三陰乳腺癌AR及ki67的表達(dá)與預(yù)后

鄒綺嫦 周泳健 甄逸

【摘要】目的：三陰乳腺癌 AR 及 Ki67的表達(dá)情況及相應(yīng)的預(yù)后效果。方法：選取肇慶市第一人民醫(yī)院2014年 2月至2021年 2 月收治的三陰乳腺癌患者96例，根據(jù)雄激素受體（AR）和增殖細(xì)胞核抗原（Ki67）表達(dá)強(qiáng)度將患者分為低表達(dá)組和高表達(dá)組兩組，跟蹤統(tǒng)計(jì)兩組患者的預(yù)后效果。結(jié)果：兩組患者的 AR 與 Ki67表達(dá)情況具有顯著性差異（P <0.05）。高表達(dá)組患者疾病無(wú)進(jìn)展月數(shù)低于低表達(dá)組，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移發(fā)生率和轉(zhuǎn)移部位則都高于低表達(dá)組，差異均具有顯著性（P <0.05），但兩組患者的局部復(fù)發(fā)情況近似，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P >0.05）。結(jié)論： AR 與 Ki67的表達(dá)與三陰乳腺癌呈現(xiàn)出強(qiáng)正相關(guān)性，且兩者的表達(dá)程度與預(yù)后效果呈顯著的負(fù)性相關(guān)關(guān)系。

【關(guān)鍵詞】三陰乳腺癌; AR; ki67;預(yù)后

【中圖分類(lèi)號(hào)】R737.9【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2096-5249（2021）18-0160-02

人乳腺癌是一種臨床常見(jiàn)惡性腫瘤，位居女性惡性腫瘤首位，男性也存在一定的患病風(fēng)險(xiǎn)（約1%左右），疾病始于乳腺組織，異常增長(zhǎng)癌細(xì)胞會(huì)逐漸入侵周?chē)M織，擴(kuò)散到身體其他部位，進(jìn)而對(duì)人們的生命健康產(chǎn)生嚴(yán)重威脅[1]。目前其高發(fā)病率與致殘率、高轉(zhuǎn)移率、高復(fù)發(fā)率以及發(fā)病年輕化和發(fā)病率上升的趨勢(shì)使其成為臨床熱點(diǎn)[2]。

乳腺癌有多種分子分型。三陰乳腺癌是指雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）及人表皮生長(zhǎng)因子受體（Her-2）均為陰性的一種特殊的乳腺癌，占乳腺癌整體的10%～17%[3]。此類(lèi)乳腺癌侵襲性極高、復(fù)發(fā)率高、5年生存率低并對(duì)激素治療不敏感。因此，三陰乳腺癌的檢測(cè)、治療和預(yù)后越來(lái)越廣泛地得到關(guān)注。劉志英等[4]學(xué)者的研究證明雄激素受體（AR）和增殖細(xì)胞核抗原（Ki67）與三陰乳腺癌具有一定的相關(guān)性。本研究通過(guò)檢驗(yàn)三陰乳腺癌患者AR與 Ki67的表達(dá)與三年預(yù)后效果，為臨床提供指導(dǎo)和依據(jù)。

1對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2014年2月至2021年2月肇慶市第一人民醫(yī)院就診的三陰乳腺癌女性患者96例。根據(jù)AR 和Ki67表達(dá)強(qiáng)度將患者分為低表達(dá)組和高表達(dá)組兩組。將AR 和 Ki67陽(yáng)性得分均為 0～1分的患者分到低表達(dá)組，共56例，將AR 和 Ki67陽(yáng)性得分為2～4分的患者分到高表達(dá)組，共40例。兩組患者的一般資料（年齡、絕經(jīng)比例、體重、腫瘤直徑）差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性，見(jiàn)表1。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡范圍區(qū)間為25～65歲;（2）首次發(fā)病;（3）病理檢查確診為三陰乳腺癌;（4）患者擁有自主意識(shí)，可以清晰表達(dá)自己的想法、觀點(diǎn);（5）漢族;（6）對(duì)患者講述此次研究方法、目的，自愿加入并簽寫(xiě)同意書(shū)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）妊娠期或哺乳狀態(tài)的患者;（2）患有其他部位惡性癌癥;（3）病理資料不全或病理分型不明確者;（4）存在嚴(yán)重精神障礙疾病或有嚴(yán)重并發(fā)癥;（5）伴有肝、腎等嚴(yán)重器質(zhì)性病變者;（6）患者具有少數(shù)民族或其他國(guó)家的血統(tǒng);（7）伴有血液病患者;（8）無(wú)法配合者。

1.2 方法

首先，使用針刺法采集病灶組織。將所得活檢組織標(biāo)本立即放入到4%中性甲醛固定液中，浸泡時(shí)間為6 h，固定好后用石蠟進(jìn)行包埋，以備后續(xù)觀察使用。在進(jìn)行水化切片前應(yīng)注意前進(jìn)行脫蠟處理，在預(yù)處理后使用3%H2O2去離子水孵育15 min 以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，每隔兩分鐘用磷酸緩沖鹽溶液（Phosphate Bu?er Saline，PBS）沖洗一次，總共三次。隨后滴加一抗，4 °C過(guò)夜后每隔兩分鐘進(jìn)行一次PBS沖洗，共三次。滴加通用型 IgG 抗體-HRP多聚體，37°C 孵育15 min ，三次 PBS沖洗。使用DAB溶液顯色后，使用蒸餾水沖洗，復(fù)染脫水后進(jìn)行透明封片。使用陽(yáng)性切片（前列腺癌組織切片）為陽(yáng)性參照，用PBS 為陰性參照。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 AR和Ki67表達(dá)能力

