貴陽地區(qū)規(guī)模化豬場主要疫病免疫效果評估

張 海，藺俐仲，鄧珊珊，徐春志，袁 林，楊 源，劉 艷，李照偉

（1.貴陽市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽 550081；2.貴陽市草地站，貴州 貴陽 550081；3.貴陽市清鎮(zhèn)市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州 貴陽 551400；4.貴陽市息烽縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州 貴陽 550300；5.貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽 550081）

隨著生豬養(yǎng)殖規(guī)模化的不斷發(fā)展，在生豬養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中影響豬群生長的疾病因素主要分為病毒性、細(xì)菌性和寄生蟲，其中病毒性動(dòng)物疫病最為常見且影響最大。在病毒性疾病中豬瘟、豬口蹄疫、豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病已經(jīng)成為規(guī)模化豬場重點(diǎn)防控的動(dòng)物疫病。口蹄疫（FMD）主要感染牛、豬等偶蹄類動(dòng)物，感染后的典型臨床特征為口舌黏膜、蹄部皮膚形成水皰、糜爛或潰瘍病灶，傳播迅速、發(fā)病率高，可引起幼畜死亡、成年畜生產(chǎn)性能下降[1]。被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為A類傳染病動(dòng)物疫病，我國將其列為一類動(dòng)物疫病。豬瘟（CSF）是由豬瘟病毒（CSFV）引起的一種急性、熱性、高度接觸性的傳染病，也被稱為“爛腸瘟”[2]。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織將其定為A類傳染病，我國將其列為一類動(dòng)物傳染病。豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起豬以繁殖障礙為主的動(dòng)物傳染病，也稱為豬藍(lán)耳病，我國將其列為二類動(dòng)物傳染病[3]。豬偽狂犬病（PR）是由豬偽狂犬病病毒（PRV）引起的多種家畜和野生動(dòng)物以發(fā)熱、奇癢（豬除外）及腦脊髓炎為主要癥狀的一種急性傳染病[4]。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織將其定為B類傳染病，我國將其列為二類動(dòng)物傳染病。

本試驗(yàn)通過ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）方法，對貴陽市6個(gè)規(guī)模化豬場采集的576份血清樣本，進(jìn)行豬瘟病毒、豬藍(lán)耳病病毒、豬偽狂犬病病毒gE蛋白、豬偽狂犬病病毒gB蛋白、豬O型口蹄疫病毒和豬A型口蹄疫病毒免疫抗體檢測。旨在了解貴陽地區(qū)動(dòng)物疫病的免疫效果，以期為貴陽市規(guī)模化豬場防控策略的制定提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血清樣本

于2019年6—12月采集貴陽市6個(gè)規(guī)模化豬場豬血清樣本576份病料。將6個(gè)規(guī)模化豬場依次編號為A～F，分別采集血清樣本326份、40份、65份、30份、25份、90份。

1.2 免疫程序

豬瘟：仔豬28日齡首免，35、56日齡分別免疫1次，頸部肌肉注射，1頭份/次；母豬每年4月、8月、12月15日各免疫1次，頸部肌肉注射，免疫劑量均為1頭份/次。豬藍(lán)耳病：仔豬15日齡（活疫苗）首免、35日齡（滅活苗）二免，1頭份/次；母豬妊娠50 d后進(jìn)行聯(lián)合免疫，活疫苗2頭份，滅活苗2 mL，母豬產(chǎn)后14 d（活疫苗）二免，免疫劑量為2頭份。偽狂犬病：仔豬65日齡活疫苗免疫1頭份；母豬妊娠30 d（活疫苗）、90 d（滅活苗）各免疫1次，免疫劑量活疫苗為1頭份/次，2 mL/次。口蹄疫：仔豬50日齡疫苗（滅活苗）1 mL、70日齡疫苗（滅活苗）2 mL；母豬每年3月、6月、9月、12月各免疫1次滅活苗，免疫劑量均為2 mL/次。

1.3 檢測試劑盒

豬O型口蹄疫病毒血清抗體ELISA檢測試劑盒（液相阻斷）、豬A型口蹄疫病毒血清抗體ELISA檢測試劑盒（液相阻斷）購自深圳市康百得生物科技有限公司；豬瘟病毒、豬藍(lán)耳病病毒、豬偽狂犬病病毒gB蛋白、豬偽狂犬病病毒gE蛋白血清抗體ELISA檢測試劑盒均購自無錫優(yōu)聯(lián)生物技術(shù)有限公司。

