蜂蜜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)前處理和分析方法研究進(jìn)展

吳升德 谷群遠(yuǎn) 沈校校 王仁德 劉鋒 張學(xué)軍

（鹽城市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，鹽城 224056）

蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，與自身分泌物混合后，經(jīng)充分釀造而成的天然甜物質(zhì)。蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露應(yīng)安全無毒，不得來源于雷公藤、博落回、狼毒等有毒蜜源植物[1]。蜜蜂在傳播花粉、采集花蜜和花粉的過程中，不可避免的會(huì)接觸到空氣、水、作物上殘存的農(nóng)藥，而且蜂農(nóng)為了防治蜜蜂的病蟲害，生產(chǎn)中經(jīng)常使用殺螨劑，如氟胺氰菊酯、氟氯苯氰菊酯等，造成農(nóng)藥在蜂產(chǎn)品中的殘留。人們長(zhǎng)期食用含有農(nóng)藥殘留的蜂蜜，會(huì)不利于身體健康。我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的《蜂蜜中農(nóng)藥殘留限量（一）》（NY/T 1243-2006）標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，蜂蜜中的氟胺氰菊酯、氟氯苯氰菊酯最大殘留限量分別為50 μg/kg、10 μg/kg[2]。目前，我國(guó)現(xiàn)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)涉及蜂蜜中農(nóng)藥殘留限量指標(biāo)僅有 10項(xiàng)，已不符合市場(chǎng)需求，不利于蜂蜜產(chǎn)品的質(zhì)量控制[3]。因此，應(yīng)建立完善蜂蜜中農(nóng)藥殘留限量和分析方法標(biāo)準(zhǔn)，確保蜂產(chǎn)品的質(zhì)量安全，保障人們身體健康。

蜂蜜基質(zhì)復(fù)雜，主要成分是葡萄糖、果糖、蔗糖和水分，占90% 左右，除此之外，還含有蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)、維生素和多酚類物質(zhì)等，這使得蜂蜜中農(nóng)藥殘留提取凈化的前處理方法以及檢測(cè)分析方法的選擇尤為重要。本文概述了近年來蜂蜜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的前處理技術(shù)和分析方法的應(yīng)用情況，為我國(guó)蜂蜜產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的常規(guī)監(jiān)管和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供依據(jù)。

1 蜂蜜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)前處理方法

近年來，蜂蜜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的前處理方法中，應(yīng)用比較多的主要有液液萃取法、固相萃取法和QuEChERS 法等。

1.1 液液萃取法

液液萃取法是利用組分在不同溶劑中的溶解度差異而達(dá)到分離或提取目的。方英立等[4]采用鹽析輔助液液萃取法，將蜂蜜用4%的硫酸鈉溶液稀釋，用乙酸乙酯萃取，測(cè)定蜂蜜中六六六和滴滴涕的殘留。為提取測(cè)定蜂蜜中的雙甲脒、氟胺氰菊酯等農(nóng)藥，張晶等[5]使用調(diào)節(jié)pH 值液液萃取法，操作步驟為取4g 蜂蜜，加入pH<10 的氫氧化鈉溶液，旋渦混勻，加入正己烷振蕩，離心后取上清液檢測(cè)。液液萃取法優(yōu)點(diǎn)是容易操作，分離效率和經(jīng)濟(jì)性高；缺點(diǎn)是萃取過程中容易產(chǎn)生乳化，使得分析結(jié)果穩(wěn)定性差，需要大量有機(jī)溶劑，容易造成環(huán)境污染。

1.2 固相萃取法

固相萃取法原理是利用固體吸附劑將目標(biāo)化合物吸附，后用洗脫液洗脫，達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。林國(guó)斌等[6]使用Florisil 和Oasis 萃取柱，凈化測(cè)定蜂蜜中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留，加標(biāo)回收率為77.3%～103.0%。朱之烔等[7]采用全自動(dòng)固相萃取法，蜂蜜樣品經(jīng)親水親脂平衡HLB 固相萃取柱凈化，建立了同時(shí)測(cè)定蜂蜜中9 種苯并咪唑類和新煙堿類農(nóng)藥的檢測(cè)方法，平均回收率為78.2%～101.2%。Nazia Rafique 等[8]采用改良的固相萃取法，在26.9%的巴基斯坦蜂蜜被測(cè)樣品中檢測(cè)出敵敵畏、甲硫磷等9 種農(nóng)藥殘留，含量在3～48.8μg/kg 之間。陳興連等[9]采用固相萃取法提取測(cè)定蜂蜜中六六六、滴滴涕殘留量，方法選用Florisil 柱中加入乙二胺-N-丙基硅烷為凈化材料，平均回收率在70.2%～97.4%之間。固相萃取法有操作簡(jiǎn)便、使用溶劑少、凈化效果好和環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)，但需專門的固相萃取裝置并選好相應(yīng)的凈化填料。

