新型冠狀病毒肺炎患者出院標(biāo)準(zhǔn)探討并文獻復(fù)習(xí)*

周中麗，王永紅，周樂明，毛 迪，徐 婭，劉園杰，黃長武

重慶市黔江中心醫(yī)院：1.呼吸內(nèi)科；2.檢驗科，重慶 409099；3.重慶市衛(wèi)生健康統(tǒng)計信息中心，重慶 401147；4.重慶市黔江中心醫(yī)院放射科，重慶 409099；5.重慶市第五人民醫(yī)院檢驗科，重慶 400062

新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)因其傳染力和致病力較強，給人民健康造成了巨大威脅[1]。到目前為止，國家衛(wèi)生健康委員會已制定了《新型冠狀病毒感染肺炎診療方案(試行第七版)》，按照診療方案要求，達到解除隔離和出院標(biāo)準(zhǔn)條件的確診病例即可出院[2-3]。但文獻[4-6]報道了COVID-19患者出院后復(fù)查核酸陽性的病例，因此，有必要結(jié)合COVID-19診療方案制訂更嚴(yán)苛的出院標(biāo)準(zhǔn)。重慶市黔江中心醫(yī)院(以下簡稱“本院”)于2020年1月26日至3月6日共收治5例COVID-19患者，經(jīng)專家全力救治，患者恢復(fù)良好。患者均按照本文制訂的標(biāo)準(zhǔn)，即體溫<37 ℃，呼吸道癥狀消失，胸部CT顯示病灶明顯吸收好轉(zhuǎn)，白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞計數(shù)正常，炎性指標(biāo)[C反應(yīng)蛋白(CRP)、降鈣素原(PCT)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)]正常，CD4+T淋巴細(xì)胞>500/μL，新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)IgG抗體陽性且滴度為急性期4倍以上，連續(xù)2次(間隔1 d)鼻咽拭子SARS-CoV-2核酸檢查陰性，連續(xù)2次糞便SARS-CoV-2核酸檢查陰性，肛拭子SARS-CoV-2核酸檢查陰性1次出院并隨訪2周，復(fù)查各項指標(biāo)均正常，故推斷該出院標(biāo)準(zhǔn)在本地區(qū)可行。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年1月26日至3月6日本院收治的5例COVID-19患者為研究對象，確診和出院標(biāo)準(zhǔn)均符合《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第五版)》[3](以下簡稱“第五版診療方案”)及本研究提出的出院標(biāo)準(zhǔn)。5例患者中男2例、女3例，年齡22～48歲。

1.2儀器與試劑 SLAN-96S熒光定量PCR儀(上海宏石醫(yī)療科技有限公司)；EX2400核酸自動提取儀(上海之江生物科技有限公司)；Axceed260化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)(博奧賽斯生物科技有限公司)；Alere pima淋巴細(xì)胞計數(shù)儀(雅培公司)；全自動血細(xì)胞分析儀XN-1000(Sysmex公司)；全自動生化分析儀LABOSPECT008(日本日立)；SARS-CoV-2核酸檢測試劑盒(中山大學(xué)達安基因股份有限公司)；SARS-CoV-2 IgM/IgG抗體檢測試劑盒(博奧賽斯生物科技有限公司)。

1.3方法 (1)采用實時熒光反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測SARS-CoV-2 RNA，主要檢測開放讀碼框1ab(ORF1ab)和核衣殼蛋白(N)基因兩個位點。當(dāng)兩個位點循環(huán)閾值(Ct值)>40，可判斷為SARS-CoV-2陰性；兩個位點Ct值<40，且有明顯的擴增曲線，可判斷為SARS-CoV-2陽性；僅單一位點Ct值≤40，結(jié)果需要復(fù)檢，復(fù)檢一致可判斷為SARS-CoV-2陽性。檢測標(biāo)本類型及陰陽性質(zhì)控要求參照《新型冠狀病毒肺炎實驗室檢測技術(shù)指南》進行操作。(2)采用化學(xué)發(fā)光法檢測SARS-CoV-2 IgM和IgG抗體，使用試劑盒配套校準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。血清標(biāo)本按照試劑說明書處理后上機檢測，標(biāo)本S/CO<1判斷為陰性，S/CO≥1判斷為陽性。所有檢測項目質(zhì)控均在控。

