擴(kuò)散峰度成像評(píng)估兔惡性骨腫瘤髓內(nèi)浸潤(rùn)范圍及與病理指標(biāo)的相關(guān)性研究

房亞軍，周銳志，陳海松，徐文堅(jiān)

原發(fā)性惡性骨腫瘤的發(fā)病率雖然不高，但其進(jìn)展迅速，侵襲性強(qiáng)，復(fù)發(fā)率高，給患者生命健康及生活質(zhì)量帶來(lái)極大危害[1-2]。多數(shù)原發(fā)惡性骨腫瘤好發(fā)于兒童和青少年，約2/3為骨肉瘤，其余大部分屬于尤因肉瘤家族[3-4]。過(guò)去單純截肢術(shù)是肢體惡性骨腫瘤的唯一治療手段，隨著醫(yī)學(xué)檢查技術(shù)特別是MR新技術(shù)的發(fā)展，惡性骨腫瘤浸潤(rùn)范圍判斷的準(zhǔn)確性得以提高。近年來(lái)骨骼和關(guān)節(jié)置換等保肢術(shù)輔以放、化療逐漸代替了單純截肢術(shù)，越來(lái)越多地被應(yīng)用于臨床。

惡性骨腫瘤在其生長(zhǎng)過(guò)程中，腫瘤細(xì)胞蔓延、浸潤(rùn)生長(zhǎng)，腫瘤遠(yuǎn)端邊界不清。在腫瘤與正常組織之間存在著過(guò)渡的移行區(qū)，移行區(qū)為含有少量腫瘤細(xì)胞的微觀浸潤(rùn)區(qū)及無(wú)腫瘤細(xì)胞的單純水腫區(qū)。正確區(qū)分腫瘤邊界的微觀浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)可避免截骨過(guò)度或截骨不足，最大程度保留正常骨組織，對(duì)外科保肢手術(shù)方案的制定及患者預(yù)后起著至關(guān)重要的作用。

目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于MRI擴(kuò)散峰度成像(diffusion kurtosis imaging，DKI)對(duì)骨腫瘤髓內(nèi)浸潤(rùn)范圍的報(bào)道相對(duì)少見(jiàn)，與組織病理學(xué)相對(duì)照的研究更少。本文采用兔VX2惡性骨腫瘤模型行MR擴(kuò)散加權(quán)DKI序列成像，分析骨腫瘤不同區(qū)域DKI各參數(shù)間的差異，以及各參數(shù)與組織病理學(xué)指標(biāo)之間的相關(guān)性，旨在探討其對(duì)顯示骨腫瘤髓內(nèi)浸潤(rùn)范圍的價(jià)值。

材料與方法

1.VX2模型兔的制備

選擇從青島食品和藥物管理局購(gòu)買(mǎi)的純種雄性新西蘭大白兔30只，月齡2個(gè)月左右，體重2～3 kg。于已麻醉的兔右側(cè)脛骨近端較平坦處依次縱行切開(kāi)皮膚、皮下筋膜、肌肉組織，注意避開(kāi)血管，切口10～15 mm，最后剝離骨膜，暴露脛骨近端骨皮質(zhì)。于脛骨平臺(tái)下約20 mm鉆孔，直徑1～2 mm。采用24G醫(yī)用頭皮留置針將3～4塊1 mm×1 mm腫瘤組織塊送入髓腔，深度約1 cm。骨蠟封口、分層縫合，碘伏消毒，無(wú)菌紗布覆蓋，包扎。術(shù)后3天連用青霉素40萬(wàn)IU/KG肌注，預(yù)防感染[5-8]。該實(shí)驗(yàn)經(jīng)青島大學(xué)附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

