吐魯番錦雞兒地上部分化學成分的研究

賈月梅， 李雪征， 賈新岳， 獨孤佳秀， 石明輝， 賈曉光*， 潘 蘭*

(1.新疆維吾爾自治區市場監督審核評價中心，新疆 烏魯木齊 830002；2.延邊大學附屬醫院藥學部，吉林 延吉 133000；3.新疆維吾爾自治區中藥民族藥研究所，新疆 烏魯木齊 830002)

吐魯番錦雞兒Caraganaturfanensis(Krassn.) Kom.為豆科錦雞兒屬植物，分布于新疆伊犁地區、塔里木盆地、吐魯番盆地，生于海拔2 100 m的山坡、河流階地、峭壁[1]。《藥用植物辭典》記載，吐魯番錦雞兒以根入藥，具有活血、利尿、止痛、強壯的功效[2]，地上部分的資源多作為柴火利用。為了對吐魯番錦雞兒資源進行充分開發利用，課題組前期對其地上部分的研究發現，乙醇提取物對A549(人類肺腺癌細胞)及HeLa(人類宮頸癌細胞)均有顯著的抑制作用，并從中分離鑒定出5個黃酮和1個甾體[3]。本研究在前期工作的基礎上，繼續對吐魯番錦雞兒地上部分乙酸乙酯、正丁醇部位的化學成分進行研究，從中共分離鑒定出17個化合物，其中化合物3、10為首次從該屬植物中得到，4、6～9、13、16為首次從該植物中發現。

1 材料

AV-300、AV-400核磁共振儀(德國Bruker公司)；SYNAPT G2-S型高分辨率質譜儀(美國Waters公司)；ZF-20C暗箱式紫外分析儀(上海寶山顧村電光儀器廠)；FL-LC050高效液相色譜儀(天津Bonna-Agela公司)；GF254薄層層析硅膠、柱層析硅膠(200～300、300～400目，青島海洋化工廠)；ODS填料(50 μm，日本YMC公司)；ODS制備型色譜柱(5 μm，日本YMC公司)。甲醇、石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷試劑均為分析純。

吐魯番錦雞兒采于新疆克爾克孜州烏恰縣，經新疆維吾爾自治區中藥民族藥研究所王果平研究員鑒定為吐魯番錦雞兒Caraganaturfanensis(Krassn.) Kom.的地上部分，憑證標本均存放于新疆維吾爾自治區中藥民族藥研究所。

2 提取與分離

取吐魯番錦雞兒地上部分10 kg，粉碎，干燥，用8倍量95%乙醇溶液回流提取3次(2 h/次)，減壓回收溶劑得乙醇浸膏950 g，用水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液減壓回收，得石油醚萃取物(47 g)、乙酸乙酯萃取物(144 g)、正丁醇萃取物(200 g)。

取乙酸乙酯萃取物40 g，經二氯甲烷-甲醇(100∶0～0∶100)梯度洗脫，TLC檢識合并相同組分，得10個餾分。Fr.3(1.5 g)選取硅膠柱分離，經石油醚-乙酸乙酯(30∶1～10∶1)梯度洗脫，得Fr.4-9析出方晶，反復重結晶得化合物11。Fr.4(5.0 g)經硅膠柱分離，用二氯甲烷-甲醇(70∶1～10∶1)梯度洗脫，TLC合并得5個餾分Fr.4A～Fr.4E，Fr.4A(200 mg)經反復硅膠柱分離得化合物12(13 mg)；Fr.4B(1.3 g)經硅膠柱分離，用二氯甲烷-甲醇(100∶1～50∶1)梯度洗脫，TLC合并得4個餾分Fr.4B1～Fr.4B4，Fr.4B2(270 mg)采用半制備HPLC甲醇-水(55∶45)分離，得化合物13(13 mg)、15(10 mg)。Fr.5(6.5 g)采用ODS柱層析分離，經30%甲醇～甲醇洗脫，合并得到6個餾分Fr.5A～Fr.4F，Fr.5C(1.6 g)采用半制備HPLC甲醇-水(50∶50)分離得化合物8(4 mg)，Fr.5E(780 mg)采用硅膠柱二氯甲烷-甲醇(70∶1)分離得化合物9(6 mg)。Fr.7(10.4 g)經硅膠柱二氯甲烷-甲醇(20∶1～1∶1)，分離得6個餾分Fr.7A～Fr.7F，Fr.7C(930 mg)經半制備HPLC甲醇-水(41∶59)分離得化合物16(15 mg)；Fr.7E(6.2 g)經ODS柱層析分離，用35%～75%甲醇洗脫，得4個餾分Fr.7E1～Fr.7E4，Fr.7E1(360 mg)采用半制備HPLC甲醇-水(43∶57)分離得化合物3(12 mg)、17(50 mg)，Fr.7E3(580 mg)采用半制備HPLC甲醇-水(42∶58)分離得化合物1(11 mg)、2(20 mg)。