2 結(jié) 果

2.1病例基本信息及臨床特征 本研究納入的5例病例從首發(fā)癥狀出現(xiàn)到確診時間為3～8 d，5例患者均有武漢居住史或湖北接觸史。4例為普通型病例，1例為重型病例，主要癥狀為咳嗽、發(fā)熱、乏力等。實驗室檢查結(jié)果顯示，5例患者均有白細(xì)胞計數(shù)正常或降低且紅細(xì)胞沉降率升高，部分患者出現(xiàn)肝酶、CRP、IL-6、D-二聚體增高及淋巴細(xì)胞計數(shù)降低。所有病例影像學(xué)檢查均有典型COVID-19特征。5例患者均未合并重要基礎(chǔ)疾病，主要的治療方案為霧化吸入重組人干擾素a1b注射液、口服洛匹那韋/利托那韋或阿比多爾抗病毒治療，注射胸腺五肽增強免疫功能，口服蘇黃止咳膠囊進行止咳、吸氧等對癥支持治療，5例患者均使用抗菌藥物治療，2例使用糖皮質(zhì)激素治療。5例患者發(fā)病到核酸轉(zhuǎn)陰時間為11～33 d，住院時間為11～32 d。見表1和圖1。

注：A為病例1入院胸部CT；B為病例2入院胸部CT;C為病例1出院胸部CT；D為病例2出院胸部CT。

2.2實驗室檢查結(jié)果 各實驗室指標(biāo)變化趨勢符合COVID-19疾病特點，白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞計數(shù)正常或降低，部分患者有CRP和IL-6增高，IgM抗體較IgG抗體早產(chǎn)生，水平呈先增高后降低趨勢，而IgG抗體呈上升趨勢。5例患者出院時各檢查指標(biāo)見表2。

表2 應(yīng)用本文標(biāo)準(zhǔn)出院的5例COVID-19患者出院時指標(biāo)

2.3文獻復(fù)習(xí) 依據(jù)本文出院標(biāo)準(zhǔn)，本院共有5例COVID-19確診患者出院，經(jīng)2周隨訪觀察均未出現(xiàn)核酸復(fù)陽情況。同時，本研究對目前已報道COVID-19患者出院后核酸復(fù)陽的文獻[4-6]進行復(fù)習(xí)，并對本文出院患者和未應(yīng)用該標(biāo)準(zhǔn)出院后核酸復(fù)陽患者臨床特征及轉(zhuǎn)歸進行比較，各指標(biāo)未發(fā)現(xiàn)顯著差異，見表3。

表3 本文出院患者與其他研究中出院后核酸復(fù)陽患者臨床特征及轉(zhuǎn)歸比較

3 討 論

隨著對COVID-19認(rèn)識的深入和診療經(jīng)驗的積累，COVID-19患者的臨床特點也逐漸清晰。本院收治的5例COVID-19患者潛伏期均小于3 d，以干咳、發(fā)熱、乏力為主要癥狀，符合初期相關(guān)文獻分析的特點[7]。實驗室檢查白細(xì)胞計數(shù)正常或降低、淋巴細(xì)胞計數(shù)降低，紅細(xì)胞沉降率升高，PCT正常，部分患者CRP稍高和肝酶異常；影像學(xué)可見斑片影或磨玻璃影，上述特點與第五版診療方案[3]一致。但病例也有其自身特點：(1)共3例COVID-19患者自感染 SARS-CoV-2起均無發(fā)熱表現(xiàn)；(2)有3例COVID-19患者臨床分型為普通型，但IL-6有輕度增高；(3)3例女性患者發(fā)病初期淋巴細(xì)胞計數(shù)正常，但CD4+T淋巴細(xì)胞計數(shù)低于正常值，與文獻[8-9]報道病例特點有差異，推測原因可能與病例為青年女性，自身免疫力較強等因素有關(guān)，有待進一步研究。