對(duì)于 AR的結(jié)果，將細(xì)胞核內(nèi)有棕黃色顆粒的細(xì)胞作為陽(yáng)性細(xì)胞。若光學(xué)顯微鏡下無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞或陽(yáng)性細(xì)胞<10%則計(jì)為0分，若陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占整體細(xì)胞的10%～25%則計(jì)為1 分，26%～50%計(jì)為2分，51%～75%計(jì)為 3分，76%～100%計(jì)為 4分。對(duì)于 Ki67的結(jié)果，同樣將細(xì)胞核內(nèi)有棕黃色顆粒的細(xì)胞作為陽(yáng)性細(xì)胞。若光學(xué)顯微鏡下無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞或陽(yáng)性細(xì)胞<5%則計(jì)為0分，若陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占整體細(xì)胞的6%～25%則計(jì)為1分，26%～50%計(jì)為2分，51%～75%計(jì)為3分，76%～100%計(jì)為4分。統(tǒng)計(jì)低表達(dá)組和高表達(dá)組AR 和 Ki67的陽(yáng)性得分，比較兩組 AR 和 Ki67表達(dá)能力。

1.3.2 預(yù)后效果

追蹤患者隨后三年的門(mén)診或者住院病例，并對(duì)患者進(jìn)行一年一次的追蹤隨訪(fǎng)，記錄患者有無(wú)術(shù)后3年內(nèi)疾病變化。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以（ ±s）表示，采用t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用Fisher χ2檢驗(yàn)，當(dāng) P<0.05時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 兩組患者AR和Ki67表達(dá)能力及陽(yáng)性得分比較

共有41.67%（40/96）的患者為AR 陽(yáng)性，62.50%（60/96）的患者為 Ki67陽(yáng)性。所有 AR陽(yáng)性患者均為 Ki67陽(yáng)性， AR與 Ki67的表達(dá)呈現(xiàn)出相關(guān)性，兩者亦與三陰乳腺癌呈現(xiàn)相關(guān)性且Ki67的相關(guān)性更高。兩組患者的AR 和Ki67的陽(yáng)性得分具有顯著性差異（P<0.05），見(jiàn)表2。

2.2 兩組患者預(yù)后效果比較

兩者疾病無(wú)進(jìn)展月數(shù)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況均存在顯著性差異（P<0.05），但兩者局部復(fù)發(fā)情況近似（P>0.05），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。高表達(dá)組出現(xiàn)腦、肺、肝、骨和軟組織轉(zhuǎn)移，出現(xiàn)多例多處轉(zhuǎn)移。而低表達(dá)組遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移僅出現(xiàn)肺轉(zhuǎn)移和軟組織轉(zhuǎn)移，未出現(xiàn)多處轉(zhuǎn)移現(xiàn)象，見(jiàn)表3。

3討論

近些年受環(huán)境、飲食等各種因素的影響我國(guó)乳腺癌發(fā)病率增幅速度明顯高于世界水平，成為影響國(guó)民生活質(zhì)量的一大重要因素，為醫(yī)學(xué)界所廣泛關(guān)注。三陰乳腺癌作為一種特殊分型，癌細(xì)胞侵襲性強(qiáng)，容易局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，且對(duì)激素治療不敏感，預(yù)后效果較差。因此三陰乳腺癌對(duì)患者的健康和生活質(zhì)量造成的威脅尤為嚴(yán)重。臨床目前尚無(wú)統(tǒng)一的治療方案。

AR是類(lèi)固醇激素家族受體中的一員，雄激素只有通過(guò)結(jié)合AR才能發(fā)揮作用。 AR及其配體雄激素作為性激素，在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展中起到一定的作用。目前研究已經(jīng)基本明確了雌激素與孕激素在乳腺癌中的作用機(jī)制。而通常情況下雄激素通過(guò)直接或間接協(xié)同作用刺激雌激素從而刺激作用于乳腺癌，少數(shù)情況下可以直接轉(zhuǎn)化為雌激素發(fā)揮作用。王小利等[5]研究顯示AR在乳腺癌患者中陽(yáng)性表達(dá)率約為 35%～90%，與本研究一致。由于三陰乳腺癌相對(duì)不受激素干擾，這與本研究中AR 陽(yáng)性率顯著低于 Ki67陽(yáng)性率這一點(diǎn)符合。有研究顯示AR是三陰乳腺癌預(yù)后不良的指標(biāo)，會(huì)加速疾病進(jìn)程和縮短無(wú)病生存期[6]。Ki67作為一類(lèi)細(xì)胞增殖分子，在多種惡性腫瘤中被發(fā)現(xiàn)，對(duì)腫瘤的異常增殖和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移均具有一定的影響。多項(xiàng)研究表明， Ki67高表達(dá)是提示患者預(yù)后不良的良好指標(biāo)[7-8]。既往研究[9-10]對(duì)AR 和Ki67對(duì)預(yù)后具有負(fù)面影響的結(jié)論與本研究顯示的結(jié)果一致，高表達(dá)組的疾病進(jìn)展情況顯著加速，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和多處轉(zhuǎn)移的情況遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于低表達(dá)組。

綜上所述，本文論證了AR與 Ki67的表達(dá)與三陰乳腺癌的相關(guān)性，證明了AR與 Ki67的高表達(dá)是不良的預(yù)后因素，容易導(dǎo)致局部復(fù)發(fā)和多處遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，加速疾病復(fù)發(fā)進(jìn)展。為臨床檢測(cè)三陰乳腺癌和分析預(yù)后干擾因素提供一定的臨床依據(jù)與參考。

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（收稿日期：2021-05-25）