取正丁醇萃取物70 g，經二氯甲烷-甲醇(100∶1～1∶1)梯度洗脫，TLC檢識合并相同組分，得10個餾分Fr.1～Fr.10，Fr.4(10.5 g)用二氯甲烷-甲醇(100∶1～10∶1)梯度洗脫，TLC檢識合并得8個餾分Fr.4A～Fr.4H，Fr.4C(5.1 g)選取ODS反相硅膠柱層析分離，經30%甲醇～70%甲醇洗脫，得6個餾分Fr.4C1～Fr.4C6，Fr.4C3(1.2 g)用半制備HPLC甲醇-水(43∶57)分離得化合物4(35 mg)、7(7 mg)，Fr.4C4(900 mg)用半制備HPLC甲醇-水(41∶59)分離得化合物14(10 mg)，Fr.4C5(1.4 g)用半制備HPLC甲醇-水(39∶61)分離得化合物10(6 mg)。

3 結構鑒定

化合物1：淡黃色針晶，ESI-MSm/z: 227.1[M-H]-，分子式C14H12O3。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ:7.35 (2H, d,J=8.6 Hz, H-2, 6), 6.96 (1H, d,J=16.3 Hz, H-7), 6.79 (1H, d,J=16.3 Hz, H-8), 6.76 (2H, d,J=8.6 Hz, H-3, 5), 6.45 (2H, d,J=2.1 Hz, H-10, 14), 6.16 (1H, t,J=2.1 Hz, H-12)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 159.7 (C-3, 5), 158.4 (C-12), 141.3 (C-1), 130.4 (C-9), 129.4 (C-7), 128.8 (C-10, 14), 127.0 (C-8), 116.5 (C-11, 13), 105.8 (C-2, 6), 102.6 (C-4)。以上數據與文獻[3]基本一致，故鑒定為白黎蘆醇。

化合物2：淡棕色粉末，ESI-MSm/z: 243.1[M-H]-，分子式C14H12O4。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 6.98 (1H, brs, H-10), 6.87 (1H, d,J=16.0 Hz, H-7), 6.84 (1H, brs, H-14), 6.74 (1H, brs, H-13), 6.73 (1H, d,J=16.0 Hz, H-8), 6.40 (2H, s, H-2, 6), 6.14 (1H, s, H-4);13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 158.6 (C-3, 5), 145.6 (C-12), 145.5 (C-11), 139.4 (C-1), 128.8 (C-9), 128.4 (C-8), 125.7 (C-7), 118.8 (C-14), 115.9 (C-10), 113.4 (C-13), 104.5 (C-2, 6), 101.9 (C-4)。以上數據與文獻[4]基本一致，故鑒定為白杉皮醇。