1.4 血清抗體檢測及結(jié)果判斷

豬群為150日齡到200日齡的后備母豬，在相應(yīng)豬場疫苗免疫28 d后，無菌采集凝集血，分離血清。采用血清抗體ELISA檢測試劑盒對A～F號豬場共576份血清樣本進(jìn)行豬瘟病毒和豬藍(lán)耳病病毒抗體檢測，對B、C、D號豬場135份血清樣本進(jìn)行豬O型口蹄疫病毒抗體檢測，對B、C號豬場105份血清樣本進(jìn)行豬A型口蹄疫病毒抗體檢測，對A、C、E號豬場的416份血清樣本進(jìn)行豬偽狂犬病病毒gB蛋白抗體檢測，對A、B、C、E、F號豬場的546份血清樣本進(jìn)行豬偽狂犬病病毒gE蛋白抗體檢測。檢測結(jié)果判斷參照試劑盒說明書進(jìn)行判斷血清樣本的陰、陽性。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

運(yùn)用SPSS軟件和Excel軟件對血清抗體的檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析，計(jì)算樣本的陰、陽性和離散度，離散度等于標(biāo)準(zhǔn)差（STDEV）比上平均數(shù)（AVERAGE）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同豬場豬瘟抗體的檢測

從貴陽市6個(gè)規(guī)模化豬場共采集576份血清樣本，采用ELISA進(jìn)行檢測豬瘟病毒血清抗體，結(jié)果見表1。

表1 不同豬場豬瘟病毒抗體ELISA檢測結(jié)果

由表1可知，6個(gè)規(guī)模化豬場豬瘟抗體的平均抗體陽性率為94.62%，豬場A、B、C、D的抗體陽性率大于平均抗體陽性率，豬場E和F的抗體陽性率低于平均抗體陽性率，其中豬場E的抗體陽性率遠(yuǎn)低于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求的70%。豬場A和C的抗體離散度相對較大，免疫水平相對不整齊。

2.2 不同豬場豬藍(lán)耳病抗體的檢測

從貴陽市6個(gè)規(guī)模化豬場共采集576份血清樣本，采用ELISA進(jìn)行檢測豬藍(lán)耳病病毒血清抗體，結(jié)果見表2。

表2 不同豬場豬藍(lán)耳病病毒抗體ELISA檢測結(jié)果

由表2可知，6個(gè)規(guī)模化豬場豬藍(lán)耳病抗體的平均抗體陽性率為86.46%，豬場A、C、D的抗體陽性率大于平均抗體陽性率，豬場B、E、F的抗體陽性率低于平均抗體陽性率，其中豬場E、F的抗體陽性率低于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求的70%。豬場B、D、F的抗體離散度相對較小，免疫水平相對比較整齊。

2.3 不同豬場豬偽狂犬病病毒gE抗體的檢測

從貴陽市5個(gè)規(guī)模化豬場共采集546份血清樣本，采用ELISA進(jìn)行檢測豬偽狂犬病病毒gE蛋白血清抗體，結(jié)果見表3。

表3 不同豬場豬偽狂犬病病毒gE抗體ELISA檢測結(jié)果

由表3可知，在對5個(gè)規(guī)模化豬場豬偽狂犬病病毒gE抗體的檢測中，豬場B出現(xiàn)了27份陽性樣本，陽性率為67.50%（27/40）；豬場C出現(xiàn)了13份陽性樣本，陽性率為20.00%（13/65）；豬場F出現(xiàn)了4份陽性樣本，陽性率為4.44%（4/90）。豬場A、E未檢測出血清抗體陽性樣本。

2.4 不同豬場豬偽狂犬病病毒gB抗體的檢測

從貴陽市3個(gè)規(guī)模化豬場共采集416份血清樣本，采用ELISA進(jìn)行檢測豬偽狂犬病病毒gB血清抗體，結(jié)果見表4。

表4 不同豬場豬偽狂犬病病毒gB抗體ELISA檢測結(jié)果

由表4可知，豬場A、C、E的豬偽狂犬病病毒gB血清抗體均大于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求的70%的抗體陽性率，其中豬場C的抗體合格率最高達(dá)到了100%（65/65），其次是豬場A抗體合格率為99.69%（325/326），最低的是豬場E抗體合格率為76.00%（19/25）。

2.5 不同豬場豬O型口蹄疫抗體的檢測

從貴陽市3個(gè)規(guī)模化豬場共采集135份血清樣本，采用ELISA進(jìn)行檢測豬O型口蹄疫血清抗體，結(jié)果見表5。

表5 不同豬場豬O型口蹄疫抗體ELISA檢測結(jié)果

由表5可知，對來自豬場B、C、D的135份血清樣本進(jìn)行豬O型口蹄疫抗體檢測，豬場B和豬場C的抗體陽性率分別為97.50%（39/40）和100%（65/65），均大于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求的70%的抗體陽性率；其中豬場D的抗體陽性率為66.67%（20/30）未達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求的70%的抗體陽性率。豬場B和豬場C的抗體陽性率均達(dá)到了95%以上且離散度相對比較低，整體免疫情況較好。

