梅州地區遺傳性耳聾分子流行病學調查

鄒婕，黃爍丹，丘建斌，莊宇嫦，王文芳，熊蓉，陳靜

（梅州市婦女兒童醫院，廣東 梅州 514021）

0 引言

根據世界衛生組織（WHO）的最新數據，超過全世界總人口的5%，也就是4.66億人是殘疾性聽力障礙患者（其中成人占4.32億，兒童占3400萬）。耳聾患者大多有極重度聽力障礙，即基本或完全聽不見，按照是否合并有其他系統的病變，分為綜合征型耳聾和非綜合征型耳聾（non-syndrome hearing loss，NSHL）。NSHL大多為單基因遺傳病，以單個基因上的雙等位基因突變致聾為主，遺傳方式多種多樣，其中，常染色體隱性遺傳為最主要的遺傳方式，在遺傳性耳聾中的比例占80%[1]。目前，在42個常染色體隱性非綜合征型聽力損失(ARNSHL)患者的基因中，發現超過700個不同的突變。按遺傳性基因突變位點及病癥發展情況，遺傳性耳聾可以分為先天性耳聾、藥物性耳聾和遲發性耳聾。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對象為2017年10月-2018年10月梅州地區出生，在經過醫院倫理委員會批準，自愿進行遺傳性耳聾基因檢測的6629例新生兒，納入標準：①父母雙方民族均為漢族；②監護人簽署知情同意書；③新生兒無凝血功能障礙。排除標準：①家族有其他遺傳病史；②新生兒伴有其他嚴重先天疾病；③新生兒先天發育異常或缺陷。男3502例，女3127例，男女比例為1:12。調查6629例新生兒遺傳病家族史和有關信息。監護人簽署知情同意書后，進行新生兒足跟血液采集與耳聾基因檢測。

1.2 儀器與試劑

基因檢測 基因擴增儀、分子雜交儀及耳聾基因診斷試劑盒（廣東凱普生物科技股份有限公司）。

1.3 研究方法

對6629例新生兒填寫采血卡并登記信息，完整而準確地填寫采血卡上的新生兒采血信息，確保所提供的聯系地址及電話是有效的。用一次性采血針采集足跟血前，須先對針刺部位消毒，采集時將血液充滿采血卡上方的3個直徑1cm大的濾紙圈。血樣采集后，裝于特制塑料袋內及時送達梅州市婦女兒童醫院醫學遺傳中心。

1.4 統計學方法

采用統計軟件對本次研究所取得的數據進行分析，計數資料采用χ2檢驗，計量資料采取t檢驗，以均數±標準差（）的形式對數據進行表示，以P<0.05代表有統計學意義。

2 結果

梅州地區新生兒耳聾基因突變率最高的是GJB2基因的235delC位點，突變率為1.52%。其次是SLC26A4 (PDS)基因的c.IVS7-2 A>G位點，突變率為1.00%。第三是線粒體DNA 12S rRNA基因的1555 A>G位點，突變率為0.38%。第四是GJB2基因的c.299-300delAT位點，突變率為0.27%。第五是GJB3基因的c.538 C>T位點、SLC26A4基因的c.1229 C>T位點，突變率均為0.14%。其余SLC26A4基因的c.2168 A>G位點突變率為0.09%，GJB2基因的c.176-191del16bp、12S rRNA基因的m.1494 C>T、tRNASer(UCN)基因的m.7445 A>G，它們均為0.02%。另外，發現4例GJB2基因的c.235delC復合SLC26A4基因的c.IVS7-2 A>G雙重雜合突變，突變率為0.06%、1例GJB2基因的c.235delC復合SLC26A4 基因的c.1229 C>T雙重雜合突變，突變率為0.02%。詳見表1。