化合物3：白色粉末，ESI-MSm/z: 451.1[M-H]-，分子式C25H24O8。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ: 9.12 (1H, s, 5-OH), 9.01 (1H, s, 3-OH), 8.90 (1H, s, 11-OH), 8.85 (1H, s, 12-OH), 8.04 (1H, s, 4′-OH), 6.77 (1H, d,J=1.7 Hz, H-10), 6.71 (1H, d,J=8.0 Hz, H-13), 6.64 (1H, dd,J=8.0, 1.7 Hz, H-14), 6.24 (2H, s, H-2′, 6′), 6.13 (2H, d,J=1.8 Hz, H-4, 6), 4.54 (1H, d,J=4.0 Hz, H-8), 4.35 (1H, t,J=8.3 Hz, H-9′b), 4.01 (1H, s, H-7′), 3.66 (1H, dd,J=8.4, 4.0 Hz, H-7), 3.63 (6H, s, 2×OCH3), 3.37 (1H, t,J=8.3 Hz, H-9′a), 2.87 (1H, q,J=8.3 Hz, H-8′)；13C-NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ: 158.6 (C-3), 154.9 (C-5), 147.7 (C-3′, 5′), 147.0 (C-1), 145.2 (C-11), 144.6 (C-12), 136.0 (C-9), 133.7 (C-2), 133.5 (C-1′), 121.1 (C-4′), 117.1 (C-14), 115.4 (C-13), 113.7 (C-10), 104.7 (C-2′, 6′), 101.6 (C-4, 6), 86.9 (C-8), 73.2 (C-9′), 58.1 (C-7), 54.3 (C-8′), 50.1 (C-7′)。以上數據與文獻[4]基本一致，故鑒定為maakoline。

化合物4：淡棕色粉末，ESI-MSm/z: 451.1[M-H]-，分子式C25H24O8。1H-NMR (300 MHz, CD3OD)δ: 6.84 (1H, d,J=1.7 Hz, H-10), 6.75 (2H, m, H-13, 14), 6.31 (2H, s, H-2′, 6′), 6.24 (1H, brs, H-6), 6.19 (1H, brs, H-4), 4.65 (1H, d,J=4.6 Hz, H-8), 4.47 (1H, t,J=8.4 Hz, H-9′α), 4.13 (1H, s, H-7′), 3.77 (1H, dd,J=8.6, 4.6 Hz, H-7), 3.72 (6H, s, 3′, 5′-OCH3), 3.55 (1H, t,J=8.4 Hz, H-9′β), 3.04 (1H, m, H-8′)；13C-NMR(75 MHz, CD3OD)δ: 160.0 (C-5), 156.3 (C-3), 149.1 (C-3′, 5′), 148.6 (C-1), 146.5 (C-12), 146.0 (C-11), 137.9 (C-1′), 135.2 (C-9), 134.6 (C-4′), 123.0 (C-2), 119.1 (C-14), 116.3 (C-13), 114.5 (C-10), 105.4 (C-2′, 6′), 103.2 (C-6), 102.8 (C-4), 89.3 (C-8), 74.9 (C-9′), 59.8 (C-7), 56.6 (3′, 5′-OCH3), 56.5 (C-8′), 52.1 (C-7′)。以上數據與文獻[5]基本一致，故鑒定為kompasinol A。

化合物5：無色油狀，ESI-MSm/z: 579.2[M-H]-，分子式C28H36O13。1H-NMR (300 MHz, CD3OD)δ: 6.67 (2H, s, H-2′, 6′), 6.61 (2H, s, H-2, 6), 4.81 (1H, d,J=3.8 Hz, H-1″), 4.71 (1H, d,J=3.8 Hz, H-7′), 4.67 (1H, d,J=3.8 Hz, H-7), 4.23 (2H, m, Hb-9, 9′), 3.81 (6H, s, 3′, 5′-OCH3), 3.79 (6H, s, 3, 5-OCH3)；13C-NMR (75 MHz, CD3OD)δ: 154.4 (C-3′, 5′), 149.3 (C-3, 5), 139.5 (C-4′), 135.5 (C-4), 135.0 (C-1′), 133.0 (C-1), 105.3 (C-1″), 104.8 (C-2′, 6′), 104.4 (C-2, 6), 87.5 (C-7), 87.1 (C-7′), 78.3 (C-5″), 77.8 (C-3″), 75.6 (C-2″), 72.9 (C-9, 9′), 71.2 (C-4″), 62.5 (C-6″), 57.0 (3, 5-OCH3), 56.8 (3′, 5′-OCH3)，55.7 (C-8), 55.5 (C-8′)。以上數據與文獻[6]基本一致，故鑒定為丁香樹脂酚葡萄糖苷。

