犬表皮腫瘤病理診斷及分析?

趙夢(mèng)洋 李 杰 趙德明 周向梅 楊利峰

(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院國(guó)家動(dòng)物海綿狀腦病實(shí)驗(yàn)室,北京 100193)

皮膚是犬被皮系統(tǒng)的組成之一,覆蓋于體表。不同部位的皮膚組織結(jié)構(gòu)略有不同,但基本結(jié)構(gòu)相似,均由表皮、真皮以及皮下組織三層構(gòu)成。其中,表皮(epidermis,E)位于皮膚的淺層,由復(fù)層扁平上皮組成。表皮由內(nèi)向外可以分為基底層、棘細(xì)胞層、顆粒層、透明層以及角質(zhì)層共五層。基底層(stratum basale,SB)為最靠近真皮的一層,基底層排列較整齊,細(xì)胞呈低柱狀或立方形,細(xì)胞核圓形或卵圓形。棘細(xì)胞層(stratum spinosum,SS)位于基底層的淺層,是由基底細(xì)胞分化而來的。細(xì)胞較大,呈多邊形,細(xì)胞核圓形或橢圓形,核仁明顯。顆粒層(stratum granulosum,SG)細(xì)胞呈梭形或扁平狀,細(xì)胞核深染,呈橢圓形或扁圓形,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有許多透明角質(zhì)顆粒,HE染色呈強(qiáng)嗜堿性。透明層(stratum lucidum,SL)是無毛皮膚特有的一層,位于顆粒層外側(cè),由幾層細(xì)胞界限不清的扁平細(xì)胞構(gòu)成,細(xì)胞核及細(xì)胞器已退化分解,細(xì)胞質(zhì)在HE染色時(shí)呈均質(zhì)紅染或均質(zhì)透明狀。角質(zhì)層(stratum corneum,SC)位于皮膚的最表層,由已經(jīng)死亡的多層扁平角化的細(xì)胞組成,細(xì)胞核、細(xì)胞器均已消失,細(xì)胞輪廓不清。HE染色呈均質(zhì)紅染[1]。

表皮腫瘤是犬皮膚腫瘤(CPV)中上皮來源腫瘤中的一種,發(fā)生于犬的表皮腫瘤主要包括乳頭狀瘤(papilloma)、鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma)以及基底樣鱗狀細(xì)胞癌(basosquamous carcinoma)。其中,乳頭狀瘤根據(jù)其大體形態(tài)的不同又分為外生性乳頭狀瘤及內(nèi)翻性乳頭狀瘤。鱗狀細(xì)胞癌根據(jù)腫瘤細(xì)胞分化程度不同分為高分化(1級(jí))、中分化(2、3級(jí))和低分化(4級(jí))[2]。表皮腫瘤是獸醫(yī)中較為常見的腫瘤之一,是送往診斷實(shí)驗(yàn)室的最常見的組織病L學(xué)標(biāo)本之一。因?yàn)楸砥つ[瘤的發(fā)生易被主人以及獸醫(yī)發(fā)現(xiàn),而且通常腫瘤組織較易獲得,所以經(jīng)常在取樣后進(jìn)行組織病L學(xué)評(píng)估,這就對(duì)此類疾病的準(zhǔn)確診斷提出了更高的要求。本研究結(jié)合典型的表皮腫瘤病例,對(duì)犬表皮腫瘤的流行特點(diǎn)、組織病L學(xué)特征以及診斷要點(diǎn)進(jìn)行闡述。

1 材料與方法

1.1 病例來源

中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)國(guó)家動(dòng)物海綿狀腦病實(shí)驗(yàn)室診斷的犬表皮腫瘤病例,共計(jì)39例。

1.2 組織病理學(xué)檢查

腫物切除后先經(jīng)4%甲醛溶液固定5 d,隨后進(jìn)行修塊、石蠟包埋、2μm切片、HE染色,中性樹膠封片后進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察,利用DP2-BSW系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)字圖像采集。

1.3 分類

犬的表皮腫瘤分類參照《Tumors in Domestic Animals》[2]。 年齡按照 0～3歲,4～6歲,7～9歲,≥10歲分為4組。發(fā)病部位分為頭面部、肩頸部、背部、腹部、四肢、會(huì)陰以及體表多處。

