廣州地區(qū)RhD陰性獻(xiàn)血人群中ABO血型及抗原分布研究

蔣國(guó)強(qiáng)

【摘要】 目的：探討廣州地區(qū)RhD陰性獻(xiàn)血人群中ABO血型及抗原表型與表位分布情況。方法：選取廣州血液中心2017年1月-2019年12月經(jīng)血型儀法初篩RhD陰性樣本1 428例，應(yīng)用間接抗人球蛋白試驗(yàn)（IAT）進(jìn)行確認(rèn)，同時(shí)確定RhD陰性獻(xiàn)血者ABO血型及抗原表型的分布情況。結(jié)果：在1 428例初篩為RhD陰性的樣本中，經(jīng)IAT確認(rèn)為RhD陰性1 374例（96.22%），D變異型54例（3.78%）。RhD陰性獻(xiàn)血人群中血型A型398例（28.97%），B型371例（27.00%），O型426例（31.00%），AB型179例

（13.03%）。確認(rèn)為RhD陰性分型分布為ccee 774例（56.33%）、Ccee 396例（28.82%）、ccEe 89例（6.48%）、CCee 95例（6.91%）、CCEe 4例（0.29%）、CcEE 3例（0.22%）、CcEe 13例（0.95%）;RhD陰性獻(xiàn)血者的抗原表位中e抗原分布有1 371例，c抗原1 275例，C和E抗原分別為511例和109例。結(jié)論：廣州地區(qū)RhD陰性獻(xiàn)血人群中O型血型占比最高，A、B型血型次之，AB型血型占比最低;RhD陰性抗原表型分布以ccee為主，RhD陰性抗原表位以e、c的抗原為主。

【關(guān)鍵詞】 RhD陰性 ABO血型 抗原表型 抗原表位

Distribution of ABO Blood Groups and Antigens in RhD Negative Blood Donors in Guangzhou/JIANG Guoqiang. //Medical Innovation of China， 2021， 18（32）： 0-075

[Abstract] Objective： To explore the distribution of ABO blood group， antigen phenotype and epitope in RhD negative blood donors in Guangzhou. Method： A total of 1 428 RhD negative samples screened by blood group analyzer were selected from Guangzhou blood center from January 2017 to December 2019， and then confirmed by indirect antiglobulin test （IAT）. At the same time， the distribution of ABO blood group and antigen phenotype of RhD negative blood donors were determined. Result： Among 1 428 RhD negative samples， 1 374 cases （96.22%） were confirmed as RhD negative by IAT， and 54 cases （3.78%） were D variant. Among the RhD negative blood donors， there were 398 cases （28.97%） of type A， 371 cases （27.00%） of type B， 426 cases （31.00%） of type O and 179 cases （13.03%） of type AB. RhD negative typing was confirmed in 774 cases （56.33%） of ccee， 396 cases （28.82%） of Ccee， 89 cases （6.48%） of ccEe， 95 cases （6.91%） of CCee， 4 cases （0.29%） of CCEe， 3 cases （0.22%） of CcEE and 13 cases （0.95%） of CcEe; there were 1 371 cases of e antigen， 1 275 cases of c antigen， 511 cases of C antigen and 109 cases of E antigen in RHD negative blood donors. Conclusion： Among RhD negative blood donors in Guangzhou， the proportion of O blood group is the highest， followed by A and B blood groups， and AB blood group is the lowest. The phenotype distribution of RhD negative antigen is mainly ccee， and the epitopes of RhD negative antigen are mainly e and c.

[Key words] RhD negative ABO blood group Antigenic phenotype Antigenic epitope

First-author’s address： Guangzhou Blood Center， Guangzhou 510095， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.32.018

Rh血型系統(tǒng)是除ABO血型系統(tǒng)外最重要、最復(fù)雜及最具多態(tài)性的血型系統(tǒng)[1]。Rh血型系統(tǒng)目前已發(fā)現(xiàn)超過(guò)50個(gè)抗原，其中最常見(jiàn)的是C、c、D、E、e抗原[2]。D抗原是這5種抗原中免疫原性最強(qiáng)的一種，可以依據(jù)有無(wú)D抗原將Rh血型系統(tǒng)分為Rh陽(yáng)性和Rh陰性[2-3]。倘若RhD陰性個(gè)體在輸血或懷孕過(guò)程中接觸正常的RhD陽(yáng)性細(xì)胞免疫刺激后可產(chǎn)生抗-D，則會(huì)造成新生兒溶血癥、溶血性輸血反應(yīng)[4-5]。目前在臨床工作中Rh血型系統(tǒng)的影響僅次于ABO血型系統(tǒng)，對(duì)臨床用血交叉配合具有重要的意義[6]。因此，了解RhD陰性獻(xiàn)血人群中ABO的血型分布、抗原表位和抗原表型的情況，對(duì)于建立RhD表型庫(kù)保障臨床用血安全具有重要作用[7]。為了提高臨床用血的安全性、有效性，提高稀有血型的供血能力，本研究選取廣州血液中心2017年

