經典名方制劑小柴胡顆粒的精品化發展策略△

張雪，吳宏偉，林麗娜，劉暉暉，楊洪軍,3

1.中國中醫科學院 中藥研究所，北京 100700；2.華潤三九醫藥股份有限公司，廣東 深圳 518000；3.中國中醫科學院 醫學實驗中心，北京 100700

《中華人民共和國中醫藥法》中將經典名方定義為至今仍廣泛應用、療效確切、具有明顯特色與優勢的古代中醫典籍所記載的方劑，國家中醫藥管理局于2018年4月發布《古代經典名方目錄(第一批)》，旨在為人民群眾健康提供更好的保障。除國家已公布的《古代經典名方目錄(第一批)》，已上市的經典名方制劑由于配伍得當，臨床療效顯著，在上市中成藥中占有一席之地，如六味地黃丸、附子理中丸、五苓散、小柴胡顆粒等。以高品質提升中成藥高質量發展，是經典名方開發的3條道路之一[1]，但目前已上市的經典名方中成藥仍存在著工藝較粗放、標準不完善的弊端。小柴胡顆粒為《傷寒論》中小柴胡湯的現代劑型，由柴胡、黃芩、黨參、甘草、姜半夏、生姜與大棗7味中藥組成，于1993年上市，主治外感病，是已上市經典名方中成藥中市場份額占比較高的品種。米內網(醫藥健康數據資訊網站)數據分析發現，小柴胡顆粒2014—2018年銷售額呈上升趨勢，2016—2018年銷售額均超過5億元，是典型的中成藥大品種。在目前國家食品藥品監督管理局官網上備案的98家企業101個小柴胡顆粒批準文號中，廣州白云山光華制藥股份有限公司、云南白藥集團股份有限公司及北京亞東制藥有限公司占據2018年小柴胡市場份額的73.13%(圖1)，而最早一批獲取生產批準文號的廠家已停產。目前，小柴胡顆粒缺少示范性品牌，國際上日本漢方仍占主導地位，故國內亟須打造優質的小柴胡顆粒品牌。發展高質量、高品質的經典名方制劑，將有助于小柴胡顆粒打開國際市場，并為經典名方的上市開發提供示范。

小柴胡顆粒上市至今已近30年，在《中華人民共和國藥典》(以下簡稱《中國藥典》)2020年版的小柴胡顆粒質量控制標準中，仍以單一指標黃芩苷作為質量控制指標，并未對小柴胡顆粒中柴胡含量及其他藥味做出含量限量要求，在質量指標控制方面，小柴胡顆粒仍存在較大的提升空間。對于已上市的經典名方，打造“精品化”品牌，以精品傳承經典，價值驅動市場，有助于市場良性競爭與經典名方的高品質發展。本文以小柴胡顆粒為研究對象，通過對其現有質量研究進展、中日兩國質量控制指標比較及精品化研發策略等方面進行論述，為已上市經典名方精品開發提供研究思路。

1 小柴胡顆粒質量評價研究進展

以“小柴胡顆粒”與“質量”為檢索詞，在中國知網、萬方數據、維普數據中進行檢索，篩選重復項后發現，共有35篇文獻與小柴胡顆粒質量檢測相關，所使用方法包含高效液相色譜法(HPLC)、薄層色譜法、近紅外光譜分析技術、毛細管電泳法、電感耦合等離子體原子發射光譜法等。定量指標主要為黃芩中黃芩苷(17篇)、漢黃芩苷(4篇)、黃芩素(4篇)、漢黃芩素(4篇)，甘草中甘草苷(2篇)、甘草酸銨(2篇)、甘草次酸(1篇)，柴胡中柴胡皂苷a(2篇)、柴胡皂苷b1(1篇)、柴胡皂苷b2(1篇)、柴胡皂苷d(1篇)。薄層色譜法鑒定飲片包括甘草、黃芩、黨參、柴胡。通過以上檢索分析發現，小柴胡顆粒質量檢測方法中仍以黃芩質量控制等易測指標居多，而其君藥柴胡相關質量控制研究較少。