化合物6: 灰白色粉末，ESI-MSm/z: 741.3[M-H]-，分子式C34H46O18。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ: 6.60 (4H, s, H-2, 6, 2′, 6′), 4.91 (2H, d,J=4.6 Hz, H-1″, 1?), 4.80 (1H, d,J=2.9 Hz, H-7), 4.61 (1H, d,J=2.9 Hz, H-7′), 4.27 (2H, m, H-9, 9′), 3.70 (12H, s, 3, 5, 3′, 5′-OCH3), 3.10 (2H, m, H-8, 8′)；13C-NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ: 152.7 (C-3, 5, 3′, 5′), 137.2 (C-4, 4′), 133.7 (C-1, 1′), 104.2 (C-2, 6, 2′, 6′), 102.7 (C-1″, 1?), 85.1 (C-7, 7′), 77.3 (C-3″, 3?), 76.5 (C-2″, 2?), 74.2 (C-5″, 5?), 71.4 (C-4″, 4?), 70.0 (C-9, 9′), 60.9 (C-6″, 6?), 56.5 (3,5, 3′, 5′-OCH3)。以上數據與文獻[7]基本一致，故鑒定為雙環氧木脂素。

化合物7：黃色無定型粉末，ESI-MSm/z: 419.2[M-H]-，分子式C22H28O8。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ: 6.58 (1H, s, H-6), 6.38 (2H, s, H-2′, 6′), 4.31 (1H, d,J=5.7 Hz, H-7′), 3.85 (3H, s, 5-OCH3), 3.73 (6H, s, 3′, 5′-OCH3), 3.61 (2H, m, H-9b, 9b′), 3.51 (2H, m, H-9a, 9a′), 3.37 (3H, s, 3-OCH3), 2.68 (1H, m, H-7b), 2.61 (1H, m, H-7a), 1.97 (1H, m, H-8′), 1.62 (1H, m, H-8);13C-NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ: 148.9 (C-3′, 5′), 148.6 (C-5), 147.7 (C-3), 139.3 (C-1′), 138.8 (C-4), 134.5 (C-4′), 130.1 (C-1), 126.2 (C-2), 107.7 (C-6), 106.8 (C-2′, 6′), 66.7 (C-9), 64.1 (C-9′), 60.1 (3-OCH3), 56.7 (3′, 5′-OCH3), 56.6 (5-OCH3), 49.0 (C-8′), 42.3 (C-7′), 40.8 (C-8), 33.5 (C-7)。以上數據與文獻[8]基本一致，故鑒定為南燭木樹脂酚。

化合物8：黃色無定形粉末，ESI-MSm/z: 285.0[M-H]-，分子式C15H10O6。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 8.10 (2H, d,J=8.2 Hz, H-2′, 6′), 6.98 (2H, d,J=8.2 Hz, H-3′, 5′), 6.49 (1H, brs, H-8), 6.25 (1H, brs, H-6)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 175.9 (C-4), 164.0 (C-7), 159.2 (C-5, 4′), 156.3 (C-9), 146.8 (C-2), 135.9 (C-3), 129.5 (C-2′, 6′), 121.8 (C-1′), 115.4 (C-3′, 5′), 103.1 (C-10), 98.3 (C-6), 93.5 (C-8)。以上數據與文獻[9]基本一致，故鑒定為山柰酚。

