不同胎齡新生兒和早產兒視網膜病變患兒血管內皮生長因子水平變化分析

郭濤 孟靚靚 陳曉云 陳燕 張承芳

1濰坊市婦幼保健院眼耳鼻喉科 261011；2濟寧市第一人民醫院新生兒科 272000；3泰安市中心醫院兒科 271000；4新泰市人民醫院兒童保健科 271200

早產兒視網膜病變（retinopathy of prematurity，ROP）是常見于低出生體質量、胎齡小早產兒的一種視網膜血管增生性疾病，病理改變以病理性新生血管形成、視網膜血管發育不良等為主，可對新生兒視功能造成損傷，降低其生存質量，并增加家庭、社會負擔［1-2］。妊娠16周，胎兒視網膜中的血管開始進行發育，小膠質細胞、星形膠質細胞分泌VEGF，促進視網膜血管發育，早產兒出生時，視網膜血管發育尚未完成，視網膜無血管區存在缺氧現象，可誘導VEGF 水平上升［3］。另外，早產兒出生后多需予以供氧，視網膜組織氧氣增多，可導致VEGF 異常分泌，增加ROP 風險［4］。此次研究分別對不同胎齡早產兒、ROP 患兒實施血清VEGF 檢測，旨在前瞻性研究早產兒、ROP 患兒與VEGF 之間的關聯性，現報道研究如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 于2018 年9 月至2019 年9 月在濰坊市婦幼保健院出生的＜32周早產兒中隨機選取60例設為A組，男31 例（51.67%），女29 例（48.33%）；胎齡范圍為29～31周，胎齡（30.21±0.35）周。于同期在濰坊市婦幼保健院出生的32～36 周早產兒中隨機選取60 例設為B 組，男32 例（53.33%），女28 例（46.67%）；胎齡范圍為32～36 周，胎齡（34.10±1.23）周。于同期在濰坊市婦幼保健院出生的足月兒中隨機選取60 例設為C 組，男29 例（48.33%），女31 例（51.67%）；胎齡范圍為37～41 周，胎齡（39.01±0.53）周。于同期在本院出生且存在ROP的患兒中隨機選取60例設為D組，男32 例（53.33%），女28 例（46.67%）；胎齡范圍為30～36周，胎齡（33.02±1.35）周。此次研究已通過濰坊市婦幼保健院醫學倫理委員會審批，且入選新生兒性別、年齡比較差異均無統計學意義（均P＞0.05），可對比研究。

1.2 納入與排除標準（1）納入標準：早產兒均為出生時胎齡＜37周；ROP經《中國早產兒視網膜病變篩查指南（2014 年）》［5］確診；家屬同意參與研究并配合進行簽字。（2）排除標準：合并其他眼底疾病者；存在其他先天性疾病者；相關醫學信息不全者；家屬依從性差無法配合完成研究者。

1.3 方法 于出生第1周、第3周、第5周時，分別予以4 組新生兒采集0.5 ml 外周靜脈血液標本，進行30～60 min靜置凝固后，予以2 000 r/min×15 min 離心處理，分離血清，保存于-20℃環境中。VEGF試劑盒由上海森雄科技實業有限公司提供，酶標儀（Well Scan MK2）購自芬蘭雷勃公司。通過雙抗夾心ABC-ELISA 法對VEGF 水平進行測定，檢測步驟參考按照儀器、試劑說明書進行。

1.4 觀察指標（1）4組新生兒VEGF水平。（2）A、B、D組有無吸氧新生兒VEGF 水平。（3）早產兒與ROP 患兒相同糾正胎齡VEGF 水平。對A 組、B 組、D 組糾正胎齡進行計算，A 組與B 組均視為早產兒，D 組視為ROP 患兒，對比其VEGF水平。吸氧情況依照新生兒實際情況進行選擇。

1.5 統計學方法 研究數據以SPSS20.0 處理，VEGF水平計量資料符合正態分布以均數±標準差（）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料采用n（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，計量資料組間比較采用重復測量方差分析，兩組間比較采用SNK-q檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 4組新生兒VEGF水平比較 出生第1周、第3周、第5 周時，D 組VEGF 水平均較A 組、B 組、C 組高，且A 組、B組均較C 組高，A 組較B 組高，差異均有統計學意義（均P＜0.05），具體見表1。

表1 4組新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

表1 4組新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

注：經SNK-q 檢驗，與C 組比較，aP＜0.05；與B 組比較，bP＜0.05；與A組比較，cP＜0.05

2.2 各組有無吸氧新生兒VEGF 水平比較 出生第1 周、第3 周、第5 周時，A 組、C 組有無吸氧新生兒的VEGF水平比較差異均無統計學意義（均P＞0.05）；B 組吸氧新生兒VEGF 水平均較未吸氧者低，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表2～4。

