新型鵝星狀病毒致雛鵝痛風及其綜合防控

◆作者：侯展鵬 高智均 江丹莉 潘建秋 黃運茂 付新亮

◆單位：1.仲愷農業工程學院動物科技學院；2.廣東省水禽健康養殖重點實驗室

雛鵝痛風是由新型鵝星狀病毒（Goose Avastrovirus,GoAstV）引起的一種以雛鵝的心包、腎臟、肝臟等內臟及關節出現大量尿酸沉積為主要特征的急性傳染性疾病。該病主要發生于5～20日齡雛鵝，感染的雛鵝精神沉郁、食欲減退、消瘦、四肢癱瘓等，嚴重者死亡，死亡率高達30%。研究表明，在不同品種、不同飼養方式的種鵝群中均有發生。由于該病的致病機制尚不明確，導致AstV在鵝群中迅速傳播，給水禽養殖業帶來了嚴重的損失。目前對于鵝新型痛風并無有效的治療方案，為此應加強生物安全和綜合防控措施，以保障我國養鵝業的健康可持續發展。

1 病原學

星 狀 病 毒（Avastrovirus，AstV）屬于星狀病毒科星狀病毒屬，為單股正鏈RNA病毒，直徑約為28-30nm。該病毒粒子無囊膜結構，核衣殼呈二十面體球形對稱結構，在電鏡觀察到該病毒呈五角或六角星狀，因此命名為星狀病毒。該病毒基因組具有三個開放閱讀框(ORF1a、ORF1b和orf2b)，5'和3'的非編碼區以及poly-A組成。在ORF 1a和ORF 1b(AAAAAC)的重疊區都有保守的滑序列，在ORF 1a和ORF 1b指導ORF 1ab融合蛋白的合成，間隔區存在于絕大多數鳥類星狀病毒的開放閱讀框1b的終止密碼子和開放閱讀框2的起始密碼子之間，而重疊在少數的開放閱讀框中ORF 1a和ORF 1b編碼非結構蛋白，其對基因組復制有反應，ORF2編碼病毒體形成所需的病毒衣殼蛋白。根據星狀病毒感染動物類型的不同可劃分為：哺乳類星狀病毒（Mamastrovirus，MAstV）和禽星狀病毒（Avastroviruses，AAstV）兩個屬，其中AAstV，由33個不同的病毒基因型所構成；MAstV包含7種基因型。禽星狀病毒的宿主包括：火雞、雞、鴨、鴿等鳥類，主要引起的胃腸道疾病，并導致雞、鴿腎炎以及鴨病毒性肝炎的發生。GoAstV與其他種屬星狀病毒同源性均小于70%，遺傳距離較遠，根據基因組序列的差異，可能存在的致病性有顯著差異。由于星狀病毒在自然環境下非常穩定，對酚類、季銨鹽類等大多數常用消毒藥物不敏感，對熱和酸等條件比較耐受，但能被0.3 %甲醛、0.1 %的β-丙內酯、90 %甲醇等消毒劑徹底滅活。

2 流行病學

GoAstV具有廣泛的組織噬性，病死雛鵝的腎臟、心臟、大腦、肝臟等均可分離出病毒。其傳播途徑主要是經過消化道感染，即糞-口途徑傳播，其中被星狀病毒污染的水源、食物均可成為傳染源，為其他物種的潛在感染和病毒的跨宿主傳播提供有利條件。雛鵝痛風的發生無明顯季節性，由于空氣溫度、濕度偏高，同時雛鵝抵抗力低下，飼養環境差、飼養管理不當等，給病毒的傳播提供了非常有利的條件。但雛鵝痛風在其他月份某些地區均能繼續流行，表明GoAstV還存在其他傳播方式，通過大量研究數據表明，AstV除了通過糞-口途徑傳播以外，還可以通過直接接觸傳播和間接接觸傳播。

3 臨床癥狀與病理變化

3.1 臨床癥狀

雛鵝感染GoAstV后，病雛會出現精神不振、羽毛松亂，行動遲緩、食欲相對正常，消瘦、排灰白色水樣糞便，并污染肛門附近的羽毛，發病后期食欲減退漸至廢絕，關節腫脹、跛行、臥地不起、不愿走動，部分病鵝會出現單腳站立或呈現蹲姿，喙部尿酸鹽沉積、蹼蒼白最終衰竭死亡,病程大概持續3-7d。

3.2 病理變化

GoAstV具有廣泛組織嗜性，導致機體可引起病雛體內多組織器官病變，剖檢可見心臟和肝臟表面被大量白色的尿酸鹽滲出物所覆蓋，肝臟腫大、淤血，心包、氣囊上有豆腐渣樣尿酸鹽沉著，腎臟腫大，色澤變淡，在表面沉積白色斑點狀尿酸鹽；輸尿管集聚過多的尿酸鹽而發生阻塞，明顯腫脹變粗。部分病死鵝脾臟、肝臟、腎臟、腸系膜等表面覆蓋一層白色薄膜；頸部皮下、腿部肌肉及腿部關節腔中出現點狀或者片狀尿酸鹽沉積。

