血漿Septin9基因甲基化與結直腸癌的研究進展

許冠雄，吳釔江

(重慶醫科大學附屬第二醫院檢驗科，重慶400010)

0 引言

結直腸癌是世界第四大致死癌癥，隨著經濟高速發展，人口老齡化進程加快，國民生活習慣和飲食結構也隨之轉變，近年來我國患有直結腸癌的患者比例逐年上升，發生率占據各腫瘤疾病發生的前5位且我國早期診斷率僅5-10%[1]。早期預防，早期篩查，早期診斷并采取有效措施進行干預治療對于減少CRC的發病率和病死率，提高患者的帶病生存年限具有至關重要的作用。目前，結直腸癌常見的早期篩查方式為CEA檢測、FOB試驗和結直腸鏡檢。然而前兩者CEA與FOB的臨床應用價值有限，而后者結直腸鏡檢雖為金標準、特異度高，但早期篩查敏度不甚理想，且其需腸道準備、檢查禁忌證多、患者依從性差、侵入性操作易造成并發癥等諸多不便而應用有限[2]。上述情況對于結直腸癌早期篩查、診斷造成一定的障礙。而血漿mSeptin9檢測的檢測標本為血漿，可達到無創取樣、方便且檢測快速的目的，且在 CRC 中診斷價值較高，近年來逐漸開始用于結直腸癌的相關早期篩查、診斷之中。

1 SEPTIN9基因甲基化與CRC的發生、發展的相關性

結直腸癌的發生、發展是一個由多種基因參與、受眾多因素影響，并需經歷多階段演變的復雜過程，其確切機制尚不明確，目前較公認的是“腺瘤→癌變”學說[3]，其致病機制主要包括有CpG島甲基化、微衛星不穩定和染色體不穩定3種，其可單獨致病，也可多種途徑交錯綜合作用。Septin9基因在結直腸癌發生中起抑癌基因作用，若中央鳥核苷酸序列結構域發生突變，該基因的抑癌功能就會喪失，從而導致細胞分裂的調控紊亂，并逐漸趨向癌變。研究表明[4, 5]，直結腸癌患者在患病的過程中約90%的患者SEPT9基因中的CpG島發生甲基化。Toth[6]等通過檢測CRC患者在不同階段中體內mRNA及相關蛋白表達水平，發現Septin9 mRNA及相關蛋白表達水平會因為結腸癌細胞逆甲基化而增加，這說明mSeptin9狀態與CRC的發生、發展過程緊密相關，而且這個過程具有可逆性，所以mSeptin9將來也可能發展為CRC干預治療和預后監測的重要指標。綜上，從近年來相關研究中我們可以得出一個結論，CRC的發生、發展與mSeptin9具有高度相關性。

2 血漿mSeptin9檢測在結直腸癌中的臨床價值

mSeptin9的獨立早期篩查價值康倩[7]等研究發現，相比于高敏感，低特異的糞便潛血試驗，CRC患者血漿中mSeptin9檢測的檢測靈敏度為75.0%，特異度為98.1% ，具有較好的臨床應用價值。Grutzmann R[8]等通過雙盲法病例對照研究血漿中的mSeptin9檢測情況，檢測結果顯示實驗組（CRC患者組）的陽性檢出率遠遠高于對照組（健康人群），此差異具有統計學意義。同時為更加充分地闡述Septinn9基因甲基化與結直腸癌的關系，該研究還納入非惡性疾病患者和其他惡性腫瘤患者作為研究對象,對照研究結果顯示CRC組的陽性檢出率明顯高于非惡性疾病患者和其他惡性腫瘤患者，該差異也有統計學意義。其他相關報道[9]也得出類似的結論:與非結直腸癌患者和正常健康人群相比,CRC患者血漿中mSeptin9水平明顯升高。另有研究表明[5]，直結腸癌患者在整個病程中約90%的患者Septin9基因中的CpG島發生甲基化，相比于正常的癌旁或結腸組織有明顯的統計學差異，具有較高的特異性，已成為結直腸癌的早期診斷分子標志之一。

當然，這種方法也存在一定的不足。陳培[9]等研究發現mSeptin9陽性率在各結直腸癌臨床病理分化階段以及腫瘤存在部位的相關性無統計學意義。Warren[10]和Church[11]等針對結直腸腺瘤和息肉進行研究，設置實驗組（結直腸腺瘤和息肉患者）和對照組，實驗結果顯示實驗組與對照組的陽性檢出率間的差異都沒有統計學意義，這說明血漿Septin9基因甲基化檢測在結直腸腺瘤和息肉等癌前病變中的特異性和敏感度極低，對于此類疾病的檢出效果非常不理想。李士杰[12]等也針對23例腺瘤患者進行了mSeptin9檢測，結果也得出了類似的結論：該方法在腺瘤中的陽性檢出率極低。