按照第五版診療方案標(biāo)準(zhǔn)，確診病例需滿足以下條件方可解除隔離出院：(1)體溫恢復(fù)正常3 d以上；(2)呼吸道癥狀明顯好轉(zhuǎn)；(3)肺部影像學(xué)顯示急性滲出性病變明顯改善；(4)連續(xù)兩次呼吸道標(biāo)本核酸檢測陰性(采樣時間至少間隔24 h)。但文獻[4-6]報道按照該標(biāo)準(zhǔn)出院后，有病例復(fù)查核酸陽性。原因為COVID-19的致病機制可能與嚴(yán)重急性呼吸綜合征(SARS)和中東呼吸綜合征(MERS)冠狀病毒引起的肺炎類似，存在細(xì)胞免疫受損過程[10]和細(xì)胞炎性因子風(fēng)暴[11]，也有文獻和指南報道了淋巴細(xì)胞和SARS-CoV-2 IgG抗體在COVID-19疾病恢復(fù)期的價值[12]。因此，本院以患者體溫<37 ℃，呼吸道癥狀消失，胸部CT顯示病灶明顯吸收好轉(zhuǎn)，白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞計數(shù)正常，炎性指標(biāo)(CRP、PCT、IL-6)正常，CD4+T淋巴細(xì)胞>500/μL，IgG抗體陽性且滴度為急性期4倍以上，連續(xù)2次(間隔1 d)鼻咽拭子SARS-CoV-2核酸檢查陰性，連續(xù)2次糞便SARS-CoV-2核酸檢查陰性，肛拭子SARS-CoV-2核酸檢查陰性1次為出院標(biāo)準(zhǔn)；在隨后2周復(fù)查中，CD4+T淋巴細(xì)胞恢復(fù)正常，SARS-CoV-2 IgM抗體滴度降低，IgG抗體滴度增加，SARS-CoV-2核酸檢測陰性，故推斷基于第五版診療方案更嚴(yán)苛的出院標(biāo)準(zhǔn)在本地區(qū)可行。YUAN等[4]報道了深圳市第三人民醫(yī)院收治的172例COVID-19患者中，25例在出院后出現(xiàn)了SARS-CoV-2核酸檢測陽性，復(fù)陽率14.5%；復(fù)陽后第2次入院胸部CT顯示無病灶加重，平均2.73 d后鼻咽拭子和肛拭子核酸均轉(zhuǎn)陰。同時，ZHANG等[5]及LAN等[6]也對SARS-CoV-2核酸復(fù)陽病例進行了個案報道，病例的臨床特點及核酸復(fù)陽時間與文獻[4]類似。綜合以上研究結(jié)果推斷COVID-19患者在臨床癥狀改善和病毒完全被清除之間有一段核酸檢測陰性或陽性的反復(fù)期，而與性別、年齡、住院天數(shù)等臨床特征無明顯相關(guān)性，間隔24 h的兩次核酸檢測結(jié)果陰性并不能證明病毒被完全清除，LI等[13]及XIAO等[14]也證實了這一點，因此本研究提出的在多次核酸檢測結(jié)果陰性的基礎(chǔ)上增加白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)的檢測，同時結(jié)合炎性因子及IgG抗體滴度作為出院標(biāo)準(zhǔn)可降低確診病例出院后核酸復(fù)檢陽性的風(fēng)險。

目前，盡管沒有證據(jù)表明出院后核酸復(fù)陽患者具有傳染性，也并未發(fā)現(xiàn)該類患者有重新出現(xiàn)發(fā)熱、呼吸道癥狀和肺部炎癥加重等病毒復(fù)燃的表現(xiàn)，但出院復(fù)陽患者確實攜帶有高病毒載量(可能為病毒片段)，具有潛在危險性和風(fēng)險。同時，本研究的病例報道樣本量較小，僅為單中心觀察，可作為COVID-19患者出院標(biāo)準(zhǔn)的參考，但還需進行進一步的研究和驗證。