4 診斷

根據病因、病史、特征性癥狀和剖檢變化可作出初步診斷為雛鵝痛風，雛鵝痛風雖然難以根據流行病學，臨床癥狀、病理變化確定其病因，但引起雛鵝痛風的因素大多是飼養管理條件差，鈣磷比例失衡，維生素A缺乏、病毒感染、寄生蟲感染。若需確定雛鵝痛風的病因，還需要通過實驗室進行進一步的診斷，目前實驗室的診斷方法包括電鏡法、病毒分離鑒定和血清學試驗、分子生物學診斷等。

4.1 電鏡法

電鏡法是最原始用于檢測星狀病毒的方法，通過電鏡直接觀察病毒的形態結構和病毒大小的特點進行直接判斷，若從樣品中觀察到呈五角或六角的星狀帶纖突、直徑約為29 nm的病毒顆粒，基本可以確定為星狀病毒（AAstV），此方法較為直觀，但靈敏度與特異性不強。

4.2 病毒分離鑒定

采集患病病鵝肝、腎、脾等內臟器官進行PBS進行勻漿處理，接種到9～13日齡鵝胚的尿囊腔或卵黃囊中，一般傳代培養到第三代時，鵝胚出現死亡，可見死亡鵝出現胚尿囊膜增厚，胚體出血明顯的現象。組織病理學檢查可見腎臟上皮細胞出現變圓、聚團、脫落等明顯的病變。

4.3 血清學檢測法

由于目前尚無GoAstV的疫苗應用，若血清中檢測出GoAstV的抗體，則一定存在GoAstV的感染。酶聯免疫吸附試驗（ELISA）與血清中和實驗（NT）是檢測星狀病毒最常用的血清學檢測方法，其中ELISA具有快速、簡便、特異性強的特點。Zhao等建立了一套用于檢測鴨星狀病毒血清抗體的間接ELISA檢測技術，如今已有市面上已有檢測禽星狀病毒的ELISA試劑盒，為快速診斷禽星狀病毒提供了更為便捷的方式。

4.4 分子生物學方法

邱思語等，建立了GoAstV的qPCR檢測方法，SYBR Green I實時熒光定量PCR與普通PCR相比，SYBR Green I實時熒光定量PCR具有靈敏度高、特異性強的特點，其靈敏度是普通PCR的100倍，且該檢測方法對鵝其他病毒性疾病的病原如副粘病毒、細小病毒檢測均無反應，是檢測GoAstV的有效手段。

5 疫苗研究進展

目前，市面上尚無可以有效預防GoAstV的疫苗，且常規抗菌、抗病治療方法無明顯效果，由于GoAstV不容易培養，成本相對較高以及病毒毒價不高，導致GoAstV疫苗產品質量高低不一；根據奚雨萌等，研究表明，對患有GoAstV的病雛及時接種相應抗體以及使用抗生素可以有效的防控態勢，減少經濟損失；張清水，將GoAstV通過連續傳代培養后，成功選育出弱毒株，免疫接種實驗結果表明，免疫后的雛鵝產生較高的抗體水平，且保護率為100%。Xu等，構建了以新城疫病毒為載體表達GoAstV Cap蛋白的載體疫苗，該疫苗能較好的表達GoAstV Cap蛋白，在其免疫攻毒保護試驗結果表明，該疫苗對易感雛鵝可產生有效的免疫保護，這為后續疫苗的研發提供了新的思路。

6 綜合防控措施

6.1 強化生物安全，切斷傳播途經

由于該病暫無疫苗和特效藥物進行治療，防控GoAstV主要依靠及早發現、及早撲滅，堅持以預防為主的措施。各養殖場應采取封閉式的管理模式，加強完善防疫流程，實施全進全出制度。由于GoAstV主要通過消化道、生殖道進行傳播，因此我們應保證飼養環境干凈衛生，定期消毒及時對糞便進行清理，同時加強精細化管理，養鵝場需要定期通風換氣加速空氣流動，防止氨氣、硫化氫等有害氣體累積，降低雛鵝抵抗力，導致GoAstV容易通過呼吸道進行傳播。鵝場進出道口要有消毒設施，對進出的外來車輛必須進行消毒，對外來人員需進行消毒隔離方可進入養殖場，避免外界的病原體進入養殖場，從源頭上切斷傳染源。

6.2 提高雛鵝抗病能力

根據鵝生長各階段營養需求合理調整飼料搭配，確保飼料營養全面，為防止雛鵝痛風的發生，不隨意提高飼料中蛋白質和鈣的含量，確保雛鵝能及時排出尿酸等蛋白代謝產物，避免其在體內的積累，控制好礦物質和維生素水平，同時確保飲用水充足、不飼喂霉變飼料，盡可能增加青綠飼料在飼喂料中的占比；合理的飼養密度，保證雛鵝有一定的活動空間，合理加強雛鵝運動，保證雛鵝每天有充足的運動量，以增強雛鵝體質，提高雛鵝對疾病的抵抗力；這些措施可以有效降低營養代謝型痛風降低營養代謝型痛風的發。

6.3 制定隔離措施，降低疾病傳播風險

若發現疑似病例，及時進行嚴格消毒隔離，防止該病向外傳播擴散，并限制人員的進出鵝舍，對鵝場的墻壁、地面、料線、水線等設備設施進行消毒，所有的垃圾和糞便都應無害化處理，做到從根源上切斷傳播途經，并對發病雛鵝采取對癥治療的方案，在飼料和水中添加小蘇打和電解多維，進一步加速體內尿酸鹽的代謝和排出，同時可使用保肝護腎的藥物進行調理。