2.MRI檢查方法

模型兔腫瘤生長(zhǎng)14～21 d后行常規(guī)MRI及DKI掃描，掃描前麻醉模型兔以防產(chǎn)生運(yùn)動(dòng)偽影。MRI檢查采用3.0T磁共振成像系統(tǒng)(Siemens MAGNETOM Prisma 3.0 T，Erlangen，Germany)，8通道兔線圈(上海辰光醫(yī)療科技股份有限公司)。模型兔取仰臥位，足先進(jìn)，對(duì)兔右側(cè)股骨下段至踝關(guān)節(jié)水平分別行冠狀面、橫軸面快速自旋回波(TSE)T1WI，選取脛骨最大切面行矢狀面TSE-T1WI、TSE-T2WI、短時(shí)反轉(zhuǎn)恢復(fù)抑脂序列(short tau inversion recovery，STIR)，然后采集MR擴(kuò)散加權(quán)DKI序列圖像，采用自由呼吸單次激發(fā)平面回波序列，在三個(gè)正交方向上施加擴(kuò)散梯度，b值分別為0、1000、1500、2000 s/mm2。各序列的掃描參數(shù)見(jiàn)表1。

表1 MRI常規(guī)序列及DKI序列的掃描參數(shù)

3.MRI圖像后處理

VX2骨腫瘤DKI原始DICOM圖像經(jīng)syngo.via傳輸至工作站，于西門(mén)子后處理軟件MR Body Diffusion Toolbox v1 3.0 測(cè)量DKI各定量指標(biāo)。選取包含腫瘤的最大矢狀層面，以病理為金標(biāo)準(zhǔn)行嚴(yán)格點(diǎn)對(duì)點(diǎn)對(duì)照，并結(jié)合MRI STIR序列在腫瘤實(shí)性區(qū)、微觀浸潤(rùn)區(qū)、單純水腫區(qū)勾畫(huà)大小約1 mm的感興趣區(qū)(ROI)，注意避開(kāi)腫瘤中央出血、壞死區(qū)。每個(gè)感興趣區(qū)均放置3次，取其平均值獲得各區(qū)域的平均擴(kuò)散系數(shù)(average diffusion coefficient，MD)及平均峰度(average kurtosis，MK)。

4.病理檢查

經(jīng)兔耳緣靜脈注入空氣處死模型兔，于股骨中下段至踝關(guān)節(jié)水平離斷患肢，沖洗干凈，用骨鋸機(jī)(KUGELTSG-CG，德國(guó))沿脛骨長(zhǎng)軸、對(duì)應(yīng)MRI最大矢狀面以層厚3 mm切片，固定24 h后于EDTA脫鈣液中進(jìn)行脫鈣約一個(gè)月，經(jīng)脫水、石蠟包埋行HE染色及免疫組化檢查(CD31、VEGF)。

腫瘤大體標(biāo)本對(duì)應(yīng)兔脛骨MRI圖像最大矢狀層面，按照Karim法[9]間距5 mm網(wǎng)格狀分割，坐標(biāo)軸的水平軸平行于脛骨平臺(tái)水平切線，編碼1～9；縱軸平行于脛骨骨干長(zhǎng)軸，編碼A～X。根據(jù)大體標(biāo)本與影像大小的比例關(guān)系確定影像圖像的橫縱坐標(biāo)間隔(等比例)，實(shí)現(xiàn)MRI和病理圖像的點(diǎn)對(duì)點(diǎn)對(duì)照研究(圖1)。

圖1 腫瘤大體標(biāo)本及MRI圖像Karim法分區(qū)。

HE染色病理圖像于CaseViewer軟件中找到腫瘤實(shí)性區(qū)、微觀浸潤(rùn)區(qū)及單純水腫區(qū)。400倍光鏡下在實(shí)性區(qū)及微觀浸潤(rùn)區(qū)隨機(jī)選取3個(gè)視野，分別得到每個(gè)視野內(nèi)腫瘤細(xì)胞核總面積與視野面積之比，取其平均值為腫瘤細(xì)胞密度(tumor cell density，CD)。微血管密度(microvessel density，MVD)計(jì)數(shù)參照Weidner法。CD31抗體免疫染色玻片于100倍光鏡下找到微血管分布區(qū)，然后在200倍鏡下隨機(jī)選擇3個(gè)不同的視野計(jì)數(shù)血管，取其平均值為MVD計(jì)數(shù)結(jié)果。

400倍光鏡下統(tǒng)計(jì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)陽(yáng)性細(xì)胞的百分率，其得分為染色強(qiáng)度與陽(yáng)性細(xì)胞百分比的乘積。選取3個(gè)視野取其平均值為VEGF的表達(dá)程度。染色強(qiáng)度分級(jí)：無(wú)染色為0，染色程度弱為1，中等為2，染色程度較強(qiáng)為3。陽(yáng)性細(xì)胞百分比：無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞為0，0～25%為1，26%～50%為2，51%～75%為3，76%～100%為4。

