891例中段尿培養(yǎng)陽性標(biāo)本感染病原學(xué)特點(diǎn)及藥敏分析

丁 鋒，趙愛學(xué)

陜西省漢中市洋縣人民醫(yī)院：1.院辦；2.檢驗(yàn)科，陜西漢中 723300

泌尿系統(tǒng)感染(USI)是由病原體直接侵犯泌尿系統(tǒng)(如尿路黏膜或泌尿組織等)引起損傷、尿路發(fā)生炎癥，是臨床較為常見的感染性疾病之一。患者一般會出現(xiàn)排尿困難、尿頻、尿痛、血尿等癥狀，感染嚴(yán)重者會出現(xiàn)慢性腎功能不全。僅依據(jù)患者的臨床癥狀、尿常規(guī)檢測及體征檢查，臨床難以正確判定，致使臨床的尿路感染發(fā)病率逐年上升[1]。近年來，隨著各種抗菌藥物、抗癌藥物、免疫抑制劑藥物大量使用以及侵入性手術(shù)操作增多，USI病原菌耐藥性不斷發(fā)生變化，使用原有的一些抗菌藥物難以達(dá)到應(yīng)有的治療效果，新的耐藥機(jī)制不斷出現(xiàn)和多重耐藥菌株感染逐年增多，從而嚴(yán)重影響臨床診斷和有效治療USI。尿培養(yǎng)能大大增加USI的診斷正確性，為減少并控制尿路感染以及后續(xù)治療提供依據(jù)。研究證實(shí)，不同地區(qū)USI的病原菌類型存在一定差異[2]。為了解本地區(qū)USI患者的病原菌分布特點(diǎn)及耐藥情況，本研究采用回顧性調(diào)查方法，對漢中市洋縣人民醫(yī)院USI患者自行收集或無菌導(dǎo)出的中段尿培養(yǎng)的陽性標(biāo)本病原菌分布及耐藥情況進(jìn)行分析，旨在了解本地區(qū)USI患者病原菌分布特點(diǎn)及耐藥情況，為指導(dǎo)臨床治療USI患者合理選擇抗菌藥物提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1標(biāo)本來源 選取2018年1-12月在漢中市洋縣人民醫(yī)院腎病、內(nèi)分泌、泌尿外科等科室門診、急診及住院部送檢的USI患者自行收集或無菌導(dǎo)出的中段尿標(biāo)本，共2 679例，包括門診237例、急診168例、住院2 274例。患者主要臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、排尿困難、尿急、尿頻、尿痛、血尿等。其中男性標(biāo)本1 618例、女性標(biāo)本1 061例，患者年齡19～55歲、平均(37.6±6.7)歲。排除處于月經(jīng)期患者的標(biāo)本。

1.2試劑與儀器 鑫科全自動培養(yǎng)儀由山東鑫科生物技術(shù)有限公司提供，鑫科分析儀及配套的鑒定卡、藥敏卡由鑫科生物技術(shù)有限公司提供。哥倫比亞血瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板、T．M巧克力瓊脂平板等由鄭州安圖生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)提供。一次性棉拭子和一次性接種環(huán)由江蘇康健醫(yī)療用品公司提供。儀器操作嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行檢測。

1.3質(zhì)控菌株 本實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制所用質(zhì)控菌株如金黃色葡萄球菌(ATCC 29213)、銅綠假單胞菌(ATCC 27853)、大腸埃希菌(ATCC 35218)、克柔念珠菌(ATCC 6258)、近平滑念珠菌(ATCC 22019)等均購自國家衛(wèi)生健康委員會臨床檢驗(yàn)中心。

1.4方法

1.4.1標(biāo)本收集與培養(yǎng) 標(biāo)本收集要求患者沖洗尿道口附近部位并將水漬擦凈，自行收集或經(jīng)無菌導(dǎo)出的清潔中段尿標(biāo)本6 mL于無菌培養(yǎng)杯中，在1 h內(nèi)送至檢驗(yàn)科微生物室。在無菌條件下量取10 μL，用無菌接種環(huán)將標(biāo)本分別接種于哥倫比亞血瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板及血平板(有特殊需求時，接種T．M巧克力瓊脂平板或伊紅美藍(lán)平板)，置于溫度35 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24 h。平板上出現(xiàn)細(xì)菌種類超過兩種(不含兩種)為細(xì)菌污染，培養(yǎng)48 h板上無菌生長為陰性。操作均嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[3]開展。