表1 6629例新生兒耳聾基因檢出情況

3 討論

耳聾是一種病因復雜且嚴重的健康問題，研究表明新生兒的耳聾發病率約為1/1000,由于遺傳因素導致的耳聾約占50%～60%[2]。在我國，常見的遺傳性耳聾致病基因主要為GJB2、GJB3、SLC26A4、線粒體DNA。

GJB2基因突變而致聾的比例占50%～70%，是最為常見的遺傳性耳聾基因[3]。該基因編碼的蛋白包含266個氨基酸殘基構成的縫隙連接蛋白，該蛋白和鄰近細胞的縫隙連接蛋白共同構成一個完整的縫隙連接通道，為第二信使和小分子代謝物質的重要通道，這些通道在物質交換和信息傳導中具有重要作用。大多數高加索人群中，c.35delG突變是最常見的致病變異，約占GJB2突變的70%[4]。歐洲人群中的c.35delG攜帶率差異顯著，其中歐洲東南部最高。本研究對梅州地區新生兒耳聾基因進行調查研究顯示，未發現有c.35delG突變。據研究報道顯示[5]，在日本人群中c.235delC是主要突變位點，占所有GJB2突變的比例高達73%。流行病學顯示，在中國和日本，最常見的GJB2突變主要為編碼區的c.235delC、c.35delG、c.176-191del16bp和c.299-300delAT 4個突變或缺失位點，占GJB2突變的比例高達80%。廣東省韶關市婦幼保健院新生兒耳聾基因檢測結果顯示，GJB2基因突變主要為c.235delC雜合突變和c.299-300delAT雜合缺失，GJB2基因雜合突變率為1.83%[6]。我們的研究結果顯示，在梅州地區新生兒GJB2基因的突變或缺失以c.235delC和c.299-300delAT雜合突變為主，突變概率分別為1.52%和0.27%。另外有1例c.176-191del16bp位點雜合突變，突變概率為0.02%，GJB2基因的總突變檢測率為1.81%。這一研究結果與韶關新生兒的數據較為接近，提示GJB2基因的突變類型和突變率在粵北和粵東（梅州）類似。

眾所周知，線粒體遺傳性耳聾的特征表現為母系遺傳，也被稱為母系遺傳性耳聾，在藥物性耳聾的發生發展過程中發揮著非常重要的作用。在全球范圍內，可發現線粒體12S rRNA基因上m.1555 A>G 和m.1494 C>T的突變，并與NSHL和氨基糖甙類抗生素藥物致聾相關。據報道，我國人群的線粒體12S rRNA基因突變主要位點為m.1555 A>G和m.1494C>T，兩個位點總攜帶率在0.18%～0.40%[7]。我院6629例新生兒人群中m.1555 A>G位點突變攜帶率為0.38%，m.1494C>T位點突變攜帶率為0.02%，總突變檢測率為0.39%。梅州地區人群線粒體12S rRNA基因突變攜帶率符合全國流行病學調查數據[8]。據報道[9]，線粒體tRNA Ser(UCN)基因上的m.7445 A>G、tRNAHis基因上的m.12201 T>C與NSHL相關。這些突變會導致tRNA結構和功能的變化。目前，發現的與NSHL相關的線粒體tRNA原發突變主要集中在tRNA Ser(UCN)基因[10]。本研究中發現1例攜帶tRNA Ser(UCN)m.7445 A>G突變,該突變會對tRNA Ser(UCN)前體的加工產生影響。

綜上所述，通過對梅州地區新生兒耳聾易感基因的篩查，我們發現梅州地區新生兒耳聾易感基因突變率為3.65%，其中主要以GJB2和SLC26A4兩個基因突變頻率最高，這一結果與我國其他地區耳聾易感基因突變類似。通過耳聾易感基因篩查，了解新生兒耳聾易感基因攜帶情況，為先天性耳聾兒童的診治提供完善的治療方案，為遲發性耳聾患者提供有效的干預措施。同時，通過篩查-遺傳咨詢等一系列的措施，對降低新生兒出生缺陷和提高我國人口素質將大有裨益。