Galectin-3與宮頸組織癌變關系的Meta分析

沐超，胡新榮

廣東醫科大學腫瘤研究所，廣東 東莞 523000

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤，高發病率和死亡率嚴重威脅著世界婦女的健康，其主要危險原因是高危型人乳頭瘤病毒HPV-16 和HPV-18 的感染。半乳糖凝集素-3(Galectin-3)是β-半乳糖苷凝集素家族中的嵌合型[1]，主要定位在細胞質，能夠通過與相應配體結合而參與細胞的生長、黏附、新生血管的形成以及凋亡等過程，而在腫瘤中，Galectin-3的表達與腫瘤的發生、侵襲、轉移密切相關[2-3]。

目前，已有多項研究報道了Galectin-3 在宮頸癌及宮頸上皮內瘤變(CIN)中的表達情況，但是尚未見其在宮頸組織病變中表達差異的系統評價。本文通過檢索和篩選相關文獻，系統評價了宮頸組織癌變過程中Galectin-3的表達情況，從而進一步闡明Galectin-3與正常宮頸組織向宮頸癌發展之間的關系，為輔助評估宮頸癌的預后提供相關分子標志。

1 資料與方法

1.1 檢索策略 分別檢索CBMdisc、CNKI、萬方、維普、PubMed、Web of Science、Medline 七個數據庫，檢索時間從建庫至2020年7月。同時手工檢索補充文獻。中文檢索詞包括：半乳糖凝集素-3、宮頸上皮內瘤變、宮頸癌。英文檢索詞包括：Galectin-3、Cervical Intraepithelial Neoplasias、Cervical Cancer。

1.2 納入和排除標準

1.2.1 納入標準 研究類型為病例-對照研究。檢測Galectin-3表達的方法為免疫組化法。研究對象符合以下條件：(1)所有病例均由病理診斷明確，既往無惡性腫瘤病史；(2)全部受試者取材前均未經放療、化療或生物治療；(3)全部受試者不區分民族、種族和國籍等。

1.2.2 排除標準 (1)文種非中、英文；(2)重復的文獻；(3)無相應對照組的文獻；(4)綜述、動物研究及會議摘要等。

1.3 文獻篩選與資料提取 由兩位研究人員按照納入和排除標準，獨立進行文獻的篩選和資料的提取，有異議的地方通過協商或由第三方裁定。提取的資料包括以下信息：作者、發表時間、納入病例年齡范圍、研究總例數以及Galectin-3表達陽性例數等。

1.4 統計學方法 使用Stata12.0軟件對納入的研究進行Meta 分析。通過查找相關資料，選定比值比(odds ratio，OR)作為合并統計量，95%為其可信區間(95%CI)。首先，對納入的研究進行異質性檢驗(檢驗水準為α=0.05)，采用森林圖和I2統計量來判斷研究間是否存在異質性。根據《Cochrane系統評價手冊》(以下簡稱“手冊”)：I2＞50%即可認為研究間存在異質性。經異質性檢驗，若各獨立研究的結果同質，則選用固定效應模型計算OR值；若各獨立研究的結果異質，先繪制Begg漏斗圖，并進行不對稱檢驗，從而識別是否存在發表偏倚。如果存在發表偏倚，則對偏倚的來源加以控制；如果不存在，則進一步使用敏感性分析和亞組分析，使研究達到同質后，再使用固定效應模型計算OR值。若假如經過異質性分析以及處理后，研究之間仍不具有同質性，則選用隨機效應模型，并分析異質性的來源。

2 結果

2.1 文獻檢索結果 通過計算機檢索，初步獲得168篇文獻，其中CBMdisc 22篇、CNKI 48篇、萬方28篇、維普28 篇、Pubmed 17 篇、Web of science 5 篇、Medline 20篇，另外補充文獻0篇。去除重復文獻90篇，經閱讀題目和摘要后初步篩除不相關的文獻54篇，然后嚴格按照納入和排除標準，再次閱讀全文復篩。最終，納入17篇[4-20]文獻，共2 262例受試者，包括正常宮頸組織293例、CIN 802例，宮頸癌1 167例。