1.4.2細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn) 當(dāng)中段尿標(biāo)本培養(yǎng)的菌落計(jì)數(shù)革蘭陰性(G-)菌≥105CFU/mL，革蘭陽性(G+)菌和念珠菌≥104CFU/mL時，采用鑫科細(xì)菌鑒定儀及配套病原菌鑒定卡對其分離出的單個菌落進(jìn)行病原菌的鑒定。對同一標(biāo)本連續(xù)2次分離出同一菌株只統(tǒng)計(jì)1次結(jié)果，病原菌藥物敏感試驗(yàn)由鑫科細(xì)菌鑒定儀及配套的藥敏檢測卡在質(zhì)控菌株在控后，采用世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的Kirby-Bauer(K-B)紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)(念珠菌藥敏試驗(yàn)用鑫科念珠菌藥敏試驗(yàn)卡完成)。藥敏試驗(yàn)結(jié)果根據(jù)2018年美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)標(biāo)準(zhǔn)[4]進(jìn)行判定。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用Excel建立數(shù)據(jù)庫，分類資料及其他計(jì)數(shù)資料用頻率或百分率描述，采用WHONET 8.4軟件進(jìn)行處理。

2 結(jié) 果

2.1中段尿標(biāo)本病原菌檢出情況比較 2 679例中段尿標(biāo)本中共檢出891株病原菌，檢出率為33.26%。其中男性送檢1 618例，檢出單一菌株感染482株，2種及以上的混合菌株感染25株,總檢出507株，檢出率31.33%。女性送檢1 061例，檢出單一菌株陽性374株，2種及以上的菌株混合感染10株，總檢出384株，檢出率36.19%。

2.2中段尿培養(yǎng)主要病原菌分布、構(gòu)成比及總檢出率分析 891株病原菌中，G-菌647株(72.62%)，主要以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇異變形桿菌為主；G+菌173株(19.42%)，主要以屎腸球菌和糞腸球菌為主；真菌71株(7.97%)，主要以光滑念珠菌為主。中段尿培養(yǎng)感染病原菌的詳細(xì)分布及構(gòu)成比情況見表1。

表1 中段尿培養(yǎng)的主要病原菌分布、構(gòu)成比及總檢出率

2.3中段尿培養(yǎng)排名靠前的病原菌對常用抗菌藥物的耐藥性分析

2.3.1G-菌排名前4位的病原菌對常用抗菌藥物的耐藥性分析 結(jié)果顯示，排名前4位的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇異變形桿菌和銅綠假單胞菌對各類抗菌藥物均有不同程度的耐藥，見表2。

表2 G-菌排名前4位的病原菌對常用抗菌藥物的耐藥性分析

表3 G+菌排名前3位的病原菌對常用抗菌藥物的耐藥性分析

2.3.2G+菌排名前3位的病原菌對常用抗菌藥物的耐藥性分析 結(jié)果顯示，排名前3位的屎腸球菌、糞腸球菌和表皮葡萄球菌對各類抗菌藥物均有不同程度的耐藥。屎腸球菌對部分抗菌藥物(如紅霉素、氨芐西林等)的耐藥率均在80.0%以上，對喹努普汀/ 達(dá)福普汀的耐藥率小于2.0%。糞腸球菌對部分抗菌藥物(如紅霉素、喹奴普汀/達(dá)福普汀等)的耐藥率均在70.0%以上，對氨芐西林和青霉素G耐藥率均小于15.0%。表皮葡萄球菌對青霉素G、左氧氟沙星等的耐藥率均>50.0%，對氨芐西林、環(huán)丙沙星的耐藥率均<30.0%。排名前3位的G+菌對萬古霉素、替加環(huán)素和利奈唑胺100.0%敏感，未發(fā)現(xiàn)有耐藥菌，其耐藥率為0.0%。藥敏試驗(yàn)結(jié)果見表3。

2.3.3真菌對常用抗菌藥物的耐藥性分析 結(jié)果顯示，光滑念珠菌和近平滑念珠菌對伏立康唑、氟康唑和伊曲康唑的耐藥率均在35.0%以上，對5-氟胞嘧啶耐藥率<5.0%。白色念珠菌對所有抗真菌藥物的耐藥率較低，均<5.0%。這3種真菌對兩性霉素B高度敏感。

