102例新生兒交叉配血不合原因分析及輸血策略*

周 蓉，屈柯暄，呂孟興

云南省昆明市兒童醫院輸血科，云南昆明 650228

輸血是臨床搶救新生兒生命不可替代的治療方法，輸血前交叉配血試驗相合是保證臨床輸血安全、有效的重要環節，但新生兒交叉配血不合是常遇到的問題。進行新生兒輸血前血清學檢測，根據試驗結果選擇合適的血液進行交叉配血，可降低交叉配血不合發生率。美國血庫協會(AABB)標準中對4個月以下的嬰幼兒進行限定的輸血前血清學檢測，要求首次檢測必須對患兒紅細胞進行ABO血型和RhD血型測定，以及篩查患兒或母親血漿(血清)中的不規則紅細胞抗體，如存在抗體，必須輸注ABO血型相容的紅細胞，直到檢測不到該獲得性抗體為止[1]。本文對本院新生兒交叉配血不合的原因及輸血策略進行回顧性分析，收集接受輸血治療的新生兒血液標本，運用微柱凝膠卡式法進行交叉配血試驗、不規則抗體篩選及抗體鑒定試驗，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年1月至2019年8月本院申請輸血的新生兒1 903例為研究對象，年齡0～28 d。收集患兒交叉配血試驗結果，以及電子病歷記錄，包括病程、疾病、治療等情況。供血者血液標本均為不規則抗體篩選陰性，直接抗人球蛋白試驗(DAT)陰性。

1.2儀器與試劑 2420離心機(日本久保田)、LC-10C低速離心機(安徽中科中佳有限公司)、TD-A型醫用離心機(長春博研有限公司)、FYQ型免疫微柱孵育器(長春博研有限公司)、HH.W21.600S型電熱恒溫水溫箱(上海躍進有限公司)、CX21型生物顯微鏡(奧林巴斯公司)。標準血清抗-D、抗-M、抗-E、抗-C、抗-e、抗-c、抗人球蛋白試劑及譜細胞均為上海血液生物醫藥有限公司產品；篩選細胞、微柱凝膠卡均為長春博訊生物技術有限公司提供；凝聚胺試劑為珠海貝索生物技術有限公司提供。

1.3方法 運用微柱凝膠卡式法為主進行交叉配血試驗、不規則抗體篩選及抗體鑒定試驗，需要時采用鹽水法、凝聚胺法、抗人球蛋白法進行復查。檢測方法均按參考文獻[2]進行標準試驗操作。

1.4統計學處理 采用SPSS22.0統計學軟件對所有數據進行分析。計數資料采用百分數表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1新生兒配血不合發生率和原因分類 1 903例新生兒交叉配血試驗中，交叉配血不合102例，新生兒交叉配血不合發生率5.36%；102例交叉配血不合新生兒中男60例(3.15%)，女42例(2.21%)，男性交叉配血不合發生率高于女性(P<0.05)；102例交叉配血不合新生兒中，紅細胞抗體導致交叉配血不合40例(39.2%)，DAT陽性導致交叉配血不合62例(60.8%)。

2.2紅細胞抗體導致交叉配血不合 紅細胞抗體導致交叉配血不合的40例患兒其抗體鑒定結果顯示，Rh血型系統抗體占52.5%(21/40)，抗-D占15.0%(6/40)、抗-Ec占15.0%(6/40)、抗-E占12.5%(5/40)、抗-c占2.5%(1/40)、抗-(D+E)占2.5%(1/40)、抗-(D+C)占2.5%(1/40)、抗-RH17占2.5%(1/40)；ABO血型系統抗體占32.5%(13/40)，13例新生兒母親血型均為O型Rh陽性，其中6例新生兒血型為A型Rh陽性，血液中檢出IgG抗-A；7例新生兒血型為B型Rh陽性，血液中檢出IgG抗-B；MNS血型系統占7.5%(3/40)；抗體無特異性占7.5%(3/40)。紅細胞抗體導致新生兒交叉配血不合中Rh血型系統抗體占52.5%，ABO血型系統抗體占32.5%，均高于其他血型系統，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 紅細胞抗體鑒定結果(n=1 903)

2.3疾病與交叉配血不合的關系 分析102例交叉配血不合新生兒所患疾病，結果顯示，紅細胞抗體導致交叉配血不合的患兒中高膽紅素血癥占29.4%(30/102)，黃疸占7.8%(8/102)，高于新生兒溶血性貧血[1.0%(1/102)]和消化道穿孔[1.0%(1/102)]，差異有統計學意義(P<0.05)；DAT陽性導致交叉配血不合的患兒中，新生兒肺炎占28.4%(29/102)，高于壞死性腸炎[7.8%(8/102)]、重癥感染[6.9%(7/102)]、新生兒貧血[6.9%(7/102)]、消化道穿孔[3.9%(4/102)]、消化道畸形[2.9%(3/102)]、化膿性腦膜炎[2.0%(2/102)]和腹部包塊[2.0%(2/102)]，差異有統計學意義(P<0.05)。

3 討 論

交叉配血試驗的目的是檢測受血者、獻血者血液之間是否存在不配合的抗原、抗體成分，防止溶血性輸血反應的發生[3]。新生兒交叉配血比較特殊，新生兒期新生兒溶血病(HDN)發病率較高，受母體IgG類抗體的影響，存在免疫性抗體，常常導致交叉配血不合。本研究對納入的1 903例新生兒進行交叉配血結果分析，交叉配血不合102例，交叉配血不合發生率為5.36%。而近年來有關新生兒交叉配血不合的報道較少，且多為HDN檢出情況的分析，郭瑩瑩等[4]報道母嬰血型不合的HDN檢出率為62.0%，黃津明等[5]報道母嬰血型不合的HDN檢出率為63.4%，楊璇等[6]報道母嬰血型不合的HDN檢出率為49.9%，參考以上文獻并對本研究病例分析，考慮由于本院新生兒科醫生對HDN重視度較高，當母嬰血型不合及新生兒出現不明原因黃疸的情況均送檢新生兒血液標本進行鑒別診斷。這些新生兒在交叉配血時已選用對應抗原陰性血液配血，因此配血不合發生率較低。因此，在新生兒輸血前進行血清學檢測非常必要，可降低交叉配血不合發生率，同時避免因交叉配血不合而延誤新生兒的搶救與治療。