2.2 納入研究的基本特征與質量評價 其中15份研究報道了正常宮頸組織Galectin-3 的表達情況；17 份研究中報道了CIN Galectin-3 的表達情況；16 份研究報道了宮頸癌Galectin-3的表達情況。納入研究的基本特征和質量評價如下(見表1和表2)。

表1 納入研究的基本特征

2.3 異質性檢驗

2.3.1 宮頸癌組與正常宮頸組 共14 份研究報道了宮頸癌組(1 018 例)與正常宮頸組(273 例)中Galectin-3 的表達情況。森林圖顯示：I2=84.5%，P=0.000，提示各項研究間存在異質性，可采用隨機效應模型分析，得OR=7.31，95%CI(2.71，19.71)，P=0.000。結果表明：在宮頸癌與正常宮頸組之間，Galectin-3 的表達可能存在差異。

2.3.2 宮頸癌組與CIN 組 共16 份研究報道了宮頸癌組(1167 例)與CIN 組(742 例)中Galectin-3的表達情況。森林圖顯示：I2=79.4%，P=0.000，提示各項研究間存在異質性，可采用隨機效應模型，得OR=3.30，95%CI (2.02，5.39)，P=0.000。結果表明：在宮頸癌組與CIN 組之間，Galectin-3 的表達可能存在差異。

2.3.3 CIN 組與正常宮頸組 共15 份研究報道了CIN 組(747 例)與正常宮頸組(293 例)中Galectin-3表達的情況。森林圖顯示：I2=78.7%，P=0.000，提示各項研究間存在異質性，同樣采用隨機效應模型，得OR=2.42，95%CI(1.04，5.61)，P=0.039。結果表明：Galectin-3 在宮頸癌組與正常宮頸組之間的表達可能存在差異。

2.3.4 繪制漏斗圖與發表偏倚的檢測 對宮頸癌組、CIN 組、正常宮頸組兩兩進行對比，分別繪制Begg 漏斗圖(圖1A～1C)，并通過秩相關檢驗可知：宮頸癌組與正常宮頸組的Pr＞0.956，宮頸癌組與CIN組的Pr＞0.224，CIN 組與正常宮頸組的Pr＞0.428。結果提示：三個比較組均無明顯發表偏倚。

2.4 敏感性分析 對宮頸癌組、CIN 組、正常宮頸組兩兩比較，并進行敏感性分析(圖2)，結果提示：聶磊[6]和劉嶸等[13]兩項研究對宮頸癌組與正常宮頸組的合并效應量影響較大；劉嶸等[13]的研究對宮頸癌組與CIN組的合并效應量影響較大；聶磊[6]的研究對CIN組與正常宮頸組的合并效應量影響較大。

2.5 亞組分析 將敏感性分析中所涉及的對合并效應量影響較大的兩項研究進行了剔除，隨后按照以下亞組對宮頸癌組與正常宮頸組、宮頸癌組與CIN組、CIN組與正常宮頸組再次進行分析，進一步探索異質性的主要來源。

2.5.1 亞組Ⅰ 根據研究選取的宮頸癌組織學類型分為：有鱗癌、腺癌等多種類型(a)與只有鱗癌一種類型(b)兩個亞組。森林圖顯示：在宮頸癌組與正常宮頸組(圖3)中，I2=33.5%，P=0.122，根據“手冊”可知研究間同質，符合固定效應模型；OR=13.54，95%CI(9.14，20.06)，P=0.000。總體表明：宮頸癌組Galectin-3 的表達高于正常宮頸組，差異具有統計學意義(P＜0.05)，并且各研究中選取的宮頸癌組織學類型的差異是宮頸癌組與正常宮頸組異質性的主要來源。