3 討 論

USI是醫(yī)院和社區(qū)獲得性感染最常見的疾病之一，常伴有尿頻、尿痛等膀胱刺激癥狀[5]；可引起患者腎周圍膿腫、尿路結(jié)石與梗阻等并發(fā)癥，嚴(yán)重者可出現(xiàn)腎衰竭或敗血癥，甚至死亡，已嚴(yán)重影響患者的生命健康和生活質(zhì)量[6]。及時做好尿液細(xì)菌培養(yǎng)及藥物敏感性試驗(yàn)，對USI的診治具有重要的臨床意義。

尿液培養(yǎng)是明確USI病原菌的主要方法，對USI的診斷具有較高的應(yīng)用價值。本研究顯示，送檢的2 679例標(biāo)本，共檢出891株病原菌，檢出率為33.26%，略高于耿雪等[7]報道的29.93%，這可能與檢測地區(qū)不同有關(guān)。對檢出的病原菌進(jìn)行鑒定，發(fā)現(xiàn)891株病原菌中，G-菌647株(72.62%)，G+菌173株(19.42%)，真菌71株(7.97%)。這與肖嚴(yán)[8]研究一致，表明USI患者病原菌的構(gòu)成復(fù)雜多樣，臨床應(yīng)重視尿液的培養(yǎng)及細(xì)菌鑒別，有助于了解USI的致病因素。

及時、有效了解USI的每種病原微生物對抗菌藥物的敏感性，對臨床合理使用抗菌藥物，避免新型耐藥菌出現(xiàn)具有重要的意義[9]。本研究發(fā)現(xiàn)，G-菌和G+菌排名靠前的病原菌對各類抗菌藥物均有不同程度的耐藥。其中大腸埃希菌對氨芐西林、環(huán)丙沙星等抗菌藥物耐藥率均在50.0%以上，肺炎克雷伯菌對氨芐西林耐藥率為100.0%，對氨芐西林/舒巴坦、環(huán)丙沙星等抗菌藥物耐藥率在25.0%以上。這與文獻(xiàn)[10]報道一致，說明G-菌感染治療時，應(yīng)慎重選用上述抗菌藥物。G-菌排名前4位的病原菌對阿米卡星和亞胺培南耐藥率較低，可作為G-菌感染治療的首選用藥，但阿米卡星和亞胺培南臨床應(yīng)用還需慎重。屎腸球菌對紅霉素、氨芐西林等抗菌藥物耐藥率均在80.0%以上，糞腸球菌對四環(huán)素、紅霉素等抗菌藥物耐藥率均在70.0%以上，表皮葡萄球菌對青霉素G、左氧氟沙星等抗菌藥物耐藥率均在50.0%以上，高于茍建軍等[11]報道。屎腸球菌對喹努普汀/ 達(dá)福普汀耐藥率小于2.0%，糞腸球菌對氨芐西林和青霉素G耐藥率均小于15.0%，表皮葡萄球菌對氨芐西林、環(huán)丙沙星等抗菌藥物耐藥率均小于30.0%。說明這些抗菌藥物可作為USI治療的經(jīng)驗(yàn)用藥。G+菌排名前3位的病原菌對萬古霉素、替加環(huán)素和利奈唑胺高度敏感，未發(fā)現(xiàn)有耐藥菌，其耐藥率為0.0%。這與鄭瑤等[12]報道一致，提示這3種抗菌藥物是治療G+菌感染的首選藥物，但對萬古霉素臨床應(yīng)慎重選用。光滑念珠菌和近平滑念珠菌對伏立康唑、氟康唑和伊曲康唑的耐藥率均在35.0%以上，白色念珠菌對所有抗真菌藥物的耐藥率較低，均小于5.0%，這3種真菌對兩性霉素B 高度敏感。這表明不同念珠菌對抗真菌藥物耐藥性有差異，警示臨床醫(yī)師在USI抗感染治療過程中要明確病原菌的耐藥性，應(yīng)合理使用抗真菌藥物。同時注意提高患者免疫力避免真菌感染。因此，臨床醫(yī)師應(yīng)根據(jù)致病菌分離鑒定及藥敏結(jié)果來合理選擇抗菌藥物，避免經(jīng)驗(yàn)性用藥。

綜上所述，漢中洋縣USI陽性標(biāo)本中病原菌構(gòu)成復(fù)雜、種類較多，G-菌是USI的主要病原菌。不同病原菌呈現(xiàn)高水平耐藥，對USI患者應(yīng)積極開展尿液培養(yǎng)、病原菌鑒定及藥物敏感試驗(yàn)，便于臨床醫(yī)師根據(jù)病原菌藥敏結(jié)果為USI患者治療合理選用抗菌藥物提供依據(jù)，可有效避免新型耐藥菌出現(xiàn)。