高遷移率族蛋白B1在新生兒持續肺動脈高壓中的變化及臨床意義

王石 李智超 郭夏 陶旭煒 周莉 曾凌空

新生兒持續肺動脈高壓(persistent pulmonary hypertension of the newborn, PPHN)是發生率較高的新生兒疾病[1-2]。目前臨床診斷PPHN及判斷患兒病情嚴重程度的金標準是心導管檢查，但因存在某些缺點而無法廣泛應用，因此急需尋找到能及時準確反映PPHN患兒病情嚴重程度的實驗室指標[3-4]。高遷移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein, HMGB1)屬于高遷移率族蛋白超家族，其在膿毒癥、腫瘤疾病、關節炎等急、慢性炎癥性疾病發生發展中發揮著重要的作用[5]。近些年有研究發現[6-7]，HMGB1與肺動脈高壓(pulmonary arterial hypertension, PAH)的發生發展及肺血管重構現象均存在密切聯系。目前尚缺少HMGB1與PPHN的相關文獻報道，故本研究擬觀察HMGB1在PPHN中的變化，并探討其臨床意義。

資料與方法

一、臨床資料

前瞻性研究本院2017年10月至2019年6月期間住院治療的62例PPHN患兒病例資料，根據患兒肺動脈收縮壓(pulmonary arterial systolic pressure, PASP)不同分為輕度組(35 mmHg70 mmHg,n=19例)[8]，同期選擇20例正常新生兒作為對照組。本研究方案已通過醫院倫理委員會審核批準。

二、病例納入及排除標準

病例納入標準：(1) 所有患兒均符合PPHN相關診斷標準[9]；(2) PPHN患兒及正常新生兒臨床資料均完整采集；(3) 患兒家屬均知曉研究內容并簽署同意書。病例排除標準：(1) 合并有房室間隔缺損、法洛四聯癥等器質性心臟病及惡性心律失常的患兒；(2) 合并有炎癥感染反應的患兒；(3) 合并有肝腎嚴重功能障礙、惡性腫瘤疾病及其他系統性疾病的患兒。

三、觀察指標

1 血清HMGB1表達水平檢測：分別采集PPHN患兒及正常新生兒出生時臍靜脈血2 mL，3000 r/min離心10 min后吸取上層血清，采用酶聯免疫吸附法檢測血清HMGB1表達水平(試劑盒購自德國IBM公司)，由專職檢驗科醫師按照試劑盒說明書進行操作。

2 PASP及心功能檢測：采用彩色多普勒超聲心動圖儀(購自美國HP公司，型號：HP5500)，超聲探頭頻率為2～4 MHz，分別檢測PPHN患兒及正常新生兒左室射血分數、左室短軸縮短率、右室流出道內徑及PASP等指標，由專職超聲影像科醫師進行操作。

3 血氣指標檢測：采用動脈血氣分析儀分別檢測PPHN患兒及正常新生兒出生時動脈血氧分壓(partial pressure of oxygen, PaO2)、動脈血氧飽和度(pulse oxygen saturation, SpO2)等血氣指標。

四、統計學分析

結 果

一、各組PPHN患兒與對照組新生兒臨床資料比較

各組PPHN患兒與對照組新生兒性別、胎齡、出生體重、分娩方式等臨床資料比較差異無統計學意義(P>0.05)(見表1)。

二、各組PPHN患兒與對照組新生兒血清HMGB1、PASP、血氣指標及心功能比較

各組PPHN患兒血清HMGB1、PASP、右室流出道內徑均明顯高于對照組新生兒(P<0.05)，各組PPHN患兒血清HMGB1、PASP、血氣指標及心功能比較均存在明顯差異性(P<0.05)，且隨著病情加重，血清HMGB1、PASP、右室流出道內徑明顯升高(P<0.05)，而左室射血分數、左室短軸縮短率、PaO2、SpO2明顯降低(P<0.05)(見表2)。