1月-2020年6月RhD陰性樣本1 428例，探討廣州地區(qū)RhD陰性獻(xiàn)血人群中ABO血型及抗原表型與表位分布情況。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取廣州血液中心2017年1月-

2020年6月經(jīng)過(guò)血型儀法初篩RhD陰性的無(wú)償獻(xiàn)血者1 428例，其中男722例，女706例;年齡18～56歲，平均（34.62±5.80）歲;納入標(biāo)準(zhǔn)：廣州地區(qū)RhD陰性的無(wú)償獻(xiàn)血者;年齡18～55歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：獻(xiàn)血后血液檢查不合格。本研究均獲得獻(xiàn)血者的知情同意并簽署知情同意書(shū)，且經(jīng)本血站中心醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 選用瑞士貝克曼公司生產(chǎn)的全自動(dòng)血型分析儀，日本Kubota（久保田）公司的KA-2200型離心機(jī)，Thermo fisher（型號(hào)Sorvall BP16）離心機(jī)。血型儀法（貝克曼PK7300）初篩試劑應(yīng)用北京金豪制藥股份有限公司提供RhD（IgM）血型定型試劑盒（單克隆抗體）進(jìn)行篩選[8];應(yīng)用間接抗人球蛋白試驗(yàn)（indirect antihuman globulin testing，IAT）進(jìn)行RhD陰性確認(rèn)，試劑選用江蘇力博醫(yī)藥生物技術(shù)股份有限公司制品，采用兩種不同廠家的RhD抗體試劑進(jìn)行陰性確認(rèn)，對(duì)陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行直接抗球蛋白試驗(yàn)以排除假陽(yáng)性。分別應(yīng)用抗-C、抗-c、抗-E、抗-e試劑對(duì)RhD陰性的樣本進(jìn)行血清學(xué)表型鑒定[9]。抗-DIgG、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e試劑以及間接抗人球蛋白試劑均選用珠海貝索生物技術(shù)有限公司制品。所有試劑均在有效期間使用。

1.3 觀察指標(biāo) 針對(duì)初篩RhD陰性樣本，分析ABO血型分布情況，進(jìn)行血清學(xué)表型鑒定，確定血樣分別為C、c、E、e的抗原表型以及抗原表位分布。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，計(jì)數(shù)資料用例（%）表示。

2 結(jié)果

2.1 RhD陰性獻(xiàn)血者的ABO血型分布情況 RhD陰性獻(xiàn)血人群中血型A型398例（28.97%），B型371例（27.00%），O型426例（31.00%），AB型179例（13.03%）。O型獻(xiàn)血者在RhD陰性獻(xiàn)血者所占比例最高，A、B型血型次之，AB型獻(xiàn)血者所占比例最低，見(jiàn)表1。

2.2 RhD陰性獻(xiàn)血者的抗原表型分布 1 428例初篩RhD陰性獻(xiàn)血者中，IAT確認(rèn)為RhD陰性1 374例（96.22%），其中RhD陰性分型分布為ccee 774例（56.33%）、Ccee 396例（28.82%）、ccEe 89例（6.48%）、CCee 95例（6.91%）、CCEe 4例（0.29%）、CcEE 3例（0.22%）、CcEe 13例（0.95%），未見(jiàn)ccEE表型。見(jiàn)表2。

2.3 RhD陰性獻(xiàn)血者的抗原表位分布 c抗原陽(yáng)性初篩RhD陰性1 316例，IAT確認(rèn)RhD陰性1 275例;C抗原陽(yáng)性初篩RhD陰性551例，IAT確認(rèn)RhD陰性511例;E抗原陽(yáng)性初篩RhD陰性126例，IAT確認(rèn)RhD陰性109例;e抗原陽(yáng)性初篩RhD陰性1 423例，IAT確認(rèn)RhD陰性1 371例。見(jiàn)表3。

3 討論

血型是一種抗原，是人類(lèi)各種血液成分的遺傳性狀表達(dá)，不同的血液成分表面存在不同的抗原類(lèi)型[10]。1900年奧地利醫(yī)生Landsteiner發(fā)現(xiàn)了第一個(gè)血型系統(tǒng)，即ABO血型系統(tǒng)，從此人類(lèi)揭開(kāi)了血型的奧秘，同時(shí)也為人類(lèi)醫(yī)學(xué)的發(fā)展提供了更為安全的輸血治療手段。目前Rh血型與ABO、MNS和P血型系統(tǒng)等是人類(lèi)發(fā)現(xiàn)的較為重要的血型系統(tǒng)，其中Rh血型系統(tǒng)和ABO血型系統(tǒng)在臨床中應(yīng)用廣泛[11-13]。Rh血型系統(tǒng)被認(rèn)為是紅細(xì)胞血型中最為復(fù)雜的一個(gè)血型系統(tǒng)，其中RhD血型由于獨(dú)特的基因組構(gòu)造，容易產(chǎn)生變異，現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)的D變異型主要有弱D、部分D和D放散型（Del）等不同的變異表型[14-15]。此外，臨床中約有80%的RhD陰性患者在輸注了RhD陽(yáng)性的紅細(xì)胞后，都會(huì)產(chǎn)生抗-D IgG抗體，可引發(fā)遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)和胎兒母親血型不合引起的新生兒溶血病[16]，為此，RhD變異型的孕婦、新生兒等需要更安全有效的血液。