1.1 不同廠家質量差異

相關研究利用HPLC，對市售10家企業的小柴胡顆粒中黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素與甘草次酸進行含量測定，數據顯示，10個廠家所生產的小柴胡顆粒這5個成分的變異系數均大于25.0%，其中黃芩素變異系數最大為37.18%，表明不同廠家所生產的小柴胡顆粒質量不均一[2-3]。張慧等[4]利用HPLC建立了小柴胡顆粒中甘草、黃芩與柴胡3種藥材中7個成分的質量測定方法，通過包裝規格計算所測成分質量分數，發現不同廠家黃芩苷質量分數為10.821～32.305 mg/袋(2家未達到《中國藥典》2020年版標準)，而柴胡皂苷a質量分數變化差異約為10倍(0.135～1.130 mg/袋)，其他5個成分指標甘草苷、甘草酸銨、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素質量分數變化為2～6倍，以上結果表明，11個廠家生產的小柴胡顆粒成分含量波動范圍較大。沙啟營等[5]通過測定5個廠家25批小柴胡顆粒，發現不同廠家、同一廠家不同批次之間黃芩苷含量仍存在明顯差異，不同廠家黃芩苷含量高至3.51 mg·g-1，低至0.91 mg·g-1。陳文霞等[6]采用多波長指紋圖譜對不同廠家小柴胡顆粒制劑進行藥材-制劑譜峰匹配，結果顯示，制劑中甘草酸與黃芩苷含量相差較大，且制劑中未檢測到柴胡主要成分柴胡皂苷a與柴胡皂苷d、黨參藥材中蒼術內酯Ⅲ與黨參炔苷成分，推測這4種成分在制劑工藝流程中由于相互作用或提取工藝而使原型成分發生轉化。以上文獻表明，不同廠家小柴胡顆粒之間質量均一性較差，可能與生產工藝、生產原料不同密切相關，在提升小柴胡顆粒質量過程中，可引入質量源于設計理念(QbD)，優化生產工藝，實現產品質量穩定。

1.2 定性研究方法

《中國藥典》2020年版記載，柴胡薄層色譜鑒別法較為復雜，且耗時較長。賴克道等[7]利用水飽和正丁醇溶液對小柴胡顆粒水溶液進行萃取，簡化了小柴胡顆粒柴胡定性鑒別步驟，且易于基層操作。丁根英等[8]利用薄層色譜法建立了小柴胡顆粒中黨參與甘草的定性鑒別方法，彌補《中國藥典》2020年版中未建立黨參定性鑒別的缺失。另有研究對小柴胡顆粒中柴胡、黃芩、甘草的薄層鑒定方法進行優化。目前，小柴胡顆粒的定性鑒別方法中，姜半夏、生姜與大棗的定性方法仍未建立。

1.3 定量分析方法

近紅外光譜分析技術具有快速、無損、高效等優點，被廣泛應用于藥品中有效成分的快速評價分析。李勁等[9]發現，對比評價競爭自適應重加權法(CARS)篩選波長變量，可有效簡化近紅外校正模型的準確度和預測精度，提高近紅外法測定小柴胡顆粒中黃芩苷的準確度。

