進行骨髓細胞形態學檢查在診斷非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的價值

陳德喬

（重慶市萬州區第一人民醫院檢驗科，重慶 404000）

非霍奇金淋巴瘤是一種發病率較高的血液系統惡性腫瘤。該病患者的淋巴細胞在分化的過程中會發生克隆性增生。非霍奇金淋巴瘤患者的中位年齡為50 歲左右。該病患者的淋巴瘤細胞侵犯其骨髓的幾率高達30% ～50%。不同類型的非霍奇金淋巴瘤患者骨髓侵犯的發生率存在較大的差異。該病患者的淋巴瘤細胞是否侵犯其骨髓是對其病情進行分期的重要指標。準確地診斷非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者的病情有助于臨床醫生為其制定有針對性的治療方案。對該病患者進行骨髓活檢是目前臨床上確診其病情最準確的方法。但對非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者進行骨髓活檢的操作復雜。對該病患者進行骨髓細胞形態學檢查及流式細胞術檢查也能觀察到其骨髓內細胞的情況[1]。本文主要是探討進行骨髓細胞形態學檢查在診斷非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文的研究對象為重慶市萬州區第一人民醫院收治的30 例非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者。該醫院收治這些患者的時間為2019 年1 月至2020 年1 月。在這些患者中，有男性17 例，占比為56.67%；有女性13 例，占比為43.33%；其中年齡最小的患者34 歲，年齡最大的患者79 歲，其平均年齡為（56.48±18.16）歲。這些患者均對本次研究知情，同意參與本次研究。

1.2 方法

對這些患者均進行流式細胞術檢查，方法是：對患者進行骨髓穿刺，采集其3 ～5 ml 的骨髓液，并使用乙二胺四乙酸二鉀進行抗凝。對骨髓液進行離心、洗滌等處理后，放入6 色流式細胞儀。使用直接免疫標記法對細胞進行免疫分型。使用CD45/ 側向角光散射設門法圈定淋巴細胞。若患者骨髓液中的細胞存在以下任意一種狀態，即可判定其病情為非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯：1）B 淋巴細胞呈輕鏈限制性表達狀態。2）Kappa 或Lanbda 表型缺失。3）B 淋巴細胞群表型異常。4）CD56 和CD16 雙陽性細胞的比例升高，或CD56、CD16 的某一標記缺失。5）T 淋巴細胞表型異常[2]。對這些患者均進行骨髓細胞形態學檢查，方法是：對患者進行骨髓穿刺，采集其0.2 ml 的骨髓液。制作骨髓涂片。在涂片自然干燥后，用瑞氏染色液對涂片進行染色。用顯微鏡觀察涂片中有核細胞的數量。在患者的骨髓有核細胞中，若淋巴細胞占比≥30%，可確診其病情為非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯。在患者的骨髓有核細胞中，若淋巴細胞占比＜30%，但其骨髓液中存在異常淋巴細胞或母細胞樣淋巴細胞，也可確診其病情為非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯[3]。對這些患者均進行骨髓活檢，方法是：采集患者一塊1 cm長的圓柱形骨髓組織標本。對標本進行脫鈣處理。將標本切成薄片。用蘇木精- 伊紅染色法對切片進行染色。在油鏡下選取200 個有核細胞進行觀察。若患者的骨髓組織標本中存在淋巴瘤細胞，可確診其病情為非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯。所有檢查均由同一檢驗師完成。

1.3 觀察指標

將這些患者進行骨髓活檢的結果作為確診其病情的標準。觀察根據這些患者進行流式細胞術檢查結果及骨髓細胞形態學檢查的結果診斷其病情的準確率。

1.4 統計學處理

將本次研究中的數據均采用SPSS 20.0 統計軟件進行處理，計量資料用均數± 標準差（± s）表示，采用t 檢驗，計數資料用百分比（%）表示，采用χ2 檢驗。以P ＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

對這些患者進行骨髓活檢的結果顯示，所有患者均發生非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯。根據這些患者進行流式細胞術檢查或骨髓細胞形態學檢查的結果診斷其病情的準確率均較高。根據這些患者進行流式細胞術檢查的結果診斷其病情的準確率與根據其進行骨髓細胞形態學檢查的結果診斷其病情的準確率相比，P ＞0.05。詳見表1。

