(33.6239-32.7467)/(34.7521-32.7467)]×100%=43.74 %

W3(%)=[(32.9580-32.0743)/(34.0798-32.0743)]×100%=44.06 %

W1、W2、W3相對(duì)偏差(%)：平均偏差/平均值=0.0029/0.8816×100 %=0.32% 從計(jì)算結(jié)果可以看到，雞糞中的粗灰分含量為43.96%。

4 結(jié)論

從表1可知，此批干雞糞中水分含量的平均值為15.56%，其含水量比較低，一方面在運(yùn)輸?shù)倪^程中降低了成本，另一方面可以避免由于堆積而滋生細(xì)菌、害蟲，產(chǎn)生惡臭影響周圍環(huán)境。從表2的數(shù)據(jù)可知，此批雞糞中的蛋白質(zhì)平均含量為7.94%， RSD為2.17%，說明該方法所測(cè)得的結(jié)果誤差較小。該方法操作簡單、快速，但是靈敏度較低，干擾項(xiàng)較多。

此批樣品粗灰分平均含量為43.95%，含量偏高。但是粗灰分并不作為營養(yǎng)成分，含量過高的粗灰分會(huì)影響雞糞作為肥料的品質(zhì)。