李春紅等[10]基于HPLC，建立了小柴胡顆粒中的黃芩成分黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素含量測定方法。王嘉林等[11]利用高效液相色譜儀聯合二級質譜(HPLC-MS/MS)的多離子反應監測模式(MRM)對小柴胡顆粒中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d建立了含量測定方法，該檢測方法較HPLC優勢在于，在MRM模式下可絕對定量，不受柴胡皂苷紫外吸收弱與色譜分離的影響，且該方法靈敏度較高，適用于目前小柴胡顆粒煎煮后柴胡皂苷a與柴胡皂苷d加熱發生轉化、含量降低的定量需求。邵艷等[12]利用水溶解小柴胡顆粒，隨即采用正丁醇對水提取液進行萃取，以HPLC建立小柴胡顆粒中柴胡皂苷a與柴胡皂苷d的含量測定方法。易潤青等[13]以5%氨水甲醇回流提取小柴胡顆粒，利用毛細管電泳法測定小柴胡顆粒中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量。有研究者利用HPLC建立了小柴胡顆粒中柴胡皂苷d的結構轉化成分柴胡皂苷b2的含量測定方法[14-15]。此外，鄭如文等[16]利用HPLC建立了小柴胡顆粒指紋圖譜方法，同時，對小柴胡顆粒共有峰進行歸屬，為小柴胡質量控制指標選擇提供參考。

綜上分析，對小柴胡顆粒的研究缺少關于姜半夏、生姜與大棗藥味的定性方法研究，且其主要藥味柴胡的定量測定方法較少，而不同廠家之間質量均一性較差，需在當前研究的基礎上，完善小柴胡顆粒國家質量控制標準，或形成小柴胡顆粒行業標準，保障小柴胡顆粒質量穩定性。

2 中日兩國小柴胡顆粒質量控制指標比較

日本漢方藥一直在國際上享譽盛名，在國際市場上占據中成藥大部分市場份額，其占據國際市場較早，對生產質量把控嚴格，值得借鑒。本文通過比較《中國藥典》2020年版與《日本藥局方》第十七更正版對小柴胡湯的質量控制標準，以及小柴胡湯組方單味藥質量控制差異，旨在借鑒日本對小柴胡顆粒質量控制方法，為提升國內小柴胡顆粒質量提供思路。通過比較發現，日本與中國小柴胡湯顆粒在組成上存在差異，日本小柴胡顆粒組方使用人參與半夏，中國組方中使用的為黨參與姜半夏，由于原料藥的差異，導致中日兩國小柴胡顆粒的定價存在較大差異。在質量控制方面，《日本藥局方》第十七更正版對小柴胡顆粒各組方藥均有控制，不僅建立了小柴胡顆粒中柴胡、黃芩、甘草中成分的含量測定方法，規定了2個藥物比例下[比例1：24 g(柴胡7 g)；比例2：23 g(柴胡6 g)]主要含量限度(柴胡皂苷b2：2～8 mg；黃芩苷：80～240 mg；甘草酸：17～51 mg)。同時，建立了組方中柴胡、生姜、黃芩、人參、甘草的薄層鑒定方法。日本對小柴胡復方中成分的含量限度要求值得國內借鑒，限度設定不僅可以控制小柴胡復方的均一性，同時也可以保障在最大服藥劑量下的安全性。國內小柴胡顆粒質量控制不足之處在于，僅對黃芩苷含量進行限定，未對主要藥味柴胡進行含量要求。通過對比日本與中國小柴胡顆粒組方各單味藥的質量控制指標發現，中國對小柴胡顆粒組方的各單味藥的質量控制要嚴于日本，如《中國藥典》2020年版中姜半夏與大棗均有薄層鑒定檢查，而《日本藥局方》第十七更正版中并未記載，所以中國在小柴胡顆粒精品化打造過程中，可發揮單味藥質量控制標準的優勢，針對復方中含量不易測定或測定方法繁瑣的藥味(姜半夏、大棗)建立相關定性鑒別方法，完善小柴胡顆粒的質量標準。