2.5.2 亞組Ⅱ 根據研究者有無提供具體CIN級別及相應Galectin-3 表達陽性例數分為：沒有提供者(a)和有提供者(b)兩個亞組。森林圖顯示：在宮頸癌組與CIN組(圖4)中，I2=61.1%，P=0.001，提示研究間異質性較前降低，采取隨機效應模型；OR=3.86，95%CI(2.65，5.61)，P=0.000。而在CIN組與正常宮頸組(圖5)中，I2=65.9%，P=0.000，提示研究間異質性也較前降低，采取隨機效應模型；OR=3.06，95%CI(1.50，6.22)，P=0.002。盡管結果表明研究者有無提供具體CIN 級別及相應Galectin-3 表達陽性例數是宮頸癌組與CIN組、CIN組與正常宮頸組異質性的主要來源，但由于研究間仍存在較高的異質性，對于Galectin-3的表達，僅得知：宮頸癌組可能高于CIN組，CIN組可能高于正常宮頸組。

圖4 宮頸癌組(CC)與CIN組

圖5 CIN組與正常宮頸組(NC)

3 討論

宮頸組織的癌變大多出現在子宮頸鱗狀上皮和柱狀上皮的交界處，小部分來自宮頸內膜化生的鱗狀上皮，其最常見的腫瘤組織學類型是鱗癌和腺癌。盡管目前接種HPV疫苗可以有效地預防宮頸癌，但是由于疫苗供量少和接種成本高，使得接種的普遍率不盡人意，并且宮頸癌的發病年齡正呈年輕化趨勢[21]。因此，深入探究宮頸癌相關分子對宮頸癌的篩查、診斷、治療和預后都有重大的意義。Galectin-3是腫瘤相關性蛋白，與腫瘤細胞黏附轉移、血管生成、抗凋亡、免疫耐受等有關[22]。并且許多研究發現，Galectin-3與宮頸癌關系密切，故其可以作為評估宮頸癌預后的分子標志。

此次系統評價顯示：對于納入的17 項研究，宮頸癌組與正常宮頸組、宮頸癌組與CIN組、CIN組與正常宮頸組均出現了較高的異質性，但是不存在明顯的發表偏倚。通過敏感性分析發現聶磊[6]和劉嶸等[13]兩項研究對合并效應量有較大的影響，原因可能與聶磊偏向選擇高載量HPV的感染病例，以及劉嶸使用精確度高的圖像分析系統放大了正常宮頸組織Galectin-3陽性表達率有關。在將這兩項研究剔除并進一步行亞組分析后發現，各研究選取的宮頸癌組織學類型的差異是宮頸癌組與正常宮頸組異質性的主要來源，說明Galectin-3在宮頸鱗癌和非鱗癌之間可能存在表達差異；而宮頸癌組與CIN組、CIN組與正常宮頸組異質性的主要來源是研究者有無提供具體CIN 級別及相應Galectin-3 表達陽性例數。最終結果顯示：與正常宮頸組相比，宮頸癌組Galectin-3的表達上調，這與多數學者[4，5，9-12，14-18，20]報道的結果相一致，提示Galectin-3與正常宮頸組織癌變關系密切。然而也有學者報道，在宮頸癌中Galectin-3的表達是降低的。例如，LEE等[23]報道了Galectin-3 在宮頸癌組織中的表達下調，并表明其表達降低與宮頸腫瘤的進展相關，原因可能是Galectin-3在各種類型的細胞中具有不同的功能。此次分析的結果在較大數據層面上支持了Galectin-3在宮頸癌中的表達高于正常宮頸組織，差異具有統計學意義，并且宮頸癌與CIN之間、CIN與正常宮頸組織之間Galectin-3 表達也存在差異，但考慮到研究間仍存在部分異質性，因此不能做出明確結論。

綜上所述，Galectin-3 表達上調會促進正常宮頸組織向宮頸癌的發展，檢測Galectin-3 的表達有助于宮頸癌的預后評估。

此次分析不排除有一定的局限性：①在公開發表的文獻中，以中文文獻占主要部分，國外研究偏少；②各個研究中組織標本的處理方法、免疫組化陽性結果判斷的主觀性等可能會對研究的一致性產生影響。