生鮮乳中抗生素殘留的檢測要點分析

劉 笑

（遼寧省檢驗檢測認證中心（遼寧省農產品及獸藥飼料產品檢驗檢測院），沈陽 110036）

長期以來，生鮮乳都憑借其豐富營養價值備受人們喜愛，隨著人們物質生活條件水平的快速提升，市場對生鮮乳供應需求迅速增大，促進了我國奶牛養殖業規模化發展。在此過程中，一旦生鮮乳中出現殘留抗生素情況，則會難以保證食品安全，給人體正常機能造成破壞，十分不利于兒童健康成長發育。鑒于此，本文從實際出發，分析了生鮮乳中抗生素殘留的檢測要點，旨在通過檢測技術的科學應用，保證生鮮乳質量，推動我國奶牛養殖業健康、持續進步發展。

1 檢測材料準備要點

技術人員按照規范無菌操作標準在養殖戶進行樣品抽取，明確檢測所需生鮮乳樣品，科學保存與運輸，保證樣品能夠滿足檢測需求。樣品送至實驗室后，將MC培養基和嗜熱乳酸鏈球菌準備好，同時準備標準對照牛乳、氯化三苯基四氮唑等試劑，一般情況下對照牛乳來源為質量檢驗監督部門進行提供，實驗所需檢測儀器包括滅菌試管、滅菌吸管、溫度計（100 ℃規格）、天平、恒溫培養箱、水浴鍋、溫箱等。

掌握以上檢測材料準備要點，能夠給接下來的生鮮乳中抗生素殘留的檢測技術順利應用打好鋪墊基礎，是檢測技術水平和質量的基礎保證，應引起重視，不可掉以輕心忽略準備事宜。

2 掌握檢測方法原理

檢測技術人員使用國標TTC（食品安全國家標準食品微生物學檢驗標準匯編GB4789 系列2010 版，已根據衛生部2010年5月26日的勘誤公告進行更新）檢測法，依據實驗檢測要求掌握應用原理，在生鮮乳樣品中放入菌種，科學培養菌種，觀察菌種一定時間內的變化，接著加入TTC 指示劑，此時樣品發生顏色變化，根據不同顏色確定生鮮乳內各種抗生素的真實殘留情況。處于不增殖狀態的生鮮乳菌種，并不會出現還原顯色情況，處于增殖狀態的生鮮乳菌種，可看見變成紅色的變化。

3 掌握采樣技術應用要點

生鮮乳樣品規格通常為500 mL，經過消毒處理后蓋上樣品瓶蓋，使用習慣從樣品瓶內取出25 mL 用以備檢，將其向錐形瓶內（已含有滅菌生理鹽水225 mL）導入，人工手搖操作令錐形瓶內溶液均勻，保持室內處于約15 ℃溫度環境，采取3500 r·min-1的速度進行10 min離心操作。完成以上步驟后，取出最上層脂肪，向另外裝置導入剩下的脫脂乳并安全存放管理。

4 掌握菌種使用要點

規范移種菌種，脫脂乳作為培養基，培養環境為恒溫狀態，控制培養時間超過15 h，控制溫度約36 ℃即可，滅菌脫脂乳后，進行1:1稀釋操作，合理存放。

5 掌握試驗指示劑調劑要點

檢測技術人員要注意標品的準確稱量，嚴格控制使用量為TTC 1 g，將其裝進燒杯內，向燒杯倒入24 mL 蒸餾水，直到燒杯內液體處于均勻狀態，再向棕色瓶導入，存放于冰箱內（7 ℃），使用指示劑時需稀釋，按照1:5的比例稀釋即可，當發現溶液呈現淡褐色、玉色情況時，指示劑不可再繼續使用。

6 嚴格規范試驗操作步驟

首先，加熱處理樣品，將9 mL樣品取出，導入試管內（160 mm×160 mm 規格），采取水浴方式對試管加熱處理，控制加熱時間5 min，控制試管處于80 ℃溫度條件，完成加熱操作后冷卻試管，直到溫度低于37 ℃。

其次，接種處理。向水浴內（36±1℃）放入活性菌液（1 mL），控制培養時間2 h。

再次，顯色階段。把4%濃度TTC指示劑按照1:5比例進行稀釋，將其中0.3 mL 取出來，導進水浴內開始培養，控制培養時間30 min，觀察顏色變化現象。

最后，復檢階段。準備一式兩份檢測樣品，當第1 次檢測呈現陽性結果時，需采取2 次檢測操作，同時開展陰陽性對照分析工作，將TTC、菌液、抗生素加入8 mL 無抗生素生鮮乳內，作為復檢陽性對照組，將TTC、菌液、加入9 mL無抗生素生鮮乳內，作為復檢陰性對照組。

7 掌握試驗判定要點

觀察水浴內培養發生的顏色變化時，要做到快速、及時，注意避光，當抗生素殘留于生鮮乳內，菌液放入檢測樣品進行培養觀察后，沒有增殖現象出現，原因在于中實際加入進入未被還原，因此顏色沒有變化。當沒有抗生素殘留于生鮮乳內，可觀察到增殖現象，被還原的TTC 呈紅色變化。判定試驗時，發生紅色變化，可作出陰性判定結果，為原色情況，則可作出陽性判定結果。

8 抗生素殘留原因分析和控制對策

引起生鮮乳內抗生素殘留的原因并不是單一的，在具體分析時要結合實際情況而行，常見原因包括以下幾方面：養殖戶面對動物疫病現階段的多樣化發展趨勢，盲目使用抗生素治療，由于用藥不合理、混合用藥等引起殘留問題；養殖戶沒有進行科學的修養期管理和執行，引起抗生素超標殘留在生鮮乳內的問題；養殖人員將一定量抗生素加入飼料內，奶牛通過飼料攝入提升了細菌耐藥性，自身免疫力降低，引起了體內殘留超標抗生素的問題。

針對以上情況，需加強對奶牛養殖抗生素使用的控制工作才能夠最大限度避免生鮮乳中發生抗生素殘留情況。在具體實踐中，可通過嚴格執行休藥期；動態監管抗生素使用；做好環境衛生管理；落實抗生素藥敏試驗；構建科學合理奶牛養殖模式；引入先進奶牛養殖技術；按時接種疫苗加強疫病防治等途徑，多角度、全方位降低生鮮乳中抗生素殘留幾率，保障我國奶牛養殖業良好發展。