3 精品化研究策略

3.1 建立小柴胡顆粒全產業鏈質量追溯系統

穩健的質量保障體系是保證民眾用藥安全的基礎，中藥質量追溯體系自2009年開始建設，至2017年中國中藥協會成立專門的中藥追溯專業委員會，體系已日漸完善。中藥追溯體系中數據安全與信息互聯互通的關鍵問題在中藥材流通環節已得到初步解決[17]，盛實百草藥業有限公司、甘肅天士力中天藥業有限責任公司等在中藥材質量追溯體系建立上均取得了較好的成果，并成功應用于重點中藥的質量追溯。但目前，中成藥端質量追溯發展比較緩慢，中藥與中成藥之間信息互通完整性未成規模。李劍飛等[18]研發建立了中藥全產業鏈質量追溯系統，該系統覆蓋了基地種植、藥材生長和采收、飲片加工炮制、中成藥生產4個環節，可為上市經典名方全產業鏈質量追溯提供借鑒。小柴胡顆粒組方中涉及的多基原品種有柴胡、甘草、黨參，炮制品種為姜半夏。目前，柴胡存在種源混亂的問題，而姜半夏涉及到毒性飲片的炮制，故建立小柴胡顆粒全產業鏈質量追溯系統，有助于控制小柴胡顆粒質量。在建立小柴胡顆粒全產業鏈質量追溯系統過程中，需要相關中成藥生產企業與具有質量追溯體系的中藥企業積極合作，建立中藥種質-中藥材-中藥飲片-中成藥全產業鏈質量追溯系統，實現小柴胡顆粒從中藥種植至消費各個環節的呈現與追溯，推動上市經典名方的現代化和國際化，提升小柴胡顆粒的國際影響力，打造上市名方精品化品牌。

3.2 QbD理念優化生產工藝與智能制造

QbD理念最早由Joseph Moses Juran提出，美國食品藥品監督管理局(FDA)于2001年引入該理念，用于藥品質量管理。QbD在國際人用藥品注冊技術協調會(ICH)發布的藥物研發(Q8)中被定義為，在可靠的科學和質量風險管理基礎上，預先定義好目標，強調對產品與工藝的理解與工藝控制的系統研發方法。與傳統的單因素質量考察不同的是，QbD基于風險評估，控制向上游轉移策略，實現系統的多變量實驗。目前，QbD理念已成功應用于中藥復方工藝研究與名醫名方開發等。楊麗等[19]基于QbD理念，以關鍵工藝參數與關鍵質量屬性作為控制節點，利用Box-Behnken設計完成了美顏舒氣方提取工藝與顆粒成型工藝優化。張俊鴻等[20]利用該理念，采用風險評估與Plackeet-Burmann設計確定風咳顆粒噴霧干燥進料速度與霧化壓力為關鍵工藝參數，以上均可為小柴胡顆粒工藝優化提供借鑒。《中醫藥發展戰略規劃綱要(2016—2030年)》中提出：加快推進智能制造，注重信息化、智能化與工業化的融合。運用QbD理念優化小柴胡生產工藝設計空間，可促進小柴胡顆粒智能化生產。

在小柴胡顆粒生產工藝中，提取工藝分為2部分，柴胡、黃芩、甘草、黨參、大棗的水提部分與姜半夏、生姜的醇提部分，水提部分和醇提部分分別濃縮至一定濃度后，合并濃縮液，加入輔料，制成顆粒。在整個生產工藝中，各個環節連續性較差，且自動化程度不高，生產工藝上仍存在較大的提升空間。在打造小柴胡精品顆粒過程中，可分別選取水提部分與醇提部分的成分指標作為含量控制指標，采用QbD理念，對整個生產工藝的關鍵參數進行優化，提高生產環節連續性與可控性，從而生產出優質、穩定的小柴胡顆粒，并為小柴胡顆粒進一步的智能制造夯實基礎。

3.3 臨床定位評價與不良反應監測系統

采用文獻計量分析法分析近5年小柴胡湯的文獻研究，發現內科疾病研究分布最多，文獻占5年臨床研究文獻的81.19%，其中消化系統疾病與呼吸系統疾病文獻研究分別占40.09%與28.51%[21]。小柴胡系列方劑臨床適應證較廣泛，被用于癌性發熱[22]、外感發熱[23-24]、消化性潰瘍[25-26]等疾病治療，具有較好的臨床療效。而目前的臨床研究并未突出小柴胡顆粒的診療特色，其臨床定位較廣，不利于小柴胡顆粒精準化使用。在此次抗擊新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)過程中，小柴胡湯治療早期COVID-19取得較好臨床療效。精品化發展小柴胡顆粒過程中，應結合古代醫案與現代臨床經驗，開展具有小柴胡湯中醫臨床特色的研究，突出小柴胡顆粒的臨床診療特色。