表2 A組吸氧與未吸氧新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

表2 A組吸氧與未吸氧新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

注：經重復測量方差分析得出，F時間=1.641，P時間=0.584；F組間=6.264，P組間=0.067；F交互=0.264，P交互=0.510

表3 B組吸氧與未吸氧新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

表3 B組吸氧與未吸氧新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

注：經重復測量方差分析得出，F時間=0.264，P時間=0.487；F組間=3.841，P組間=0.095；F交互=2.064，P交互=0.822

2.3 早產兒與ROP 患兒相同糾正胎齡VEGF 水平比較 ROP 患兒各糾正胎齡VEGF 水平均較早產兒高，差異均有統計學意義（均P＜0.05），詳見表5。

3 討論

ROP 是早產兒眼部疾病的一種，在我國發病率約為15.0%～20.0%，相較于足月兒，早產兒視網膜血管的發育狀況尚不成熟，在多種因素共同作用下，可致使視網膜血管異常增生，引發ROP，增加兒童致盲風險［6-7］。近年來，大量臨床研究表明［8-9］，關于ROP 的發生，臨床研究認為分兩個階段：其一為出生后矯正胎齡30 周以后，此階段，新生兒視網膜未正常發育，娩出后視網膜于高氧分壓環境中暴露，低氧誘導的VEGF 水平下降，視網膜生長進程緩慢，此階段新生兒出生后視網膜可繼續生長，一般無須予以治療。其二為矯正胎齡31～42 周，此階段，新生兒視網膜發育對氧氣的需求量增大，而未血管化的視網膜處于缺氧狀況，VEGF 水平上調，促進視網膜血管大量生長，進入玻璃體腔，進而對患兒視力造成影響。因此，對于ROP，盡早篩查并予以干預對減輕新生兒視功能損害意義重大。

表4 C組吸氧與未吸氧新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

表4 C組吸氧與未吸氧新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

注：經重復測量方差分析得出，F時間=0.341，P時間=0.474；F組間=5.975，P組間=0.066；F交互=3.541，P交互=0.206

在ROP發生、發展的過程中，視網膜新生血管發揮主導作用。孕16 周后，胎兒視網膜血管開始從視盤生長向前部，孕32 周達到鼻側的視網膜鋸齒緣，足月時才會達到顳側的鋸齒緣處，并完成視網膜血管化。而早產兒出生時，視網膜血管化尚未完成，存在視網膜無血管區，且此區域處于缺氧狀態，可對VEGF 產生誘導作用，使其水平上升。因此，VEGF 在ROP 發展中有重要作用，VEGF 是血管形成、發育的必要物質之一，可對血管內皮細胞的分裂、增殖進行促進，使血管通透性增加，其水平異常上升可致使ROP風險增大。本次研究對不同胎齡新生兒、ROP 患兒展開VEGF 水平檢測，結果顯示：出生第1周、第3周、第5周時，D組VEGF水平均較A組、B組、C組高，且A組、B組均較C組高，A組較B 組高，差異均有統計學意義（均P＜0.05），提示與早產兒、足月兒對比，ROP 患兒VEGF 水平較高，且新生兒胎齡越低，VEGF 水平越高。妊娠后期，胎兒組織器官發育速度加大，VEGF需維持在較高的水平，胎兒娩出后，其生長發育逐漸完善，VEGF水平隨之降低。另外，研究表明，ROP早期階段，在高氧環境影響下，VEGF生產被抑制，致使視網膜血管無法正常生長，無血管化區、毛細血管化區形成，視網膜組織缺氧，對病理性VEGF 產生刺激作用，使其表達上調，進一步促進病理性新生血管形成［10］。

同時，出生第1周、第3周、第5周時，A組、C組有無吸氧新生兒VEGF水平比較差異均無統計學意義（均P＞0.05）；B組吸氧新生兒均較未吸氧者低，差異均有統計學意義（均P＜0.05），提示＜32周、足月兒有無吸氧者VEGF水平無明顯差異，而32～36 周早產兒吸氧新生兒VEGF 水平較未吸氧者低。相關研究表明，視網膜中VEGF的生成主要通過氧氣進行調節［11］。本次研究中，僅32～36周早產兒吸氧、未吸氧者的VEGF 水平存在差異，因此尚無法證實吸氧對血清VEGF的影響作用，且早產兒若合并窒息、貧血、呼吸窘迫綜合征等也可能致使血清VEGF 出現異常表達。ROP 患兒各糾正胎齡VEGF 水平均較早產兒高，差異均有統計學意義（均P＜0.05），提示早產兒血清VEGF 水平異常上升可能會致使ROP 風險增大，對于早產兒，臨床上可積極予以血清VEGF水平動態監測，以便于及時發現ROP。大量臨床研究認為，處于發病第一階段時，ROP患兒血清VEGF水平下降，第二階段時，ROP患兒血清VEGF水平上升［12-13］。ROP最早于糾正胎齡32 周時出現，早期準確篩查并予以干預可使此病的發展得到有效控制，減輕對患兒視功能的損害［14］。Vanderveen 等［15］研究發現，出生后4～6 周，ROP 患兒血清VEGF 水平較無ROP 的早產兒高，與本文的研究結果相似，進一步表明，ROP 患兒存在血清VEGF 水平異常上升的現象，對早產兒實施ROP篩查時，可予以其血清VEGF檢測。

綜上所述，相較于無ROP 的早產兒，ROP 患兒血清VEGF 水平顯著上升，早產兒胎齡越小，VEGF 水平越高，吸氧對早產兒血清VEGF 水平的影響尚不明確。但此次研究存在樣本量小、未予以長期隨訪等不足，可能會致使數據離散度增大，致使偏差結果出現，需展開進一步研究，以探討早產兒、ROP患兒血清VEGF水平的變化情況及相關性。

表5 早產兒與ROP患兒相同糾正胎齡VEGF水平比較（，ng/L）

表5 早產兒與ROP患兒相同糾正胎齡VEGF水平比較（，ng/L）

注：括號內為例數，僅有1 例者未納入t 檢驗；經重復測量方差分析得出，F時間=2.645，P時間=0.085；F組間=8.574，P組間=0.057；F交互=4.991，P交互=0.076

利益沖突：作者已申明文章無相關利益沖突。