2 結(jié)果

2.1 犬表皮腫瘤分析

根據(jù)對(duì)39例表皮腫瘤病例的統(tǒng)計(jì)分析,從腫瘤類型來看(圖1),鱗狀細(xì)胞癌以及乳頭狀瘤較為常發(fā)。最高發(fā)的是鱗狀細(xì)胞癌,共18例,占比46%,乳頭狀瘤共15例,占比39%。在鱗狀細(xì)胞癌中,中分化程度的鱗狀細(xì)胞癌較常發(fā)。從年齡來看(圖2),不同種類的表皮腫瘤發(fā)病率與犬年齡之間的關(guān)系不同。乳頭狀瘤常發(fā)于0～3歲的幼犬及青年犬,占全部乳頭狀瘤患犬的的72%。而鱗狀細(xì)胞癌和基底樣鱗狀細(xì)胞癌則更常發(fā)于7歲以上的老齡犬,分別占相應(yīng)種類腫瘤患犬的72%、83%。從性別來看(表1),雌性病例有12例,其中1例已絕育;雄性病例20例,其中5例已絕育;未知性別7例。雄性發(fā)病率略高于雌性。從發(fā)病部位來看(表2),表皮腫瘤多發(fā)生于頭面部,其次是肩頸部、背部、腹部、四肢以及會(huì)陰處。

圖1 犬表皮各類型的腫瘤發(fā)生率Fig.1 Incidence of various types of tumors in canine epidermis

2.2 犬表皮腫瘤病例

2.2.1 乳頭狀瘤

圖2 犬表皮各類型腫瘤的年齡分布Fig.2 Data of age among each type of tumors in canine

表1 犬表皮各類型腫瘤的性別分布Table 1 Data of sex among each type of tumors in canine epidermis

表2 犬表皮各類型腫瘤的發(fā)病部位分布Table 2 Data of sites among each type of tumors in canine epidermis

2.2.1.1 外生性乳頭狀瘤(exophytic papilloma):鏡下可見,典型的外生性乳頭狀瘤呈多重手指樣結(jié)構(gòu)(圖3A、B)。組成乳頭狀或者手指樣結(jié)構(gòu)的上皮增生、角質(zhì)化。增生的表皮從外向內(nèi)依次為角質(zhì)細(xì)胞層、顆粒層、棘細(xì)胞層和基底細(xì)胞層。角質(zhì)層可見紅染的均質(zhì)的角蛋白。細(xì)胞的增生主要發(fā)生在顆粒層和棘細(xì)胞層,細(xì)胞體積大,細(xì)胞核淡染,核仁明顯,細(xì)胞質(zhì)豐富,細(xì)胞界限不明顯。顆粒層中顆粒細(xì)胞聚集巨大的圓形角質(zhì)透明蛋白顆粒。在棘細(xì)胞層和顆粒層可見挖空細(xì)胞分布,挖空細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核濃縮。基底層細(xì)胞呈柱狀,細(xì)胞核圓形或橢圓形,位于中央,染色深,細(xì)胞質(zhì)較少,粉紅染(圖3C、D)。2.2.1.2 內(nèi)生性乳頭狀瘤(inverted papilloma):鏡下可見,皮膚表皮層增厚和大量均質(zhì)紅染呈片層狀排列的角化物質(zhì),鱗狀上皮細(xì)胞呈乳頭狀或指狀向內(nèi)部凸出;增生的腫瘤細(xì)胞呈小梁狀交錯(cuò)排列,分隔結(jié)締組織呈大小不等的小島狀。高倍鏡下增生的表皮結(jié)構(gòu)與外生性乳頭狀瘤相似,也可見大的角質(zhì)透明顆粒、少量細(xì)胞質(zhì)透明、核固縮的挖空細(xì)胞(圖4A、B)。

圖3 外生性乳頭狀瘤(HE染色)Fig.3 Exophytic papilloma(HE staining)

圖4 內(nèi)生性乳頭狀瘤(HE染色)Fig.4 Inverted papilloma(HE staining)

2.2.2 鱗狀細(xì)胞癌(圖5)

