熒光PCR探針熔解曲線法與微孔板法檢測MTB耐藥性的臨床應用比較

王佩 趙國連 雷倩 鄭丹 崔曉利 周俊

近幾年，我國結核病的發病率逐年下降，但是耐藥結核病患者逐年增多，且治療難度大，醫療費用高，給結核病的防控帶來了巨大的挑戰。快速而準確地掌握患者的耐藥情況是治療和控制耐藥結核病傳播的重要手段。目前，表型藥物敏感性試驗(簡稱“表型藥敏試驗”)仍是診斷結核分枝桿菌(MTB)耐藥性的主要方法，但是表型藥敏試驗必須使用培養后分離的菌株，而且受到培養基上MTB生長速度的限制，一般需要28～42 d才能獲得樣品相關耐藥性的結果。這使得患者不能及時得到有針對性的治療，還增加了耐藥MTB傳播的風險。分子生物學檢測方法能夠快速檢測MTB的耐藥性，但檢測的準確性尚需大量臨床數據來驗證。微孔板法[最低抑菌濃度(MIC)法]是在液體培養基礎上建立的一種表型藥敏試驗方法，與傳統的固體藥敏試驗相比能提供更詳細的耐藥信息，且大大縮短了試驗周期[1-2]。筆者通過分析熒光PCR探針熔解曲線法和微孔板法檢測MTB耐藥性的一致性，研究MTB基因突變和MIC的關系，并探討這兩種方法在臨床中的應用價值。

資料和方法

一、研究對象

搜集2019年1—12月分離自西安市胸科醫院就診患者并經鑒定確認的343株MTB臨床分離株，患者標本包括痰液、肺泡灌洗液、胸腹腔積液、膿液、活體組織、腦脊液、引流液、尿液、胃液；菌株均進行了微孔板法藥敏試驗和熒光PCR探針熔解曲線法檢測。

二、細菌培養及菌種鑒定

將合格的標本用BACTEC MGIT 960系統……