湯承浩,汪玉容,周邦華,韓雪雪
(1.凱里學院 大健康學院,貴州 凱里 556011;2.凱里學院 建筑工程學院,貴州 凱里 556011;3.凱里學院附屬中學,貴州 凱里 556011)
目前我國已建有的養雞場數量在萬只以上的蛋雞場有2208個,7938個肉雞場,除了規模比較大的工廠這種飼養形式外,還存在大量的養雞數量在萬只以下的團體飼養和農戶飼養的養雞場[1-3],整個中國一天會產生高達10萬噸[4]以上雞的排泄物。較短的消化道,致使雞的體內留下了大量未被利用的營養物質及消化吸收過程中的代謝產物。如果沒有較好的利用,每天產生的大量的雞糞,不僅嚴重污染雞場環境,而且還會影響雞的發育,這樣環境會被污染而資源也會被浪費[5-6]。
雞糞中含有大量的營養物質,測定其中水分[7]、蛋白質[8-11]和粗灰分[12-13]的含量,以確保雞糞可以作為有機肥料的主要原料。
采自貴州省黔東南凱里市下司地區養雞場。
國家蛋白質標準品溶液(購于阿拉丁網)、粉碎后雞糞溶液、CuSO4、C4H4K2O6、KI、NaOH、蒸餾水(實驗室用均為分析純試劑)。
容量瓶(100 mL)、具塞玻璃試管(25 mL)、坩堝、坩堝鉗、干燥器、玻璃燒杯(500 mL、1000 mL)、標準分樣篩(孔徑40目)、可調式電熱板(北京科偉永興儀器有限公司)、電子天平(FA2004 上海舜宇恒平科學儀器有限公司)、高速中藥粉碎機(XFB - 500吉首市中誠制藥機械廠)、紫外/可見分光光度計(UV-2550 島津企業管理有限公司)、電熱鼓風干燥箱(BGZ - 246上海博迅實業有限公司醫療設備廠)、箱式電阻爐(SX-4-10 北京科偉永興儀器有限公司)。
2.4.1 干雞糞中水分的測定
將收集到的新鮮雞糞在空地自然曬干,曬干后稱取3份重量均為0.250 kg的雞糞,分別裝于3個盤中,并在盤子上貼上標簽(1號、2號、3號)。將電熱鼓風干燥箱溫度設置為80 ℃,待干燥箱保溫穩定后,把事前貼好標簽的3個盤子放入,烘干6 h,取出。
2.4.2 干雞糞中蛋白質含量的測定
2.4.2.1 試劑配制
雙縮脲試液:稱取1.5 g CuSO4、6.0 g C4H4K2O6和5.0 g KI,加進裝有500 mL蒸餾水的燒杯中,用玻璃棒攪拌溶解,邊溶解攪拌邊加入300 mL的10 % NaOH溶液,用蒸餾水水稀釋至1000 mL,攪拌均勻,即得。
對照品溶液的制備:將蛋白質標準品置于燒杯中,加蒸餾水攪拌溶解,制成含量為每1 mL中含10 mg的溶液。
供試品溶液的制備:將干雞糞的溶液置于燒杯中,加蒸餾水攪拌溶解,制成含量為每1 mL中含10 mg的溶液。
2.4.2.2 標準曲線繪制
用0.1 mol/L NaOH溶液將蛋白質標準品稀釋至4 mg/mL,并裝入玻璃燒杯中。五支具塞試管(25 mL)分別標記為零、一、二、三、四、五號管,量取蛋白質標準液(4 mg/mL)0.0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5 mL,依次加入蒸餾水至1.0 mL再加入雙縮脲試液4.0 mL,立即搖勻,25 ℃下放置30 min。參照2015年藥典的紫外-可見光分光光度法可知,測定吸光度在540 nm的波長處可測得。以干雞糞原料的蛋白質含量(μg/mL)為橫坐標,測定的吸光值為縱坐標,在橫縱坐標內作標準曲線,如圖1示。

圖1 標準蛋白的標準曲線
圖1表示蛋白質在的0~2.0 mg/mL濃度范圍內有良好的線性關系。
2.4.2.3 樣品處理
同樣取具塞試管(25 mL),裝入待用的過篩雞糞原料0.2000 g,往裝有原料的試管中加入10 % KOH溶液10 mL,0.5 h的沸水浴,待起溫度與室溫接近時,用蒸餾水將其定容至25 mL,過濾,將過濾液取出。提取出來的濾液需要加1.0 mL蒸餾水以及4.0 mL雙縮脲試劑,在25 ℃下靜置0.5 h。然后根據標準曲線,求得濃度值。
2.4.3 干雞糞中粗灰分含量的測定
2.4.3.1 坩堝的灼燒
將電熱鼓風干燥箱的溫度設置為200 ℃,待電熱鼓風干燥箱保溫穩定后,放入50 mL的干凈瓷坩堝,烘烤0.5 h,取出,放入事先制作好的干燥器中冷卻0.5 h。準確稱量,重復此操作,直至坩堝兩次稱重之差小于0.0005 g即為恒重。
2.4.3.2 稱樣
稱取事先干燥并粉碎好的原料粉末2~3 g(精確至0.0001 g),稱取3份,置于3個已恒重的坩堝中,并在坩堝底部標上序號。
2.4.3.3 測定
將馬弗爐的溫度設置在550 ± 25 ℃,待溫度穩定后,用坩堝夾將裝有雞糞粉末的3個坩堝放入馬弗爐中炭化,灼燒4 h,灼燒過程中坩堝蓋與坩堝間要留有縫隙。當馬弗爐溫度降到到200 ℃左右,用坩堝夾取出坩堝,放入干燥器中冷卻0.5 h,稱量,重復上訴方法灼燒直至前后兩次重量之差小于0.0010 g為恒重。

表1 雞糞烘干前后的重量變化結果
雞糞中蛋白質的含量見表2。

表2 雞糞中蛋白質的含量

表3 坩堝恒重變化結果
表3中的坩堝灼燒前后相差重量依次為0.0004 ,0.0002,0.0002 g均小于0.001 g,故這3個坩堝均符合要求,可以使用。樣品重量變化結果見表4,樣品灼燒重量變化結果見表5。

表4 樣品重量變化結果

表5 樣品灼燒重量變化結果
W1(%)=[(33.9773-33.0933)/(35.0988-33.0933)]×100%=44.07 %
W2(%)=[(33.6239-32.7467)/(34.7521-32.7467)]×100%=43.74 %
W3(%)=[(32.9580-32.0743)/(34.0798-32.0743)]×100%=44.06 %
W1、W2、W3相對偏差(%):平均偏差/平均值=0.0029/0.8816×100 %=0.32% 從計算結果可以看到,雞糞中的粗灰分含量為43.96%。
從表1可知,此批干雞糞中水分含量的平均值為15.56%,其含水量比較低,一方面在運輸的過程中降低了成本,另一方面可以避免由于堆積而滋生細菌、害蟲,產生惡臭影響周圍環境。從表2的數據可知,此批雞糞中的蛋白質平均含量為7.94%, RSD為2.17%,說明該方法所測得的結果誤差較小。該方法操作簡單、快速,但是靈敏度較低,干擾項較多。
此批樣品粗灰分平均含量為43.95%,含量偏高。但是粗灰分并不作為營養成分,含量過高的粗灰分會影響雞糞作為肥料的品質。