表1 各組PPHN患兒與對照組新生兒臨床資料比較

表2 各組PPHN患兒與對照組新生兒血清HMGB1、PASP、血氣指標及心功能比較

三、PPHN患兒血清HMGB1與PASP、血氣指標及心功能的相關性關系

PPHN患兒血清HMGB1與PASP、右室流出道內徑呈正相關性關系(P<0.05)，與左室射血分數、左室短軸縮短率、PaO2、SpO2呈負相關性關系(P<0.05)(見表3)。

表3 PPHN患兒血清HMGB1與PASP、血氣指標及心功能的相關性

討 論

較多的研究認為[10-11]，PPHN與肺動脈內皮細胞、平滑肌間相互作用及肺血管重建等現象均具有密切的聯系。任何影響因素造成新生兒缺氧，均可激活上述作用機制，進而使得肺血管內壓力顯著性升高。當PASP>30 mmHg時，即提示患兒存在肺動脈高壓癥狀，故臨床診斷PPHN和判斷患兒病情嚴重程度的關鍵為準確檢測肺動脈壓力[12]。目前心導管技術是檢測PASP最為直接和準確的方法，也是醫務人員公認的金標準，但此種方法對患兒可造成一定的創傷，尤其對于病情嚴重的新生兒而言難以承受[13]。目前臨床多通過彩色多普勒超聲心動圖儀檢測相關參數，從而間接獲得PASP以診斷PPHN和判斷患兒病情嚴重程度，但此種方法需要操作者具有豐富的工作經驗，且檢測耗費時間較長，故應尋找及時準確反映PPHN患兒病情嚴重程度的實驗室指標。

PAH的發病機制主要為肺固有細胞合成和釋放促炎癥細胞因子和炎癥趨化細胞因子，從而明顯增加血管通透性及白細胞浸潤程度，大量釋放較多促氧化劑和蛋白水解酶，最終導致肺組織嚴重損傷、血管收縮及血栓組織形成[14]。有研究發現[15]，炎癥性病理過程與PAH的發生發展及肺血管重構現象有明顯的相關性，而HMGB1可通過激活活化模式識別受體(pattern-recognition receptors, PRRs)而促進炎癥反應的發生，故HMGB1大量合成和釋放可導致肺血管重構和肺血管阻力顯著性增加。此外，HMGB1還可通過某些炎癥細胞因子對內皮素-1、成纖維細胞生長因子、轉化生長因子-β等的調控予以干預，從而導致肺血管重構[16-19]。研究發現[20]，慢性阻塞性肺病患者血清及痰液中的HMGB1表達水平明顯高于對照組，提示HMGB1高表達可誘發呼吸氣道及肺血管結構的重建現象，最終導致PAH的發生。由此可知，HMGB1在PAH發病過程中起著十分重要的作用，是疾病發病的調控細胞因子。但目前尚缺少HMGB1與PPHN的相關文獻報道，故本研究觀察不同病情嚴重程度PPHN患兒與正常新生兒血清HMGB1表達水平，結果顯示各組PPHN患兒血清HMGB1、PASP、右室流出道內徑均明顯高于對照組(P<0.05)，而左室射血分數、左室短軸縮短率、PaO2、SpO2明顯低于對照組(P<0.05)，且隨著病情加重血清HMGB1、PASP、右室流出道內徑明顯升高，而左室射血分數、左室短軸縮短率、PaO2、SpO2明顯降低，提示PPHN患兒病情越嚴重，血清HMGB1表達水平越高，HMGB1高表達是導致PPHN發生的重要作用機制。采用Pearson法分析PPHN患兒血清HMGB1與其他指標的相關性，結果顯示PPHN患兒血清HMGB1與PASP、右室流出道內徑呈正相關性關系(P<0.05)，與左室射血分數、左室短軸縮短率、PaO2、SpO2呈負相關性關系(P<0.05)，提示血清HMGB1與PASP、血氣指標及心功能在判斷PPHN患兒病情嚴重程度方面均具有較好的臨床價值。

綜上所述，PPHN患兒血清HMGB1與PASP、心功能及血氣指標具有明顯相關性，可較好反映患兒病情嚴重程度，具有較好的臨床應用價值，但本研究病例數相對較少，還需繼續擴大樣本量。此外，HMGB1在PPHN發生發展中的作用機制仍未研究清楚，還需以后進行動物模型等實驗予以探討。