動物血清膠凍樣的成因與消除方法探討

動物血清是血液凝固后析出的淡黃色透明液體。血清是不含纖維蛋白原的膠狀液體，具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要包括水、白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白、甘油三酯、總膽固醇、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮、肌酐、葡萄糖、多肽、脂肪、生長因子、激素、無機物等物質(zhì)組成。

動物血清廣泛應(yīng)用于各種血清學(xué)檢測，如動物疫病監(jiān)測中的動物疫病診斷、重大動物疫病強制免疫效果評價。寵物醫(yī)院對寵物進行血液的生化成分、酶、抗體、病原等項目檢測，大都以寵物血清為樣品，通過檢測寵物血清中的各種化學(xué)成分，可以判斷各器官衰竭、血液病變的嚴(yán)重程度，進而采取相應(yīng)的治療措施。

但在實驗室制備血清的過程中，因采血時機不當(dāng)、疾病感染或飼養(yǎng)失調(diào)、采血器材使用處置不妥等因素，制備的血清可能出現(xiàn)膠凍樣狀況，或完全凝結(jié)無血清析出，以及溶血、血脂、黃疸等異常現(xiàn)象，這對血清學(xué)試驗及血清成分檢測造成嚴(yán)重影響或失敗。因此，確保血清質(zhì)量是血清學(xué)檢測成立的基礎(chǔ)條件，分析探討血清膠凍樣產(chǎn)生原因及消除方法，具有十分重要的臨床意義。

1 原因分析

1.1采血時機不當(dāng) 動物進食后，各器官功能開始運作，血中各種成分含量處于不穩(wěn)定狀態(tài)，采血后易發(fā)生血清膠凍樣。

1.2病原感染或飼養(yǎng)不當(dāng) 某些病原感染或經(jīng)常飼喂高蛋白質(zhì)高脂肪飼料，造成動物營養(yǎng)過剩、高血脂。血清中纖維蛋白和脂肪析出過多，血清呈乳白色膠凍樣。

1.3采血器材使用不妥 使用抗凝血管采血，不利于血液凝固；一次性真空采血器采血后活塞沒拉開一定空間，血清不易析出；使用一次性注射器采血后沒有取下針頭快速注入離心管，引起溶血或血清混濁；采血后放置時間過短，血液中纖維蛋白沒有完全析出、分層，過早離心。

1.4其他因素 采血后放置的環(huán)境溫度過低，如10 ℃左右，血清析出較差。因采血部位不同，有可能出現(xiàn)血清膠凍樣或混濁。

2 消除方法

2.1選擇適宜的采血時間 通常選擇在早上或午后采血，動物空腹或禁食數(shù)小時后進行采血。

2.2加強免疫和科學(xué)飼養(yǎng) 制定各種動物的免疫程序進行免疫接種，確保動物健康成長。定制科學(xué)的飼喂方案，采用全價配合飼料，避免品種單一，避免動物過于肥胖。

2.3采血操作規(guī)范化 一次性真空采血器采血后，要把采血器活塞往后拉至最大刻度，蓋上針頭帽，針頭朝上自然傾斜放置在燒杯內(nèi)，留出空間使血清自然析出；采取的全血都應(yīng)避免陽光直射，在室溫下靜置2 h以上，待血清自然析出。若血清析出良好，可直接將血清轉(zhuǎn)入離心管，按實驗室規(guī)定程序編號檢測。若血清析出較差，可放入37 ℃恒溫箱或25～37 ℃水浴1 h進行預(yù)處理，再用離心機1500～2000 rpm作3～5 min離心。

2.4其他措施 如血清完全呈膠凍樣，可用一次性針頭小心地將膠凍樣物質(zhì)取出，再離心或靜置，即可分離出血清。寵物如某一采血部位分離的血清呈膠凍樣或混濁，可換肢采血，可分離到合適的血清，或吃兩周減肥處方糧再采血化驗。

3 體會

采集制備的血清還常出現(xiàn)溶血、黃疸、血脂等異常現(xiàn)象，應(yīng)盡量避免人為因素的影響，注意以下幾個方面。

3.1避免溶血 使用一次性注射器采血后，取下針頭將全血沿一次性離心管管壁緩慢轉(zhuǎn)注，蓋緊離心管管蓋，避免紅細(xì)胞擠壓破裂出現(xiàn)溶血。采血后使用血液樣品專用運輸箱運送全血樣品，輕拿輕放，靜置運送，避免劇烈震蕩而溶血。

3.2注意溫濕度 分離血清時，實驗室溫度應(yīng)控制在21～25 ℃，相對濕度30%～70%。環(huán)境溫度在25 ℃以上時，采集的血樣2 h以內(nèi)可以自然析出血清，但在10 ℃左右時，血清很難自然析出，需放置在 37 ℃培養(yǎng)箱中1～2 h，才能析出血清。但血清不宜置于37 ℃太久，易出現(xiàn)渾濁或沉淀，影響血清質(zhì)量。血清在4 ℃冷藏， 時間最多不能超過1個月。若長

時間保存則應(yīng)在-20 ℃冷凍保存，切忌反復(fù)凍融。血清由室溫轉(zhuǎn)入-20 ℃冷凍保存或由-20 ℃冷凍保存狀態(tài)轉(zhuǎn)入室溫時未經(jīng)過冷藏并經(jīng)搖勻處理，易出現(xiàn)沉淀。

3.3病原污染 當(dāng)血清被細(xì)菌污染嚴(yán)重，可變成黃色渾濁。采集到全血后，應(yīng)在6 h內(nèi)送到實驗室，分離到血清后應(yīng)盡量在0.5 h內(nèi)操作完成檢測。

3.4采血量 大中動物全血不少于5 mL，寵物不少于1 mL。為確保足夠的血清量，大中動物析出的血清量應(yīng)不少于1 mL，禽類及寵物不少于0.5～1 mL。如采血量過少、采血時出血不連續(xù)、采用抗凝管儲血則易出現(xiàn)血清量不足或膠凍樣。