TB-IGRA診斷艾滋病合并結核的臨床價值分析

全文 陸興

（揚州市第三人民醫院 江蘇 揚州 225012）

HIV感染是一種特異性免疫系統功能受損為主要特點的全身性疾病，可以并發各種機會性感染[1]。結核是艾滋病患者最常見的威脅生命的機會性感染之一。AIDS合并結核時臨床癥狀復雜、體征多變，肺部影像學通常缺乏特異性，傳統的抗酸桿菌痰涂片和培養仍是肺部結核菌感染診斷的金標準，但分枝桿菌培養耗時長，總體陽性率低。HIV感染者一旦感染了結核分枝桿菌，會大大縮短發病的潛伏期.迅速發展為艾滋病并快速惡化至死亡。因此尋找HIV/AIDS患者合并結核病感染的快速診斷方法，及時控制HIV/AIDS患者結核分枝桿菌的感染具有十分重要的意義。結核感染TB-IGRA主要用于檢測結核感染后特異性T細胞分泌的干擾素(IFN-γ)，并據此結果判斷是否感染結核。本研究對揚州市第三人民醫院，近年住院的HIV合并結核的患者的臨床資料進行分析，探討TB-IGRA對于診斷結核的臨床價值。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年6月-2018年6月揚州市第三人民醫院收治的44例診斷為艾滋病合并結核病患者，根據其CD4+T淋巴細胞檢測計數分為三組，分別是CD4≤50 cells/ul、51cells/ul≤CD4≤200cells/ul、CD4≥201cells/ul，分析三組間TBIGRA陽性率的差異。

1.2 研究方法

TB-IGRA檢測：采用靜脈穿刺術，使用經無菌工藝處理的肝素鈉或肝素鋰抗凝真空采血管采集全血樣本，采集量不低于4ml。

培養液的分裝：在生物安全柜內將陰性對照培養液（N）、陽性對照培養液（P）和測試培養液（T）按照手柄方向自左向右依次加入至細胞培養板相應孔內，100uL/孔；

全血分裝：全血采集后在采血管中輕柔顛倒混勻3～5次，8小時之內在生物安全柜內將其分裝到細胞培養板相應孔內（含有“N”、“P”、“T”培養液各100uL），1.0mL/孔。

培養：蓋緊細胞培養板上蓋，迅速放入37℃電熱恒溫培養箱培養16～24小時，培養過程中保持細胞培養板平放，不能顛倒。

收集：培養結束后，將細胞培養板放置于平整桌面上，靜置1分鐘小心開蓋，從每個細胞培養板孔中吸取上清進行IFN-γ檢測。注意不可吸收到細胞層，防止溶血。

使用安圖A2000進行檢測，輸出結果。

1.3.統計學方法

采用SAS 9.3軟件對不同檢測方法的檢測結果進行統計分析，采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2.結果

2.1 不同CD4+淋巴細胞計數亞組TB-IGRA陽性的比較

我們將患者根據CD4+淋巴細胞計數分為三組分別是CD4≤50 cells/ul 、51 cells/ul≤CD4≤200cells/ul、CD4≥201cells/ul（見表1），經卡方檢驗，差異有統計學意義（P＜0.05）；第一組與第二組比較差異沒有統計學意義（P＞0.05）；第一組與第三組比較差異有統計學意義（P＜0.05）；第二組與第三組比較，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 不同CD4+淋巴細胞計數亞組TB-IGRA的陽性例數[n(%)]

2.2 TB-IGRA陽性率與痰涂片陽性率對比

44例診斷為HIV感染合并結核患者中，TB-IGRA陽性20例（45.5%），痰涂片陽性17例（38.6%），TB-IGRA陽性率與痰涂片陽性率經卡方檢驗，差異沒有統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2.TB-IGRA陽性率與痰涂片陽性率對比[n(%)]

3.討論

結核病(TB)是艾滋病患者最為常見的并發癥，早期病原學陽性率低，不易被診斷，使艾滋病死亡率增高，目前在臨床上使用的諸多方法中，均不能同時有效保障高靈敏度和高特異性[2]。準確診斷MTB感染、及時發現隱匿性TB并及早予以預防性用藥、合理制定高效抗逆轉錄病毒治療(HAART)和抗TB治療方案等是控制結核分枝桿菌感染、降低HIV感染者住院率及病死率的主要途徑。傳統的痰標本細菌學檢查雖然是目前診斷結核病的金標準，但只有開放性結核病才能檢出，菌少時檢出困難，需多次送檢，且診斷時間延長[3]。因此除了傳統經典的檢測方法，TB-IGRA是更快速更敏感的檢測方法，歐陽輝等[4]認為TB-IGRA結果不會受到CD4+T淋巴細胞計數水平影響，可以避免因HIV感染后細胞免疫功能受損而產生的假陰性結果。但越來越多研究[5]表明，TB-IGRA結果與外周血CD4+T淋巴細胞的數量有關，當機體處于嚴重免疫抑制狀態時，TB-IGRA結果容易出現假陰性。本研究中44例診斷為HIV感染合并結核者，CD4≤50cells/ul 9例（20.4%），51cells/ul≤CD4≤200cells/ul 16例（36.4%），CD4≥201cells/ul 19例（43.2%），隨著CD4+淋巴細胞計數的增加，TB-IGRA的陽性率逐漸升高，且組間對比有統計學差異，表明CD4+淋巴細胞計數對TB-IGRA的陽性率有著顯著的影響，對于CD4+T淋巴細胞計數低的患者尤其是小于等于50cells/ul的患者TB-IGRA實驗的靈敏度明顯降低。

國外的一些研究[6]顯示，HIV陽性的結核患者中TB-IGRA陽性率可達90%，但本研究中HIV感染合并結核患者TB-IGRA陽性率為45.5%，相比而言靈敏度大減，可能原因是樣本量較少，且樣本取自住院HIV陽性的結核患者，免疫功能更為低下，檢驗誤差也不能排除。有研究[7]表明：在HIV合并結核病人群中TB-IGRA的敏感性和特異性高于痰涂片、PPD，本研究顯示TBIGRA陽性20例（45.5%），痰涂片陽性17例（38.6%），TBIGRA陽性率與痰涂片陽性率經卡方檢驗，差異沒有統計學意義，沒有提示TB-IGRA的敏感性優于傳統痰涂片，但是痰涂片往往需多次送檢，檢出時間長[8]，尤其對于HIV患者往往會耽誤治療時間造成住院時間延長住院費用升高，TB-IGRA的方便快捷可以為臨床醫師的診斷提供更快的支持。

綜上所述，TB-IGRA為臨床醫生診斷或篩查結核提供了快速便捷的方法，但CD4+T淋巴細胞計數對TB-IGRA結果影響較大，仍需綜合判斷。