同時，應建立小柴胡顆粒不良反應監測系統，完善小柴胡顆粒說明書中適應證與禁忌證。小柴胡顆粒在19世紀末被日本廣泛用于慢性肝炎的治療，由于當時并未記載禁忌證，導致間質性肺炎患者服用小柴胡顆粒致死案例[27]。日本“小柴胡湯事件”警示我們，小柴胡顆粒在長期服用或禁忌證不清時，容易對身體造成不良反應。而國內數據顯示，2018年，小柴胡顆粒零售銷量超過5億人民幣，是典型的大品種中成藥，其不良反應有潛在的安全性問題。小柴胡顆粒是非處方藥(OTC)，消費者可自行購買，由于消費者缺乏全面的醫學知識，小柴胡顆粒在零售端通常被作為感冒藥進行使用，容易造成誤用。如國內曾報道患者感冒后，自行服用小柴胡顆粒后出現皮膚水腫、全身皮膚散在紅色斑丘疹伴瘙癢癥狀的案例[28]。故建立小柴胡顆粒不良反應監測系統，完善小柴胡顆粒說明書中適應證與不良反應癥狀，同時制定小柴胡顆粒的禁忌證，是保障民眾用藥安全的必要舉措。

3.4 基于整合藥理學策略揭示小柴胡顆粒作用機制

整合藥理學是解決中藥方劑多成分與臨床作用之間交互作用的新策略，可用于闡釋中藥方劑復雜體系下的作用機制，其主要通過“化學指紋-代謝指紋-分子生物網絡-藥理效應”多維度研究模式[29]，闡釋其復雜作用機制。元胡止痛方作為整合藥理學策略應用成功的經典案例，不僅闡釋了其止痛作用機制，同時，在此過程中發現了其新的臨床定位：抗抑郁[30]，并發布了中成藥第一個優質質量標準[31]，為中成藥二次開發提供了良好借鑒。目前，整合藥理學已被用于經典藥對、中藥復方及中藥理論的機制研究，如柴胡-黃芩藥對抗抑郁的分子機制[32]、生脈飲治療心律失常的作用機制[33]、越鞠丸“異病同治”的內涵闡釋[34]。運用整合藥理學策略，建立小柴胡顆粒作用機制網絡，通過關聯小柴胡顆粒化學成分(內)與臨床作用(外)，以系統生物學為橋梁，構建小柴胡顆粒臨床應用與化學成分網絡，闡釋小柴胡顆粒作用機制，發現小柴胡顆粒的質量標志物，為制定合理的小柴胡顆粒質量標準提供參考。

4 結語

本文通過回顧小柴胡顆粒質量研究進展發現，小柴胡顆粒質量控制指標多集中在易測指標，如黃芩苷、甘草苷等，柴胡中柴胡皂苷類成分含量測定方法研究較少，不同廠家生產小柴胡顆粒質量均一性較差。而日本對小柴胡顆粒的多指標質量控制值得國內借鑒與學習。

目前，中國已實施藥材來源追溯制度，與日本、韓國相比，中國的優勢在于具備完整的中成藥產業鏈，故本文提出的小柴胡顆粒精品化研究策略，從產業鏈追溯、智能制造、臨床定位、作用機制4個方面進行探討，旨在實現小柴胡顆粒全產業質量追溯、智能化生產，提升小柴胡顆粒產品質量，推進小柴胡顆粒從質量“合格”至“高品質”轉化，開拓小柴胡顆粒的國際市場，同時，為其他經典名方開發提供示范。