2.2.2.1 高分化鱗狀細(xì)胞癌(well-differentiated squamous cell carcinoma):腫瘤組織向皮下侵襲性生長(zhǎng),有數(shù)量較多的橢圓形、分化程度不同的鱗狀細(xì)胞團(tuán)或細(xì)胞索,即“癌巢”。增生的鱗狀上皮表現(xiàn)出從基底細(xì)胞到角質(zhì)細(xì)胞的良好分化,中央可見透明的、強(qiáng)嗜酸性的角化珠(癌珠)。腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生數(shù)量不等的角化蛋白,即細(xì)胞質(zhì)中嗜酸性的纖維物質(zhì)。腫瘤細(xì)胞體積較大,橢圓形,泡狀核,有單個(gè)位于中心的明顯核仁,細(xì)胞質(zhì)豐富,嗜酸性,細(xì)胞邊界清晰,細(xì)胞核多形性較小,未見有絲分裂象。

2.2.2.2 中分化鱗狀細(xì)胞癌(moderately differentiated squamous cell carcinoma):腫瘤細(xì)胞所圍成的島狀結(jié)構(gòu)比高分化鱗狀細(xì)胞癌要小,腫瘤細(xì)胞侵襲性強(qiáng)于高分化鱗狀細(xì)胞癌。腫瘤細(xì)胞中嗜酸性細(xì)胞質(zhì)相對(duì)較少,大部分為分化程度較低的鱗狀細(xì)胞團(tuán),中央還未形成透明的、強(qiáng)嗜酸性的癌珠,只有極個(gè)別細(xì)胞團(tuán)形成小的嗜酸性角化珠或嗜酸性角化纖維。細(xì)胞核表現(xiàn)出較大的多形性和深染性,有絲分裂象較多。

2.2.2.3 低分化鱗狀細(xì)胞癌(poorly differentiated squamous cell carcinoma):增生的鱗狀上皮呈片狀生長(zhǎng),未形成典型的“癌巢”結(jié)構(gòu),可見基底細(xì)胞向角質(zhì)細(xì)胞的分化。腫瘤細(xì)胞具有很強(qiáng)的侵襲性,通常表現(xiàn)為單個(gè)細(xì)胞或結(jié)締組織基質(zhì)中的小群細(xì)胞,細(xì)胞質(zhì)呈雙染性,細(xì)胞核極為多形、深染,可見多量有絲分裂象。

圖5 鱗狀細(xì)胞癌(HE染色)注:A、B為高分化鱗狀細(xì)胞癌;C、D為中分化鱗狀細(xì)胞癌;E、F為低分化鱗狀細(xì)胞癌Fig.5 Squamous cell carcinoma(HE staining)Note:AB is well-differentiated squamous cell carcinoma;CD is moderately differentiated squamous cell carcinoma;EF is poorly differentiated squamous cell carcinoma

2.2.3 基底樣鱗狀細(xì)胞癌:鏡下可見,腫物組織表皮完整,腫物主要位于真皮層內(nèi),與表皮層相連,被結(jié)締組織小梁分割成形狀不規(guī)則的多個(gè)小島樣結(jié)構(gòu)。小島內(nèi)中央為染色較淺的鱗狀細(xì)胞團(tuán)塊。小島中央?yún)^(qū)域細(xì)胞體積較大,橢圓形,泡狀核,有單個(gè)位于中心的明顯核仁,細(xì)胞質(zhì)豐富,嗜酸性,細(xì)胞邊界清晰;周圍分布數(shù)量眾多的基底樣細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞細(xì)胞核呈圓形,嗜堿性強(qiáng),細(xì)胞核質(zhì)比大,細(xì)胞質(zhì)較少,細(xì)胞界限不明顯,可見有絲分裂象(圖6)。

圖6 基底樣鱗狀細(xì)胞癌(HE染色)Fig.6 Basosquamous carcinoma(HE staining)

3 討論

根據(jù)本次分析結(jié)果可得,犬最常發(fā)的表皮腫瘤為鱗狀細(xì)胞癌,占全部表皮腫瘤病例的46%,多為中分化程度的鱗狀細(xì)胞癌。其次為占比39%的乳頭狀瘤,以外生性乳頭狀瘤為主。基底樣鱗狀細(xì)胞癌較少發(fā)生。不同種類的表皮腫瘤發(fā)病率與年齡之間的關(guān)系不同,乳頭狀瘤易發(fā)于幼齡犬,鱗狀細(xì)胞癌與基底樣鱗狀細(xì)胞癌易發(fā)于老齡犬。表皮腫瘤多發(fā)于犬的頭面部。這些與之前的文獻(xiàn)報(bào)道[2]相似。雄性發(fā)病率略高于雌性,而之前的文獻(xiàn)報(bào)道顯示表皮腫瘤并無明顯的性別傾向,這應(yīng)該與樣本量不足有關(guān)。

