氣相-串聯(lián)質(zhì)譜分析茭白中敵磺鈉的殘留

張錦芳，阮大勝，張 陽，楊 星，徐 玥，劉 焱，徐文平,*

(1.華東理工大學 藥學院，上海 200237；2.國化低碳技術(shù)工程中心，江蘇昆山 215313；3.上海南方農(nóng)藥研究中心，上海 201702；4.中國化工經(jīng)濟技術(shù)發(fā)展中心，北京 100723)

茭白是我國南方重要的水生蔬菜，種植歷史悠久，種植面積十分廣闊，營養(yǎng)價值豐富，并具有一定的藥用功效，深受人們喜愛[1]。茭白在生長過程中會被菰黑粉菌侵染，產(chǎn)生灰茭(病態(tài))和白茭(日常食用)，種植戶常噴灑敵磺鈉減少灰茭的產(chǎn)生。同時敵磺鈉能夠促進茭白提前孕茭和茭白的膨大[2]。

敵磺鈉(fenaminosulf，圖1)是一種常用保護性殺菌劑。目前常用于檢測敵磺鈉的方法有高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法和薄層色譜法[3,4]。由于敵磺鈉見光易分解，在光照下的半衰期僅 10 min[5]，在樣品前處理過程中很容易分解，造成回收率低和重現(xiàn)性差。N,N-二甲基苯胺是敵磺鈉在茭白體內(nèi)的代謝產(chǎn)物，敵磺鈉在進入茭白體內(nèi)后會在短時間內(nèi)轉(zhuǎn)變成N,N-二甲基苯胺[4]。同時敵磺鈉并不穩(wěn)定，在利用質(zhì)譜對敵磺鈉進行測定時，N,N-二甲基苯胺是敵磺鈉的主要碎片結(jié)構(gòu)，一些敵磺鈉的檢測方法常選用N,N-二甲基苯胺作為敵磺鈉的定量結(jié)構(gòu)[6,7]。因此本文通過測定敵磺鈉的代謝產(chǎn)物N,N-二甲基苯胺來確定茭白中敵磺鈉的殘留，以N,N-二甲基苯胺的殘留量為指標間接反應敵磺鈉在茭白中的殘留。該方法回收率高，穩(wěn)定性高，為敵磺鈉殘留量的測定提供了新的思路。

圖1 敵磺鈉及其代謝物N,N-二甲基苯胺的結(jié)構(gòu)式

1 材料與方法

1.1 試驗材料

N,N-二甲基苯胺標準品(上海安譜實驗科技股份有限公司)；乙腈(上海凌峰化學試劑有限公司)；無水硫酸鎂(上海凌峰化學試劑有限公司)；C18(上海安譜實驗科技股份有限公司)；PSA (上海安譜實驗科技股份有限公司)；甲醇(上海凌峰化學試劑有限公司)；氯化鈉(上海凌峰化學試劑有限公司)。

1.2 試驗儀器

安捷倫 7890A-5977B GC-MS(美國安捷倫公司)；電子天平(德國 Sartorius公司)；離心機(德國Sigma公司)；渦旋儀(美國SCILOGEX公司)；微孔濾膜(20 μm，上海安譜實驗科技股份有限公司)；超聲清洗器(上海科導超聲儀器有限公司)。

1.3 試驗方法

1.3.1 標準溶液的配置

用電子天平稱取 20.00 mgN,N-二甲基苯胺標準品，置于避光離心管中，加入1 mL甲醇溶液，使其完全溶解，得到20 mg/mL供試母液，在4 ℃條件下，保存待用(保存周期少于5 d)。

1.3.2 樣品的前處理

把茭白樣品切成1～2 cm的碎塊充分混勻后，用四分法縮分樣品。再取150 g置于食品粉碎機中攪碎。從中稱取5 g (±0.001 g)置于50 mL離心管中，加入5 mL水、10 mL乙腈，充分震蕩提取15 min，然后加入1.5 g氯化鈉、4 g無水硫酸鎂，快速震蕩后冰浴，放入離心機8 000 r/min離心3 min。取上層清液1.5 mL置于2 mL離心管中，加入150 mg無水硫酸鎂、50 mg C18和50 mg PSA。充分震蕩后，放入離心機8 000 r/min離心3 min。取上層清液用0.22 μm的濾膜過濾后，置于棕色進樣瓶，送GC-MS檢測。樣品設3個重復。

1.3.3 氣相及質(zhì)譜條件

進樣口溫度 280 ℃，不分流進樣，柱流速1 mL/min。采用程序升溫法：起始溫度 35 ℃，以10 ℃/min的速度升至120 ℃，保持120 ℃ 1 min，繼續(xù)以30 ℃/min的速度升溫至280 ℃，維持280 ℃10 min。接口溫度280 ℃，離子源230 ℃，四級桿150 ℃，電子轟擊源(EI) 70 eV。N,N-二甲基苯胺的定量離子120，定性離子77。

2 試驗結(jié)果

2.1 線性方程

取一定量的N,N-二甲苯胺標準品，用乙腈稀釋成200、100、50、20、10 μg/L的梯度溶液，同時加入定量的萘作為內(nèi)標物。以標準品的濃度作為橫坐標，相對響應值作為縱坐標，繪制成標準曲線圖，得到線性回歸方程y=0.003 3x+0.005 8，R2=0.999 4，線性關(guān)系良好。

2.2 回收率

選取不添加敵磺鈉和N,N-二甲基苯胺的茭白樣品進行添加回收率測定。稱取已粉碎的茭白 5 g置于50 mL離心管中，加入10 μL不同濃度的N,N-二甲基苯胺標準品溶液，使茭白中N,N-二甲基苯胺添加濃度為25、50、100 μg/kg，每個濃度設置5個重復，按1.3.2和1.3.3節(jié)的試驗步驟進行樣品處理與檢測。回收率結(jié)果如表1所示。

表1 回收率測定結(jié)果

2.3 檢出限

通過不斷減少N,N-二甲基胺在茭白空白基質(zhì)中的添加量，最終測定N,N-二甲基胺在茭白中的最小檢出限為10 μg/kg，檢測譜見圖2，N,N-二甲基胺的保留時間為9.6 min。

圖2 茭白樣品中添加10 μg/kg N,N-二甲基苯胺的色譜圖

3 結(jié)果與討論

敵磺鈉是目前常用的殺菌劑，被廣泛應用于一些土傳病害的防治。敵磺鈉具有促進茭白孕茭和茭白膨大的作用，故敵磺鈉的施用在茭白種植過程中不可或缺。農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥、其代謝物、降解物和其他轉(zhuǎn)化物的總稱[8]。本文通過建立GC-MS檢測敵磺鈉代謝物N,N-二甲苯胺的方法對敵磺鈉在茭白中的殘留進行表征。該檢測方便快速，解決了之前由于敵磺鈉見光易分解造成的回收率差，重現(xiàn)性低的問題，為茭白中敵磺鈉的檢測提供了新思路。