102例交叉配血不合新生兒中，男性交叉配血不合發生率高于女性(P<0.05)。這與有關成人交叉配血不合的報道不同，成人交叉配血不合主要由免疫刺激產生，如輸血或妊娠，多以女性為主[7]。本研究結果還需要擴大樣本量調查，進一步深入研究是否與成人存在不同。HDN是指母嬰血型不合時，因胎兒體內存在父親遺傳的血型抗原而母親體內無此抗原，胎兒紅細胞抗原通過臍帶進入母體后刺激產生相應的抗體，這些抗體再通過胎盤進入胎兒體內，導致胎兒紅細胞抗原與抗體發生免疫性溶血。HDN是引起新生兒黃疸或新生兒高膽紅素血癥的重要原因之一[8]，尤其以Rh新生兒溶血病(Rh HDN)和ABO新生兒溶血病(ABO HDN)常見，這與徐超凡等[9]、韓雪芹等[10]、葉海輝等[11]的研究結果一致。成人通常以不規則抗體篩選試驗檢測血清或血漿中存在的免疫抗體，新生兒與成人不同，新生兒受母體IgG抗-A和抗-B影響，由于不規則抗體篩選試驗是檢測ABO以外的不規則抗體，不能檢出血液中IgG抗-A和IgG抗-B紅細胞抗體，則在新生兒不規則抗體篩選試驗陰性，但新生兒交叉配血不合時ABO HDN應為考慮的重要因素之一，需要進一步做患兒紅細胞抗體放散試驗來確診HDN。

本研究中有3例不規則抗體陽性患兒，與譜細胞有廣譜反應，無法鑒定抗體特異性。結合病例總結原因可能為：(1)存在多種特異性抗體；(2)存在自身抗體合并同種抗體；(3)譜細胞抗原多樣性較少，從而檢測不出稀有抗體。抗體鑒定困難時進一步對患兒血液進行吸收放散試驗，需選用抗原種類較多的多組譜細胞鑒定抗體特異性。新生兒在出生3個月內，自身幾乎無血型抗體，攜帶的抗體來自母體，母親抗體篩查結果可輔助分析新生兒抗體。因此檢測新生兒母親血液和新生兒紅細胞放散液的抗體特異性尤為重要。

紅細胞抗體導致配血不合的對策：鑒定其紅細胞抗體特異性，除ABO HDN選擇O型洗滌紅細胞交叉配血配合進行輸注，其余選擇檢出紅細胞抗體對應紅細胞抗原陰性的血液交叉配血配合進行輸注；抗體鑒定無特異性應選擇與新生兒母親Rh(D/C/c/E/e)分型、MNS等高頻抗原同型的血液交叉配血配合進行輸注，本研究納入的病例按照以上原則進行交叉配血配合輸注，均達到預期效果，無輸血不良反應的發生。

102例新生兒交叉配血不合中，62例交叉配血不合均為紅細胞DAT陽性。DAT的目的是檢測紅細胞表面是否存在不完全抗體。不完全抗體致敏紅細胞，在鹽水介質中致敏紅細胞不發生凝集，加入抗人球蛋白試劑后則出現凝集，即為DAT陽性，表示紅細胞上有相應抗體存在。導致DAT陽性原因如下：(1)紅細胞固有抗原自身抗體；(2)HDN；(3)藥物誘導的抗體；(4)細菌感染、自身抗體或同種抗體引起的補體激活；(5)溶血性輸血反應。常云等[12]、陳麗娟等[13]報道成人DAT陽性結果多見于血液病、腫瘤等疾病和藥物影響。本研究顯示，DAT陽性的新生兒中，臨床診斷疾病主要為新生兒肺炎，與成人不同。新生兒肺炎是新生兒期常見疾病，有研究報道，新生兒肺炎支原體感染檢出率為10%，嬰兒及兒童肺炎支原體感染檢出率為大于20%[14-15]。本研究中新生兒肺炎主要為細菌或肺炎支原體感染，肺炎支原體可產生高效價冷凝聚素，致敏自身紅細胞，可致DAT陽性；對于重癥感染患兒，不同程度長期應用抗菌藥物，可發生藥物抗體致敏紅細胞，也可導致DAT陽性；新生兒DAT陽性與新生兒肺炎的相關性還需進一步研究明確。

DAT陽性導致交叉配血不合對策：懷疑可能存在同種抗體的情況，需進行新生兒紅細胞放散試驗或抗體鑒定來明確同種抗體是否存在；ABO HDN選擇O型洗滌紅細胞交叉配血配合進行輸注；其余選擇檢出紅細胞抗體對應紅細胞抗原陰性的血液交叉配血配合進行輸注；重癥感染或疾病引起DAT陽性，選擇同型洗滌紅細胞交叉配血配合進行輸注；鑒定為藥物抗體導致DAT陽性，停用該藥物并更換其他藥物進行治療，選擇同型洗滌紅細胞交叉配血配合進行輸注。

總之，新生兒交叉配血不合因素很多，根據交叉配血不合的原因、患兒病史、疾病治療等情況，結合輸血前血清學檢測結果，制訂最宜的個體化輸血方案，確保新生兒輸血安全。