乳頭狀瘤是一種良性的表皮(鱗狀上皮)增生性腫瘤,由乳頭狀瘤病毒(PV)感染引起[3-4]。乳頭狀瘤在犬易發(fā),主要影響幼年動(dòng)物,無性別偏好,病變的發(fā)生可能是單中心或多中心的,頭部最常見。在犬中,皮膚乳頭狀瘤與CPV-2、CPV-6和CPV-7有關(guān)[5]。目前發(fā)現(xiàn)了三種不同的與乳頭瘤病毒有關(guān)的組織病L學(xué)變異亞型,分別為乳頭狀亞型、漏斗亞型以及色素丘疹亞型。內(nèi)翻性乳頭狀瘤是乳頭狀瘤中的一種特殊情況,無年齡品種性別傾向[6]。應(yīng)注意病毒性乳頭狀瘤與鱗狀乳頭狀瘤的鑒別診斷,后者只是一種“類腫瘤疾病”,是非腫瘤性乳頭狀腫塊。在進(jìn)行組織病L學(xué)診斷時(shí),后者并無巨大的角質(zhì)透明顆粒、挖空細(xì)胞、包涵小體等細(xì)胞病變的發(fā)生[2,7]。

鱗狀細(xì)胞癌是包括禽類在內(nèi)的所有家畜中最常見的惡性皮膚腫瘤之一。犬的鱗狀細(xì)胞癌可能發(fā)生在犬的任何一個(gè)年齡段,發(fā)病率隨著年齡的增長(zhǎng)而增加,發(fā)病高峰期在6～13歲。無性別傾向。常發(fā)于犬的頭部、腹部、前后肢以及會(huì)陰部。主要表現(xiàn)為表皮增生、角化過度或角化不全、棘皮癥等。在高分化的腫瘤中,會(huì)形成透明的強(qiáng)嗜酸性癌珠;在低分化腫瘤中,只有少數(shù)細(xì)胞有細(xì)胞質(zhì)內(nèi)嗜酸性角蛋白。單個(gè)腫瘤細(xì)胞有大的卵球形核,通常是泡狀核,有一個(gè)中央的突出的核仁,豐富的細(xì)胞質(zhì)從淡嗜酸性到明亮嗜酸性不等,細(xì)胞邊界清晰。在低分化的鱗狀細(xì)胞癌中能觀察到有絲分裂象的出現(xiàn)。腫瘤鱗狀上皮島中常有中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),在腫瘤上皮周圍的結(jié)締組織基質(zhì)中存在漿細(xì)胞和淋巴細(xì)胞[2]。

基底樣鱗狀細(xì)胞癌是形態(tài)組織學(xué)特性介于基底細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌之間的惡性程度低的一類腫瘤,主要由基底細(xì)胞和鱗狀分化灶組成。基底樣鱗狀細(xì)胞癌很罕見,一般只在犬中有發(fā)生。發(fā)病高峰在6～12歲,無性別傾向,主要發(fā)生在犬的頭面部、頸部以及四肢。腫瘤的發(fā)生是從皮內(nèi)到皮下,常伴有表皮潰瘍和脫毛。腫物主要位于真皮層內(nèi),與表皮層相連,被結(jié)締組織小梁分割成形狀不規(guī)則的多個(gè)小島樣結(jié)構(gòu)。小島外周的基底樣細(xì)胞常有黑色素沉積。該腫瘤不發(fā)生轉(zhuǎn)移,所以手術(shù)切除是最有效的治療方案。

需要注意的是,在先前的分類中,犬的基底細(xì)胞癌也分屬于表皮腫瘤,但是最新的分類已將其歸類為毛母細(xì)胞瘤[8],所以本文不再贅述。

綜上所述,本文通過對(duì)收集到的39例犬表皮腫瘤病例的腫瘤類型、發(fā)病年齡、性別、發(fā)病部位等信息進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,總結(jié)了犬表皮腫瘤的流行特點(diǎn)以及組織病L學(xué)特征,為今后該部位腫瘤的診斷和鑒別診斷提供參考。