5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

表2 VX2骨腫瘤實(shí)質(zhì)區(qū)、微觀浸潤(rùn)區(qū)和單純水腫區(qū)的DKI各參數(shù)值比較

結(jié) 果

1.模型兔制備結(jié)果

成功制備模型兔25只，其中病理切片發(fā)現(xiàn)骨腫瘤邊界不清、存在微觀浸潤(rùn)區(qū)者21只，將此21只納入研究。

2.DKI圖像參數(shù)分析結(jié)果

腫瘤STIR抑脂圖像及DKI原始圖像見(jiàn)圖2。MD值在VX2惡性骨腫瘤實(shí)性區(qū)、微觀浸潤(rùn)區(qū)及單純水腫區(qū)中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=44.747，P<0.05)；采用最小顯著差異性t檢驗(yàn)行多重比較，結(jié)果顯示腫瘤實(shí)性區(qū)與微觀浸潤(rùn)區(qū)(P=0.000)、微觀浸潤(rùn)區(qū)與水腫區(qū)(P=0.000)、實(shí)性區(qū)與水腫區(qū)(P=0.000)的MD值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，實(shí)性區(qū)MD值低于微觀浸潤(rùn)區(qū)及水腫區(qū)，微觀浸潤(rùn)區(qū)的MD值低于單純水腫區(qū)。MK值在VX2惡性骨腫瘤實(shí)性區(qū)、微觀浸潤(rùn)區(qū)及單純水腫區(qū)中差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.926，P=0.402，表2)。

圖2 a)STIR抑脂圖像，腫瘤呈外周高、中央稍低信號(hào)影；b)b值為0的DKI圖像，腫瘤呈高信號(hào)；c)b值為1000s/mm2的DKI圖像；d)b值為1500s/mm2的DKI圖像；e)b值為2000s/mm2的DKI圖像。

MD值診斷惡性骨腫瘤實(shí)性區(qū)與微觀浸潤(rùn)區(qū)、微觀浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)的ROC曲線下面積分別為0.891、0.831(圖3)，MD值取1028.5 mm2/s可作為鑒別惡性骨腫瘤微觀浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)的的閾值，敏感度和特異度分別為95.24%和66.67%，MD值>1028.5 mm2/s時(shí)可考慮為腫瘤的單純水腫區(qū)。

3.病理結(jié)果

HE染色示VX2骨腫瘤實(shí)性區(qū)腫瘤細(xì)胞核大、深染，大小不一，排列緊密，核分裂象多，核漿比高，部分呈巢狀排列；腫瘤移行區(qū)包括微觀浸潤(rùn)區(qū)和單純水腫區(qū)，其中微觀浸潤(rùn)區(qū)內(nèi)可見(jiàn)少量腫瘤細(xì)胞呈散在片狀分布，而單純水腫區(qū)無(wú)腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)。CD31染色后血管內(nèi)皮細(xì)胞呈棕褐色著色，與周?chē)M織分界欠清，腫瘤微觀浸潤(rùn)區(qū)亦見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞染色；VEGF染色后血管內(nèi)皮細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞胞漿染色為棕褐色或棕黃色，邊界清(圖4)。VX2骨腫瘤的水腫區(qū)為炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，無(wú)腫瘤細(xì)胞，其免疫組化指標(biāo)為零。CD、MVD、VEGF在腫瘤實(shí)性區(qū)與微觀浸潤(rùn)區(qū)中差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.05)，且3個(gè)病理指標(biāo)鑒別腫瘤實(shí)性區(qū)與微觀浸潤(rùn)區(qū)的AUC值均較高，分別為1.000、0.998、0.870(表3)。

