IgM-κ型M蛋白對全血CRP的檢測干擾及分析

史曉潔，侯艷峰,陳 亮，馬岳珠，魏天晗，苑玉嬌，王泉淼，劉志忠△

1.中國康復研究中心北京博愛醫院檢驗科，北京 100068；2.北京大學第一醫院檢驗科，北京 100034; 3.深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司北京分公司，北京 100000

M蛋白是由B淋巴細胞或漿細胞單克隆惡性增殖所產生的一種在氨基酸組成及順序上十分均一的異常免疫球蛋白，具有獨特的物理、化學及免疫學特性，其增多引起的黏滯血癥及與體內某些物質的特異結合(如形成巨酶)可干擾檢驗結果，在特定條件下產生沉淀可以干擾比色和濁度分析而引起假性結果[1]。C-反應蛋白(CRP)是一種典型的非特異性急性時相蛋白，對于細菌感染、各種炎癥過程的監測、急性心肌梗死、新生兒血流感染診斷等方面具有重要意義[2]，使用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝的全血樣本開展血常規與全血CRP的快速聯合檢測，有助于鑒別感染、炎癥病變類型和程度，得到臨床的普遍認可與支持。近日，筆者發現1例典型的IgM-κ型M蛋白干擾全血標本CRP項目檢測的案例，并對目前幾種CRP檢測體系抗M蛋白干擾能力進行了評估，現報道如下。

1 材料與方法

1.1標本來源 患者，男，84歲，因肺部感染、泌尿道炎癥入院治療。收集患者同部位、同時抽取的EDTA-K2抗凝血標本與生化促凝血標本。

1.2儀器與試劑 普門PA990特定蛋白分析儀及配套CRP試劑(深圳普門公司)、普門PA900特定蛋白分析儀及配套CRP試劑(深圳普門)、 Orion Diagnostica QuikRead go C-反應蛋白定量分析儀及配套試劑(芬蘭)、邁瑞BC-5390CRP儀器及配套CRP試劑(深圳邁瑞)、邁瑞BS-800M全自動生化分析儀(深圳邁瑞)及中生超敏CRP試劑(中生北控)、邁瑞BS-2000M全自動生化分析儀(深圳邁瑞)及積水超敏CRP試劑(日本)、貝克曼AU680自動生化分析儀(美國)及積水CRP試劑(日本)。

1.3方法 普門PA990特定蛋白分析儀、普門PA900特定蛋白分析儀采用散射免疫比濁法，Orion Diagnostica QuikRead go C-反應蛋白定量分析儀、邁瑞BC-5390CRP儀器、邁瑞BS-800M全自動生化分析儀、邁瑞BS-2000M全自動生化分析儀、貝克曼AU680自動生化分析儀均采用透射免疫比濁法，其抗體來源依次為兔克隆抗CRP抗體、羊克隆抗CRP抗體、鼠克隆抗CRP抗體、兔克隆抗CRP抗體、鼠克隆抗CRP抗體、鼠克隆抗CRP抗體。

2 結 果

2.1干擾的發現 該例患者的血常規聯合全血CRP檢測中，普門PA990特定蛋白分析儀測得CRP水平為158 mg/L，而白細胞計數(WBC)及中性粒細胞百分比(NEU%)均正常(WBC：5.83×109/L、NEU%：57.7%)，血常規檢測與CRP結果極度不符，其同時抽取的生化促凝標本中的超敏CRP項目(邁瑞BS-800M全自動生化分析儀及中生超敏CRP試劑檢測)，結果為1.60 mg/L，反應曲線正常。