化合物9：黃色粉末，ESI-MSm/z: 609.1[M-H]-，分子式C27H30O16。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 7.56 (1H, d,J=9.0 Hz, H-6′), 7.54 (1H, s, H-2′), 6.83 (1H, d,J=9.0 Hz, H-5′), 6.38 (1H, brs, H-8), 6.18 (1H, brs, H-6), 1.00 (3H, d,J=5.9 Hz, -CH3)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 177.2 (C-4), 164.4 (C-7), 161.1 (C-5), 156.4 (C-2), 156.3 (C-9), 148.4 (C-4′), 144.9 (C-3′), 133.2 (C-3), 121.5 (C-6′), 121.0 (C-1′), 116.1 (C-5′), 115.2 (C-2′), 103.7 (C-10), 101.1 (C-1″), 100.6 (C-1?), 98.7 (C-6), 93.5 (C-8), 76.3 (C-3″), 75.8 (C-5″), 74.0 (C-2″), 71.7 (C-4?), 70.4 (C-3?), 70.3 (C-2?), 69.9 (C-4″), 68.1 (C-5?), 66.9 (C-6″), 17.6 (C-6?)。以上數據與文獻[10]基本一致，故鑒定為蘆丁。

化合物10：黃色顆粒狀粉末，ESI-MSm/z: 447.1[M-H]-，分子式C22H24O10。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ: 12.67 (1H, s, 5-OH), 10.33 (1H, s, 4′-OH), 7.97 (2H, d,J=8.8 Hz, H-2′, 6′), 6.97 (2H, d,J=8.8 Hz, H-3′, 5′), 6.80 (1H, d,J=2.2 Hz, H-8), 6.44 (1H, d,J=2.2 Hz, H-6), 5.42 (1H, d,J=4.5 Hz, H-1″), 3.80 (3H, s, 3-OCH3)；13C-NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ: 178.1 (C-4), 162.9 (C-7), 160.9 (C-9), 160.3 (C-2), 156.2 (C-5), 156.0 (C-4′), 137.9 (C-3), 130.3 (C-2′, 6′), 120.4 (C-1′), 115.7 (C-3′, 5′), 105.9 (C-10), 99.9 (C-1″), 99.2 (C-6), 94.6 (C-8), 77.2 (C-3″), 76.4 (C-5″), 73.1 (C-2″), 69.6 (C-4″), 60.6 (C-6″), 59.7 (3-OCH3)。以上數據與文獻[11]基本一致，故鑒定為異山奈素-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷。

化合物11：淡黃色油狀物，ESI-MSm/z: 147.0[M-H]-，分子式C9H8O2。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 7.69 (1H, d,J=3.5 Hz, H-2), 7.67 (1H, d,J=2.2 Hz, H-6), 7.59 (1H, d,J=16.0 Hz, H-7), 7.42 (1H, s, H-4), 7.41 (2H, s, H-3, 5), 6.53 (1H, d,J=16.0 Hz, H-8)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 167.6 (C-9), 143.9 (C-7), 134.3 (C-1), 130.3 (C-4), 128.9 (C-3, 5), 128.2 (C-2, 6), 119.3 (C-8)。以上數據與文獻[12]基本一致，故鑒定為桂皮酸。

化合物12：白色粉末，ESI-MSm/z: 163.0[M-H]-，分子式C9H8O3。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 7.60 (1H, d,J=15.9 Hz, H-7), 7.44 (2H, d,J=8.6 Hz, H-2, 6), 6.80 (2H, d,J=8.6 Hz, H-3, 5), 6.28 (1H, d,J=15.9 Hz, H-8)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 171.3 (-COOH), 161.2 (C-4), 146.7 (C-7), 131.3 (C-2, 6), 127.3 (C-1), 117.0 (C-3, 5), 115.7 (C-8)。以上數據與文獻[13]基本一致，故鑒定為對羥基桂皮酸。

化合物13：白色結晶，ESI-MSm/z: 137.0[M-H]-，分子式C7H6O3。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 7.87 (2H, d,J=8.1 Hz, H-2, 6), 6.81 (2H, d,J=8.1 Hz, H-3, 5)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ: 163.5 (-COOH), 159.4 (C-4), 133.2 (C-2, 6), 123.2 (C-1), 116.1 (C-3, 5)。以上數據與文獻[14]基本一致，故鑒定為對羥基苯甲酸。