表1 這些患者進行流式細胞術檢查及骨髓細胞形態學檢查的結果

3 討論

非霍奇金淋巴瘤是一種惡性淋巴細胞增殖性腫瘤。該病患者發病的部位主要是其淋巴結、脾及胸腺等淋巴器官。導致非霍奇金淋巴瘤發生的因素主要是患者存在免疫功能異常、發生病毒或細菌感染、接觸有害的化學物質、遺傳因素等。非霍奇金淋巴瘤患者的臨床表現包括發熱、盜汗、消瘦、皮膚瘙癢、腹部有飽脹感、腹痛、消化不良、消化道出血、淋巴結腫大、鼻塞及局部黏膜潰瘍等。非霍奇金淋巴瘤患者的病理類型不同、受侵犯的部位不同或受侵犯的范圍不同，其臨床癥狀會存在一定的差異。目前臨床上比較常見的是B 淋巴細胞非霍奇金淋巴瘤。但國外的研究結果證實，亞洲居民T 淋巴細胞非霍奇金淋巴瘤的發生率高于西方國家居民。盡早確診非霍奇金淋巴瘤患者的病情有利于臨床醫生盡早對其進行有針對性的治療。該病患者的淋巴瘤細胞易侵犯其骨髓。非霍奇金淋巴瘤患者的淋巴瘤細胞是否侵犯其骨髓是對其病情進行分期的重要指標。若非霍奇金淋巴瘤患者的淋巴瘤細胞侵犯其骨髓，則可將其病情判定為Ⅳ期非霍奇金淋巴瘤。Ⅳ期非霍奇金淋巴瘤患者的預后較差。對非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者進行骨髓活檢可全面了解其骨髓組織的結構、骨髓細胞的形態等，從而比較準確地診斷其病情。但進行骨髓活檢需要采集患者一塊骨髓組織標本，對其造成的創傷比較大，對檢驗師和檢驗設備的要求較高，耗時較長。因此，該方法在臨床上的推廣受到一定的限制。

近年來，隨著臨床檢驗技術的不斷進步，流式細胞術檢查逐漸被用于臨床診斷非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯。流式細胞術檢查是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量檢查。流式細胞術檢查是目前臨床上最先進的細胞定量檢查技術之一。進行流式細胞術檢查僅需要采集患者少量的骨髓液，對其造成的創傷較小，檢查的速度快，可進行多參數檢測，從而識別其骨髓液中的異常細胞，并確定異常細胞的細胞周期時相[4]。但流式細胞術無法完全替代骨髓活檢。

骨髓細胞形態學檢查又被稱為骨髓象檢查，是指使用顯微鏡或自動化儀器對骨髓中細胞的形態及數量進行的檢查。骨髓細胞形態學檢查可用于診斷多種疾病。非霍奇金淋巴瘤細胞在骨髓中的形態呈高度特異性，且不同病理類型非霍奇金淋巴瘤細胞的特征差異非常大。臨床醫生在對非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者進行骨髓細胞形態學檢查時，應充分把握各種非霍奇金淋巴瘤細胞的特點，從而準確地診斷其病情。與進行骨髓活檢相比，進行骨髓細胞形態學檢查操作簡單，取材方便，可清晰地觀察到高特異性非霍奇金淋巴瘤細胞的形態特征[5]。非霍奇金淋巴瘤細胞的體積比骨髓中的原始紅細胞或原漿細胞大，呈深藍色，含有嗜天青顆粒，核染色質呈細網狀或粗網狀，核仁大[6-7]。但骨髓細胞形態學檢查仍然無法完全替代骨髓活檢。對非霍奇金淋巴瘤患者進行骨髓細胞形態學檢查時，其檢查結果可能呈假陽性。這主要是因為，濾泡細胞淋巴瘤及套細胞淋巴瘤等非霍奇金淋巴瘤患者的淋巴瘤細胞特異性較低。因此臨床醫生在對非霍奇金淋巴瘤患者進行骨髓細胞形態學檢查后，還應結合其臨床癥狀、進行流式細胞術檢查的結果等診斷其病情[8]。

綜上可見，進行骨髓細胞形態學檢查可作為輔助診斷非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯的方法之一。對非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者進行骨髓細胞形態學檢查可觀察到其淋巴瘤細胞的形態，有助于臨床醫生為其制定有針對性的治療方案。