更換檢測儀器與系統后的結果如下：血常規全血標本使用Orion Diagnostica QuikRead go C-反應蛋白定量分析儀進行檢測，檢測CRP結果為92.00 mg/L；普門PA900特定蛋白分析儀檢測CRP結果為142.00 mg/L；邁瑞BC-5390CRP儀器檢測CRP結果為1.40 mg/L。生化血清標本使用邁瑞BS-2000M全自動生化分析儀及積水超敏CRP試劑進行檢測，CRP檢測結果為1.30 mg/L；使用貝克曼AU680自動生化分析儀及積水CRP試劑進行檢測，CRP檢測結果為1.94 mg/L；生化反應曲線均正常。血清標本CRP項目，使用生理鹽水稀釋2、4、10倍后，結果分別為2.12、2.14、2.10 mg/L；稀釋前后結果一致，反應曲線均正常。CRP>100 mg/L表示嚴重的疾病過程并常表示細菌感染的存在。異常增高的CRP結果為干擾導致的假性增高。

2.2干擾的產生 回顧該患者生化結果，總蛋白偏高(86.7 g/L)、清蛋白偏低(33.8 g/L) 、清蛋白/球蛋白比例倒置(0.6)。但肝功酶類均正常，提示清蛋白/球蛋白比例倒置并非由肝臟功能障礙引起。檢測免疫球蛋白IgM水平，結果嚴重超限，約為45 g/L。最后血清蛋白電泳結果確定患者存在M蛋白，并進一步分型提示為IgM-κ型M蛋白。

2.3干擾的糾正 對于全血標本，有條件實驗室可以嘗試更換檢測系統，針對本例標本，使用邁瑞BC-5390CRP儀器及配套CRP試劑，能夠得到正確的結果。 另外，使用普門PA990特定蛋白分析儀，血常規標本3 000 r/min離心5 min后，使用血漿進行檢測，結果為5 mg/L，基本可以排除干擾，而Orion Diagnostica QuikRead go C-反應蛋白定量分析儀使用同樣處理后的血漿進行檢測，結果>120 mg/L，干擾仍然存在，具體原因有待進一步研究。

3 討 論

不同類型M蛋白的理化性質不一樣、檢測試劑成分有差異，受干擾的方法和項目也不一樣[3]。近年來，已有很多研究報道 M 蛋白在臨床檢測中存在干擾，包括血常規檢測中的血細胞計數、血紅蛋白等，免疫檢測中的促甲狀腺激素等，以及生化檢測中的血清鈉、鈣、C 反應蛋白、高密度脂蛋白膽固醇、葡萄糖、γ-谷氨酰基轉移酶等[4-10]。

關于M蛋白導致CRP結果假性增高或假性降低的案例，均為血清標本相關報道，尚無M蛋白干擾全血CRP結果的報道。本案例發現IgM-κ型M蛋白可導致EDTA抗凝血(全血)CRP結果假性增高，對比各種儀器CRP檢測結果，提示M 蛋白干擾的出現與儀器性能、試劑組分相關。不同品牌儀器受到的M蛋白干擾程度不同，不同標本類型(全血、血清、血漿)抗干擾能力也不同，具體原因有待進一步研究。

日常工作中，檢驗者除需要重視溶血、脂血、黃疸等干擾因素外，一定要充分認識M蛋白干擾的潛在可能性。而CRP作為炎癥標志物，隨著即時檢驗技術的進展，不同檢測系統的CRP儀器快速準確、結果可比性強。全血CRP聯合血常規白細胞結果可以快速有效地區分不同病原體類型，為臨床診斷和治療提供支持,具有良好的臨床應用推廣價值。錯誤的CRP結果，可能會誤導臨床診斷與治療，而急診患者，更應該警惕這種干擾。對于急查樣本，一方面應該結合白細胞、紅細胞沉降率等結果綜合分析CRP結果，另一方面也可以根據生化結果中清蛋白/球蛋白比例進行這種干擾的排查[11]。

綜上所述，在審核檢驗結果時，若發現CRP與血常規結果極度不匹配或與臨床表現不符時，應根據實驗室條件，更換檢測方法，確保檢驗結果準確無誤。生化血清標本可以先查看反應曲線有無異常，嘗試對受干擾的項目通過稀釋法檢測。必要時應向臨床醫生解釋由方法學、試劑和標本類型等影響導致的結果差異，對于需要頻繁檢測CRP水平的患者，建議患者采用同一種方法進行病情監測。