化合物14：白色粉末，ESI-MSm/z: 359.1[M-H]-，分子式C15H20O10。1H-NMR (300 MHz, CD3OD)δ: 7.35 (2H, s, H-2,6), 5.06 (1H, d,J=7.3 Hz,H-1′),3.88 (6H, s, 3, 5-OCH3), 3.75(1H, m, H-6′a), 3.65 (1H, m, H-6′b)；13C-NMR (75 MHz, CD3OD)δ:169.5(C-7),154.1 (C-3,5), 139.8 (C-4), 130.1 (C-1), 108.6 (C-2, 6), 104.5 (C-1′), 78.5 (C-5′), 77.9 (C-3′), 75.7 (C-2′), 71.3 (C-4′), 62.5 (C-6′), 57.0 (3, 5-OCH3)。以上數據與文獻[15]基本一致，故鑒定為丁香酸吡喃葡萄糖苷。

化合物15：白色結晶，ESI-MSm/z: 137[M-H]-，分子式C7H6O3。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 9.64 (1H, s, -CHO), 7.22 (1H, brd,J=6.9 Hz, H-6), 7.18 (1H, s, H-2), 6.83 (1H, d,J=6.0 Hz, H-5)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)δ:191.0 (-CHO), 152.9 (C-4), 145.7 (C-3), 130.9 (C-1), 125.1 (C-6), 117.7 (C-5), 116.8 (C-2)。以上數據與文獻[16]基本一致，故鑒定為原兒茶醛。

化合物16：白色粉末，ESI-MSm/z: 298.1[M-H]-，分子式C17H17NO4。1H-NMR (300 MHz, CH3OD)δ: 7.36 (1H, d,J=15.7 Hz, H-7), 7.03 (2H, d,J=8.3 Hz, H-2′, 6′), 6.97 (1H, d,J=1.8 Hz, H-2), 6.88 (1H, dd,J=8.3, 1.8 Hz, H-6), 6.74 (1H, d,J=8.3 Hz, H-5), 6.70 (2H, d,J=8.3 Hz, H-3′, 5′), 6.31(1H, d,J=15.7 Hz, H-8), 3.43 (2H, t,J=7.6 Hz, H-8′), 2.43 (2H, t,J=7.6 Hz, H-7′);13C-NMR (75 MHz, CH3OD)δ: 169.3 (C-9), 156.9 (C-4′), 148.8 (C-4), 146.7 (C-3), 142.2 (C-7), 131.3 (C-1′), 130.7 (C-2′, 6′), 128.3 (C-1), 122.1 (C-6), 118.4 (C-8), 116.5 (C-5), 116.3 (C-3′, 5′), 115.0 (C-2), 42.6 (C-8′), 35.8 (C-7′)。以上數據與文獻[17]基本一致，故鑒定為反式-咖啡酰酪胺。

化合物17：白色粉末，溶于CH2Cl2、CH3OH 混合溶劑，硫酸乙醇顯紫紅色。與胡蘿卜苷對照品進行共薄層檢查，鑒定為胡蘿卜苷。

4 討論

本實驗從吐魯番錦雞兒地上部分乙酸乙酯和正丁醇提取物中分離得到17個化合物，其中二苯乙烯4個(1～4)，木脂素 3個(5～7)，黃酮3個(8～10)，有機酸5個(11～14)，醛(15)，生物堿(16)和甾體(17)各1個;化合物3、10為首次從該屬中分離得到，4、6～9、13、16為首次從該植物中分離得到。

前期實驗發現，吐魯番錦雞兒中含有大量的黃酮類化合物，具有抗炎、抗腫瘤、抗潰瘍等作用[18]。化合物9是植物中一種重要的次生代謝產物，具有免疫調節、抗炎、抗病毒等作用[19]；化合物8具有抗腫瘤、抗氧化、抗骨質疏松的作用[20]；二苯乙烯在錦雞兒屬植物中大量存在，為該屬植物特征性成分，在抗腫瘤、抗炎鎮痛、抗氧化、抗HIV、雌激素樣作用等方面都具有較好活性[21]。因此，推測吐魯番錦雞兒中上述成分可能與這些藥理活性相關，具體的藥效物質基礎及作用機制需要進一步研究。