綜上，我們可以得出結論，雖然血漿中mSeptin9檢測可適用于結直腸癌臨床病理分化程度各階段的患者，但是與其各階段間的相關性不大。且此方法在結直腸癌癌前病變患者中的檢出率極低，亦不能針對此類癌前病變進行早期篩查、早期診斷。

mSeptin9與FOB或CEA聯合檢測的臨床應用價值黎陽[2]等研究顯示，mSeptin9的ROC曲線下面積（AUC）為0.828，FOB的AUC為0.674，而mSeptin9與FOB聯合診斷的AUC為0.851，這說明二者聯合診斷的臨床應用價值高于mSeptin9和FOB單獨檢測。吳東等[13]研究闡明mSeptin9聯合FOB檢測，其診斷大腸進展期腺瘤的靈敏度為67.6%，特異度為47.4%，這說明二者聯合檢測對監測結直腸的癌前病變也有一定的參考價值。鄧子昂[14]等以診斷為結直腸癌且尚未行抗腫瘤治療的患者為受試者進行mSeptin9和CEA單獨檢測與聯合檢測的陽性率比較，發現mSeptin9單獨檢測診斷結直腸癌的陽性率和CEA比較，差異具有統計學意義；同時，當mSeptin9和CEA兩者聯合檢測時，診斷結直腸癌陽性率為78.5%，顯著高于mSeptin9與CEA的單獨檢測的66.4%和41.1%，這證明了mSeptin9與CEA的聯合檢測的臨床應用價值明顯高于二者單獨檢測。故mSeptin9與CEA或FOB的聯合檢測將大大提高結直腸癌的診斷陽性率，臨床應用價值遠高于三者單獨檢測對結直腸癌患者的診斷，且對監測結直腸的癌前病變也有一定的參考價值。

mSeptin9在結直腸癌術后及預后的監測價值黃劍輝[15]等通過對開展了腹腔鏡手術治療后的結直腸癌患者的mSeptin9、CEA的陽性率隨訪監測中，發現2至6個月內mSeptin9對結直腸癌術后轉移與復發的監測準確率為86.73%、靈敏度 73.68%、特異度 95.00%、陽性預測值90.32%、陰性預測值85.07%，其結果遠高于CEA與之對應的監測準確率62.24%、靈敏度 34.21%、特異度 80.00%、陽性預測值 52.00%、陰性預測值 65.75%。這表明血漿mSeptin9具有比血清CEA更高的結直腸癌術后監測價值，作為結直腸癌腹腔鏡手術后隨訪項目具有一定的意義。楊寧等[16]研究表明有97.5%的結直腸癌患者在接受手術治療后1d mSeptin9的水平出現了明顯的下降乃至陰性，且術后7d內mSeptin9水平呈現持續下降趨勢。這也可得出結論：mSeptin9的水平與疾病的進展和預后有著良好好的相關性。由此，血漿mSeptin9檢測作為結直腸癌的早期篩查診斷指標之外，其在結直腸癌的術后及預后中亦可起到一定的監測價值，這對于通常以手術創傷程度、術后恢復速度與生存時間的傳統術后及預后評價方法來說也極具創新意義。

3 討論

經證實，mSeptin9與CRC的發生、發展、預后呈現高度相關性。基于血漿mSeptin9檢測方法具有微創，取樣方便，患者依從性高，檢出效果理想，特異性較高等優點，適合于結直腸癌的臨床診斷，因此它可作為結直腸癌臨床診斷的重要腫瘤標志物之一，更重要的是該指標不受年齡、性別及腫瘤發生部位的影響。當然我們對Septin9基因與結直腸癌發生發展的關系的了解還只是冰山一角，目前尚無針對mSeptin9、FOB、CEA三者聯合檢測的臨床應用價值進行探討的報道；其次，mSeptin9聯合檢測對癌前病變的早期篩查價值雖有所改觀但有待進一步的研究。希望通過今后不斷地深入研究，系統闡明Septin9基因的生物學功能和表達情況及其與結直腸癌的關系，進一步探索其在結直腸癌治療干預和術后監測的臨床應用價值，使其成為早期預測結直腸癌發生的腫瘤標志物和基因治療的理想靶點。

綜上所述，血漿mSeptin9檢測及其相關聯合檢測對于結直腸癌的篩查、診斷、進展、預后評估等方面均有不錯的臨床應用價值，具有臨床推廣意義。