2.6 不同豬場豬A型口蹄疫抗體的檢測

從貴陽市2個(gè)規(guī)模化豬場共采集105份血清樣本，采用ELISA進(jìn)行檢測豬A型口蹄疫血清抗體，結(jié)果見表6。

表6 不同豬場豬A型口蹄疫抗體ELISA檢測結(jié)果

由表6可知，對來自豬場B、C的105份血清樣本進(jìn)行豬A型口蹄疫抗體檢測，豬場B和豬場C的抗體陽性率分別為92.50%（37/40）和100%（65/65），均大于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求的70%的抗體陽性率。

3 討論

本研究對貴陽市部分地區(qū)6個(gè)規(guī)模化豬場進(jìn)行了豬瘟病毒、豬藍(lán)耳病病毒、豬偽狂犬病病毒gB蛋白、豬O型口蹄疫病毒和豬A型口蹄疫病毒免疫抗體和豬偽狂犬病病毒gE蛋白感染抗體調(diào)查，結(jié)果顯示免疫抗體陽性率分別為94.62%、86.46%、98.32%、91.85%和97.14%，感染偽狂犬病gE抗體陽性率為8.06%。說明貴陽市規(guī)模化豬場豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病、豬O型口蹄疫和豬A型口蹄疫免疫抗體總體水平比較高，但是仍然有個(gè)別養(yǎng)殖場存在豬瘟、豬藍(lán)耳病和豬O型口蹄疫免疫不合格，部分豬場存在豬偽狂犬病野毒感染的情況。

豬口蹄疫是我國強(qiáng)制免疫的病種，各級政府和動(dòng)物防疫部門對該病都非常的重視。祖立闖等[5]統(tǒng)計(jì)了2007—2017年中國知網(wǎng)中發(fā)表的54篇針對我國不同地區(qū)的免疫抗體監(jiān)測文獻(xiàn)，其中有47篇文獻(xiàn)報(bào)道的豬口蹄疫免疫抗體合格率≥70%，即有87.04%（47/54）的文獻(xiàn)報(bào)道達(dá)到了國家強(qiáng)制免疫方案的要求，甚至有部分地區(qū)的免疫抗體合格率達(dá)到了95.0%，表明我國豬口蹄疫疫苗免疫狀況整體較好。呂翠等[6]對2017年來源于全國25個(gè)省（市），448個(gè)豬場共13 449份血清進(jìn)行了主要?jiǎng)游镆卟〉目贵w檢測，其中豬瘟抗體平均抗體合格率為80.3%，偽狂犬病野毒平均帶毒率33.44%，偽狂犬病gB抗體平均合格率為92.86%，豬藍(lán)耳病平均抗體合格率為78.05%。從以上數(shù)據(jù)并結(jié)合本試驗(yàn)的抗體檢測結(jié)果，分析可知豬口蹄疫、豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病的總體免疫水平都達(dá)到了國家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的要求，但是豬偽狂犬病野毒感染仍然很嚴(yán)峻，需要引起動(dòng)物防疫部門和養(yǎng)殖場的高度重視，做好相關(guān)防控工作。

自2017年來，豬瘟和豬高致病性藍(lán)耳病退出國家強(qiáng)制免疫病種，貴陽市根據(jù)區(qū)域動(dòng)物疫病防控的實(shí)際情況，仍然將豬瘟列為強(qiáng)制免疫的動(dòng)物疫病[7]。豬口蹄疫、豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病對養(yǎng)豬業(yè)的影響非常大，尤其是在生豬養(yǎng)殖高度密集的規(guī)模化豬場，豬只一旦發(fā)病后果極為嚴(yán)重。豬場需要根據(jù)實(shí)際情況，制定適合自身的免疫程序，做好免疫抗體監(jiān)測，加強(qiáng)免疫抗體評估。同時(shí)還應(yīng)該做好豬藍(lán)耳病和豬圓環(huán)病毒病等免疫抑制病的檢測、選擇適宜該地區(qū)流行的毒株核酸同源性較高的疫苗進(jìn)行免疫，以避免疫苗免疫效果不好或免疫失敗。目前是非洲豬瘟防控的關(guān)鍵時(shí)期，養(yǎng)殖場應(yīng)重視豬場生物安全防護(hù)措施，嚴(yán)格執(zhí)行生物安全規(guī)程，適時(shí)開展動(dòng)物疫病凈化工作。