表3 腫瘤實(shí)質(zhì)區(qū)與微觀浸潤(rùn)區(qū)的CD、MVD、VEGF值比較

4.病理學(xué)與DKI參數(shù)的相關(guān)性分析結(jié)果

腫瘤實(shí)性區(qū)及微觀浸潤(rùn)區(qū)的MD值與CD計(jì)數(shù)均呈顯著負(fù)相關(guān)(r值分別為-0.745、-0.753，P<0.05)，與VEGF計(jì)數(shù)亦呈負(fù)相關(guān)(r值分別為-0.726、-0.697，P<0.05)，與MVD之間無(wú)明顯相關(guān)性(r值分別為- 0.356、-0.186，P>0.05)。

圖3 a)MD鑒別腫瘤實(shí)性區(qū)與微觀浸潤(rùn)區(qū)的ROC曲線；b)MD鑒別微觀浸潤(rùn)區(qū)與水腫區(qū)的ROC曲線。 圖4 a)病理圖示腫瘤實(shí)質(zhì)區(qū)(A)、微觀浸潤(rùn)區(qū)(B)和單純水腫區(qū)(C)，腫瘤細(xì)胞核大、深染，核分裂象多，核漿比高，部分呈巢狀排列；微觀浸潤(rùn)區(qū)散在少量腫瘤細(xì)胞呈片狀分布；單純水腫區(qū)無(wú)腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)(×100，HE)； b)CD31染色后血管內(nèi)皮細(xì)胞呈棕褐色著色(×100，CD31)； c) VEGF染色后血管內(nèi)皮細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞胞漿染色為棕褐色或棕黃色，邊界清(×100，VEGF)。

腫瘤實(shí)性區(qū)及微觀浸潤(rùn)區(qū)的MK值與CD、MVD、VEGF計(jì)數(shù)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性(r值分別為0.152、0.108，0.118、008，0.140、0.339，P>0.05)。

討 論

本研究成功建立兔VX2惡性骨腫瘤模型，模型制備成功率達(dá)83.3%(25/30)，腫瘤邊界不清、存在微觀浸潤(rùn)區(qū)者的比例為70%，本研究所有統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)均來(lái)自存在微觀浸潤(rùn)區(qū)的骨腫瘤模型。該腫瘤模型是一種同種異體移植性模型，生物學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、傳代簡(jiǎn)易，且該腫瘤與人類(lèi)惡性骨腫瘤的生物學(xué)行為相似，血供豐富，呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，進(jìn)行性破壞周?chē)Y(jié)構(gòu)，是臨床研究惡性腫瘤的理想動(dòng)物模型[10-12]。趙景新等[12]發(fā)現(xiàn)細(xì)胞懸液植入法較組織塊植入法可提高腫瘤局部浸潤(rùn)率，但后者更易培養(yǎng)出大的瘤體，從而使實(shí)驗(yàn)更易于觀察。本實(shí)驗(yàn)采用傳統(tǒng)手術(shù)方法將VX2骨腫瘤組織塊植入脛骨，瘤體相對(duì)較大且存在微觀浸潤(rùn)區(qū)者的比例也相對(duì)較高。

病理學(xué)光鏡下可區(qū)分微觀浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)，微觀浸潤(rùn)區(qū)可見(jiàn)散在的少量腫瘤細(xì)胞及炎性細(xì)胞，骨髓水腫區(qū)內(nèi)無(wú)腫瘤細(xì)胞。瘤周水腫的發(fā)生機(jī)制目前仍不清楚，有文獻(xiàn)認(rèn)為主要包括炎癥反應(yīng)、血管源性水腫、壓力淤滯性水腫等[13-14]；腫瘤周?chē)难仔苑磻?yīng)、毛細(xì)血管滲出及腫瘤內(nèi)部壓力增高也可導(dǎo)致瘤周水腫，而惡性腫瘤周?chē)[主要可能是由于腫瘤浸潤(rùn)或周?chē)M織血流灌注及細(xì)胞通透性的改變所引起。