1.3 QuEChERS法

QuEChERS（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）法是利用吸附劑填料與基質(zhì)中的雜質(zhì)相互作用，吸附雜質(zhì)從而達(dá)到快速提取和凈化目標(biāo)組分的方法。Ana Paula Ferreirade Souza 等[10]采用QuEChERS 法結(jié)合Plackett Burma 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化樣品前處理，通過檢測(cè)發(fā)現(xiàn)51 個(gè)巴西蜂蜜樣品中37.3%都有農(nóng)藥殘留，其中吡蟲啉、噻蟲胺和樂果是最常見的。苗瓊晨等[11]使用QuEChERS 法檢測(cè)蜂蜜中的15 種三唑類農(nóng)藥及15 種抗生素，回收率在71.1%～116%之間。王思威等[12]采用改進(jìn)的QuEChERS 法檢測(cè)荔枝花粉和花蜜中吡唑醚菌酯及其主要代謝物BF 500-3，在花粉和花蜜基質(zhì)中的平均回收率為87.0%～97.8%。李燕妹[13]使用QuEChERS 法檢測(cè)蜂蜜中敵敵畏、甲霜靈等15 種農(nóng)藥殘留，其平均回收率為94.8%～111%。QuEChERS 法具有簡(jiǎn)單便捷，分析速度快，適用范圍廣，回收率、精確度、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)，是近年來常用的一種用于農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)的快速樣品前處理技術(shù)。

2 蜂蜜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)分析方法

2.1 光譜法

為實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)，近年來嘗試將光譜法應(yīng)用于蜂蜜中農(nóng)藥殘留的分析。葛學(xué)峰等[14]通過研究腐霉利-蜂蜜混合體系的穩(wěn)態(tài)熒光光譜，發(fā)現(xiàn)蜂蜜溶液中腐霉利的含量與對(duì)應(yīng)的熒光強(qiáng)度有良好的線性關(guān)系，從而建立了快速檢測(cè)蜂蜜中腐霉利殘留的分析方法。孫旭東等[15]采用表面增強(qiáng)拉曼光譜分析蜂蜜中的樂果殘留，通過確定蜂蜜中樂果對(duì)應(yīng)的四個(gè)特征拉曼位移峰，建立線性回歸模型，實(shí)現(xiàn)了蜂蜜中樂果殘留的快速檢測(cè)，方法的檢測(cè)限為2 mg/kg。由于光譜法不需要復(fù)雜的前處理工序，具有快速高效的特點(diǎn)，為快速分析蜂蜜中的農(nóng)藥殘留提供了新的思路。

2.2 色譜法

色譜法的本質(zhì)是利用混合物在固定相和流動(dòng)相之間分配比例的差異，對(duì)混合物進(jìn)行分離和分析的方法，目前已廣泛應(yīng)用到很多領(lǐng)域中?！妒称钒踩珖?guó)家標(biāo)準(zhǔn) 蜂蜜中5 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 氣相色譜法》（GB 23200.97-2016）規(guī)定采用氣相色譜法檢測(cè)蜂蜜中敵百蟲、皮蠅磷、毒死蜱、馬拉硫磷、蠅毒磷5 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量[16]。李歡歡等[17]采用氣相色譜法測(cè)定蜂蜜中8 種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，方法采用RTX-1 毛細(xì)管柱為分離柱，ECD 檢測(cè)器，檢出限為0.14～0.45ng/ml。周碧青等[18]采用氣相色譜法測(cè)定蜂蜜中8 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，方法采用Rtx-1701毛細(xì)管柱為分離柱，F(xiàn)PD 檢測(cè)器，8 種有機(jī)磷農(nóng)藥在3 個(gè)不同加標(biāo)水平的方法回收率為85%～110%。于玲[19]采用超聲輔助分散液液微萃取結(jié)合高效液相色譜法測(cè)定蜂蜜中的溴氰菊酯，檢出限為8 μg/kg。

2.3 色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

隨著科技進(jìn)步，聯(lián)用技術(shù)通過結(jié)合各種儀器分析方法的優(yōu)點(diǎn)，提高了對(duì)農(nóng)藥殘留的定性定量效率。例如：GC-MS、GC-MS/MS、HPLC-MS/MS 等。樊艷等[20]采用GC-MS/MS 聯(lián)用快速檢測(cè)蜂蜜中敵敵畏、氧樂果等20 種農(nóng)藥殘留，檢出限為0.003～0.082μg/kg。汪建妹等[21]采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)測(cè)定蜂蜜中39 種抗生素及25 種農(nóng)藥殘留，通過多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，農(nóng)獸藥的檢出限為0.02～3.8μg/kg。何麗君等[22]采用超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜法分析21種三嗪類殺蟲劑農(nóng)藥殘留量，檢測(cè)限為 1～10μg/kg?！妒称钒踩珖?guó)家標(biāo)準(zhǔn) 蜂蜜、果汁和果酒中497 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法》（GB 23200.7-2016）規(guī)定了采用氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定蜂蜜中497 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量[23]?！斗涿壑?86 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（GB/T 20771-2008）標(biāo)準(zhǔn)適用于洋槐蜜、油菜蜜、椴樹蜜、蕎麥蜜、棗花蜜中486 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留的定性鑒別和461 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的定量測(cè)定[24]。

3 總結(jié)與展望

民以食為天，食以安為先。農(nóng)藥殘留是蜂蜜產(chǎn)業(yè)發(fā)展面臨的一項(xiàng)重要安全問題。進(jìn)一步研究蜂蜜中農(nóng)藥殘留的前處理和檢測(cè)分析方法，開發(fā)新的更為簡(jiǎn)便快捷、準(zhǔn)確度高、環(huán)境友好的分析方法，對(duì)于有關(guān)部門加強(qiáng)蜂產(chǎn)品行業(yè)的監(jiān)管，促進(jìn)蜂產(chǎn)品相關(guān)企業(yè)的發(fā)展，保證消費(fèi)者的身體健康具有重大意義。