ABO血型系統(tǒng)是臨床中最為熟悉的血型系統(tǒng)，關(guān)于ABO血型輸血發(fā)生的不良反應(yīng)也逐年降低[17-18]。研究表明，臨床工作中較多見(jiàn)的輸血反應(yīng)大多是由于Rh血型表型不符所導(dǎo)致，臨床主要監(jiān)測(cè)Rh中D抗原，而忽視抗原E在輸血中的不安全因素。因此，針對(duì)RhD血型的抗原表型和抗原表位研究，不僅有助于建立RhD表型庫(kù)提升血液中心血庫(kù)的能力，更可以預(yù)防因血型不符導(dǎo)致的臨床輸血反應(yīng)，保障臨床輸血的安全[19-21]。

目前研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)超過(guò)250多種等位基因，RhD與編碼C、c、E、e抗原的RHCE基因位于1p34.3-36.1，RHD基因編碼RhD抗原，RHCE基因編碼RhCE抗原，兩基因緊密連鎖，具有很高的同源性[22-23]，文獻(xiàn)[1]研究發(fā)現(xiàn)，RhD基因與RHCE基因二者只有40個(gè)核苷酸不同，這40個(gè)核苷酸分別位于RHD和RHCE基因第3、4、5、6、7、9外顯子[24]。在本次研究的1 428例初篩RhD陰性獻(xiàn)血者中，IAT確認(rèn)為RhD陰性1 374例（96.22%），D變異型標(biāo)本54例（3.78%），這一結(jié)論與步曉筠等[11]在寧夏地區(qū)RhD陰性獻(xiàn)血人群D變異型所占比例5.49%相差較大，究其原因，研究者認(rèn)為寧夏地區(qū)RhD陰性獻(xiàn)血人群D變異型居多主要與地域差異、種族差異存在相關(guān)性。觀察RhD陰性獻(xiàn)血者的ABO血型分布情況，發(fā)現(xiàn)O型獻(xiàn)血者在RhD陰性獻(xiàn)血者所占比例最高，A、B型血型次之。本研究發(fā)現(xiàn)AB型獻(xiàn)血者所占比例最低，與凌勵(lì)等[12]在河南省南陽(yáng)市RhD陰性獻(xiàn)血者血型抗原分布規(guī)律的研究結(jié)論具有一致性。

本次研究中1 374例RhD陰性獻(xiàn)血者其分型按構(gòu)成比排序分別為ccee（56.33%）、Ccee（28.82%）、ccEe（6.48%）、CCee（6.91%）、CCEe（0.29%）、CcEE（0.22%）、CcEe（0.95%），閆芳等[9]研究結(jié)果顯示ccee分型檢出率所占比例達(dá)到56.36%，與本研究結(jié)果類(lèi)似，抗原表型均以ccee為主，但在閆芳等[9]研究中發(fā)現(xiàn)ccEE分型的獻(xiàn)血者有12例，本次的研究中未發(fā)現(xiàn)ccEE分型。本研究RhD陰性獻(xiàn)血者抗原分布結(jié)果顯示c抗原陽(yáng)性初篩RhD陰性

1 316例，C抗原陽(yáng)性初篩RhD陰性551例，E抗原陽(yáng)性初篩RhD陰性126例，e抗原陽(yáng)性初篩RhD陰性1 423例，表明RhD陰性獻(xiàn)血者抗原表位主要以e抗原和c抗原為主。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)廣州地區(qū)RhD陰性獻(xiàn)血人群中O型血型占比最高，A、B型血型次之，AB血型占比最低。RhD陰性抗原表型分布以ccee為主，RhD陰性抗原表位以e、c抗原為主。RhD陰性獻(xiàn)血者ABO血型及抗原分布情況有助于RhD表型數(shù)據(jù)庫(kù)的建立，可預(yù)防因Rh表型不符輸血而導(dǎo)致嚴(yán)重的溶血反應(yīng)，保障臨床安全用血。本研究樣本數(shù)量較少，后期研究應(yīng)擴(kuò)大獻(xiàn)血人群中的樣本量。

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（收稿日期：2021-09-17） （本文編輯：張爽）