MRI可很好地顯示腫瘤周?chē)[情況，但常規(guī)MRI常難以區(qū)分腫瘤周?chē)奈⒂^浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)。相關(guān)研究認(rèn)為，常規(guī)T1WI是判斷骨腫瘤髓內(nèi)浸潤(rùn)程度的最佳方法[15-16]，但T1WI顯示的腫瘤邊界依靠的是骨髓內(nèi)脂肪替代所顯示的腫瘤的所謂邊緣，無(wú)法顯示和區(qū)分微觀浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)，其顯示的腫瘤邊緣并不一定是腫瘤在病理意義上的真正確切邊緣。本研究制備成功的兔VX2骨腫瘤模型中，MRI常規(guī)序列顯示腫瘤邊界不清，分析其原因可能是模型兔均為未成年兔，骨髓以紅骨髓為主，脂肪信號(hào)較少，使得骨髓替代的腫瘤區(qū)域與正常區(qū)域之間在T1WI上缺乏對(duì)比而難以區(qū)分，而T2WI和STIR抑脂序列在紅骨髓和微觀浸潤(rùn)區(qū)以及單純水腫區(qū)中均顯示高信號(hào)；另外，VX2瘤株種植成功后可迅速增殖呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，使得骨腫瘤的邊界更加難以區(qū)分。目前已有研究指出ADC值對(duì)區(qū)分惡性骨腫瘤微觀浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)具有重要價(jià)值[17]；DCE-MRI定量參數(shù)能準(zhǔn)確評(píng)估惡性骨腫瘤髓內(nèi)浸潤(rùn)范圍，其中Ktrans值的準(zhǔn)確度最高[18]。但目前尚無(wú)DKI鑒別骨腫瘤周?chē)[與腫瘤浸潤(rùn)的研究報(bào)道。

DKI成像目前在中樞神經(jīng)系統(tǒng)[19-21]、肝臟[22-24]等方面的研究較多，已證實(shí)其臨床應(yīng)用價(jià)值及研究前景。DWI為常規(guī)單e指數(shù)模型，假設(shè)人體內(nèi)水分子擴(kuò)散是不受阻礙的自由運(yùn)動(dòng)，水分子在隨機(jī)運(yùn)動(dòng)的情況下其擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)位移滿(mǎn)足高斯分布即正態(tài)分布；而生物組織內(nèi)水分子的擴(kuò)散實(shí)際上是在細(xì)胞間隙、細(xì)胞內(nèi)運(yùn)動(dòng)，故運(yùn)動(dòng)位移是非高斯分布的。水分子擴(kuò)散受周?chē)h(huán)境的限制程度越大、體素內(nèi)組織成分越混雜，擴(kuò)散的非高斯性越顯著。DKI是以非高斯模型為基礎(chǔ)的一種功能MRI新技術(shù)，可提供較常規(guī)DWI更精確的組織特征信息，由Jensen等[25]首次提出。MD和MK是DKI模型的兩個(gè)定量參數(shù)，MD是校正后的平均表觀擴(kuò)散系數(shù)(ADC)值，代表某一體素內(nèi)水分子擴(kuò)散的大小和程度，與組織細(xì)胞密度有關(guān)，其值越大表明組織內(nèi)水分子擴(kuò)散受限程度越小[26]。與ADC值相比，MD值可更好地量化水分子擴(kuò)散的非高斯行為，從而反映微觀結(jié)構(gòu)的細(xì)微變化，更接近于水分子在生物組織中的運(yùn)動(dòng)和分布[27-28]；MK為平均峰度，其大小取決于感興趣區(qū)內(nèi)組織的結(jié)構(gòu)復(fù)雜程度，組織微觀結(jié)構(gòu)越復(fù)雜，非正態(tài)分布水分子擴(kuò)散受限越顯著，即MK值越大[29]。

腫瘤迅速增殖生長(zhǎng)依賴(lài)于腫瘤新生血管的形成。惡性腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)快速，耗氧耗糖增加，導(dǎo)致腫瘤及其周?chē)M織的低氧和低糖狀態(tài)，從而刺激多種血管生成調(diào)節(jié)因子如VEGF的分泌[30-31]。VEGF為目前已知的作用最強(qiáng)的促血管生成因子，可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生纖溶酶原激活物、間質(zhì)膠原酶，增加微血管通透性。目前MVD是評(píng)估腫瘤新生血管生成的金標(biāo)準(zhǔn)[32]，MVD計(jì)數(shù)增高，表明腫瘤新生微血管增生活躍。

本研究Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示MD值與腫瘤細(xì)胞密度(CD)呈負(fù)相關(guān)，細(xì)胞密度越大，MD值越低，這與林浩等[33]在鼻咽癌中的研究結(jié)果類(lèi)似。腫瘤實(shí)質(zhì)區(qū)內(nèi)腫瘤細(xì)胞密度較高，微觀浸潤(rùn)區(qū)內(nèi)少量腫瘤細(xì)胞呈散在分布，水腫區(qū)無(wú)腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)。腫瘤實(shí)質(zhì)區(qū)的MD值低于微觀浸潤(rùn)區(qū)和單純水腫區(qū)，微觀浸潤(rùn)區(qū)的MD值亦顯著低于單純水腫區(qū)，MD值在腫瘤各區(qū)域間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這是因?yàn)镈KI對(duì)圖像信號(hào)衰減的擬合優(yōu)于單指數(shù)模型，能更準(zhǔn)確地反映病變的異質(zhì)性[34]。徐阿巧等[35]發(fā)現(xiàn)MVD、VEGF在不同子宮肌瘤病理類(lèi)型間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另有研究指出ADC值與宮頸癌MVD值呈負(fù)相關(guān)[36]，MD值是表觀擴(kuò)散系數(shù)的平均值，更可直觀準(zhǔn)確地反映其與MVD的關(guān)系。本研究結(jié)果顯示MD值與腫瘤實(shí)性區(qū)及微觀浸潤(rùn)區(qū)的VEGF表達(dá)水平均有一定相關(guān)性，但MD值與MVD值相關(guān)性不高，本研究與上述文獻(xiàn)研究結(jié)果存在一定差異，筆者分析原因是VX2腫瘤惡性程度高，腫瘤在其生長(zhǎng)過(guò)程中微血管生成期、穩(wěn)定維持期及血管退化各種狀態(tài)均存在，CD31染色不均一；另外可能與細(xì)胞突變、血管內(nèi)皮細(xì)胞異質(zhì)性較高有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，MD值鑒別診斷惡性骨腫瘤實(shí)性區(qū)與微觀浸潤(rùn)區(qū)、微觀浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)的AUC均大于0.5，在區(qū)分腫瘤不同區(qū)域方面具有較高的敏感度和特異度。臨床工作中對(duì)于區(qū)分惡性骨腫瘤邊界，實(shí)際上就是區(qū)分微觀浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)，DKI圖像有助于區(qū)分兩者，當(dāng)MD值大于1028.5 mm2/s時(shí)，可考慮為骨腫瘤周?chē)鷨渭兯[區(qū)，對(duì)臨床工作有一定指導(dǎo)意義。

相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，前列腺良、惡性組織間的MK值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[37]；王麗芳等[38]研究發(fā)現(xiàn)乳腺惡性腫瘤的MK值與Ki-67表達(dá)呈正相關(guān)。本研究結(jié)果表明，MK值在腫瘤實(shí)性區(qū)、微觀浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；腫瘤實(shí)性區(qū)和微觀浸潤(rùn)區(qū)的MK值與CD、MVD、VEGF計(jì)數(shù)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性，本研究與上述文獻(xiàn)的研究結(jié)果不符，分析其原因可能包括兩點(diǎn)：①兔VX2骨腫瘤因其生長(zhǎng)迅速，腫瘤中央多為壞死，腫瘤細(xì)胞環(huán)繞于壞死區(qū)域周?chē)虎谀[瘤DKI圖像后處理時(shí)，全部感興趣區(qū)由人工勾畫(huà)，免疫組化指標(biāo)均由人工計(jì)數(shù)，可能存在一定誤差。

當(dāng)前DKI參數(shù)MD值對(duì)骨腫瘤微觀浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)的鑒別診斷具有一定研究?jī)r(jià)值，可作為鑒別兩者的聯(lián)合手段之一，尚無(wú)能力單獨(dú)鑒別，故仍需進(jìn)一步研究，以提高DKI在骨腫瘤微觀浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)診斷中的應(yīng)用。

綜上所述，本研究結(jié)果表明DKI參數(shù)MD對(duì)判斷惡性骨腫瘤范圍特別是鑒別微觀浸潤(rùn)區(qū)與單純水腫區(qū)具有較高價(jià)值，MD值與腫瘤浸潤(rùn)區(qū)的CD、VEGF計(jì)數(shù)均呈負(fù)相關(guān)。