血清腫瘤標(biāo)記物在視網(wǎng)膜母細胞瘤診斷中的研究

唐芳政，劉智屏，張朝霞，賈曉靜，陳俐麗，肖智輝

0引言

視網(wǎng)膜母細胞瘤(retinoblastoma，RB)是起源于視網(wǎng)膜胚胎性核層細胞的惡性腫瘤，單雙眼均可受累，嬰幼兒為高發(fā)人群[1]，發(fā)病率可達1/20000，每年在全球范圍內(nèi)有3000例RB患兒死亡[2]，嚴(yán)重危害兒童健康。生存率與早期診斷水平、社會經(jīng)濟發(fā)展水平等多因素有關(guān)，不同國家的RB生存率存在明顯差異，RB在美國等發(fā)達國家能達到95%的生存率[3]，而在經(jīng)濟欠發(fā)達國家，生存率低至5%[4]。目前治療水平漸趨成熟[5]，但受限于早期診斷技術(shù)，臨床上難以早期發(fā)現(xiàn)RB，因此患兒就診時多處在中晚期，導(dǎo)致死亡率及致殘率極高，故提高早期診斷水平具有十分重要的現(xiàn)實意義。劉智屏等[6-7]學(xué)者發(fā)現(xiàn)血清腫瘤標(biāo)記物中神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、糖蛋白抗原CA153、CA199水平在RB的分泌水平較高，可作為RB的腫瘤標(biāo)記物，本研究在此基礎(chǔ)上進一步分析不同性別、不同分期RB各血清腫瘤標(biāo)記物的差異，進一步明確其對RB的診斷價值，為提高早期診斷率及治療提供理論依據(jù)。

1對象和方法

1.1對象選擇2017-10/2019-10期間在深圳市人民醫(yī)院兒內(nèi)科進行化療的RB患兒42例為研究對象，其中男22例(52%)，女20例(48%)；年齡5～59(平均23±18)mo；單眼受累23例(55%)，雙眼受累19例(45%)。根據(jù)國際RB分期(intraocular international retinoblastoma classify，IIRC)將眼內(nèi)期RB分為A～E期[8]，其中A～C期22例，D～E期20例。納入標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)眼眶CT、眼底檢查、雙眼彩色超聲多普勒檢查確診為RB，且腫瘤局限于眼內(nèi)的患兒。排除同時患有其他腫瘤疾病的患兒。本研究已獲醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，所有患兒入選前均與其監(jiān)護人簽署知情同意書。

1.2方法所有患兒首次化療前于清晨起床后在空腹?fàn)顟B(tài)下采集非抗凝靜脈血3mL，常溫靜置30min后置于離心機離心10min，分離血清保存于-20℃冰箱內(nèi)待測。使用Roche公司Cobase 601全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及原裝配套試劑盒采用化學(xué)發(fā)光法測定血清NSE、CA199、CA153水平，所有步驟均按照說明書進行嚴(yán)格操作。各腫瘤標(biāo)記物參考值范圍：NSE<15.2ng/mL，CA199<39U/mL，CA153<25U/mL，檢測結(jié)果大于參考值則視為陽性結(jié)果。

2結(jié)果

2.1不同臨床分期患兒血清各腫瘤標(biāo)記物水平比較根據(jù)國際RB分期情況，將患兒分為早中期組(A～C期)和晚期組(D～E期)，早中期組22例，其中男12例，女10例，年齡24±15mo，家族遺傳陽性3例，陰性19例；晚中期組20例，其中男10例，女10例，年齡28±20mo，家族遺傳陽性1例，陰性19例；兩組患兒上述基線資料差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，但晚期組患兒血清腫瘤標(biāo)記物 NSE、CA153、CA199 水平均高于早中期組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同臨床分期患兒血清各腫瘤標(biāo)記物水平比較

2.2不同受累眼數(shù)患兒血清各腫瘤標(biāo)記物水平比較根據(jù)單雙眼受累情況，將患兒分為單眼受累組和雙眼受累組，單眼受累組23例，其中男11例，女12例，年齡27±16mo，家族遺傳陽性2例，陰性21例；雙眼受累組19例，其中男11例，女8例，年齡25±20mo，家族遺傳陽性2例，陰性17例；兩組患兒上述基線資料差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，且兩組患兒血清NSE、CA153、CA199 水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表 2。

表2 不同受累眼數(shù)患兒血清各腫瘤標(biāo)記物水平比較

2.3不同性別患兒血清各腫瘤標(biāo)記物水平比較根據(jù)性別，將患兒分為男性組和女性組，其中男性組22例，年齡26±19mo，家族遺傳陽性2例，陰性20例；女性組20例，年齡22±16mo，家族遺傳陽性2例，陰性18例；兩組患兒上述基線資料差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，且兩組患兒血清NSE、CA153、CA199水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表 3。

表3 不同性別患兒血清各腫瘤標(biāo)記物的水平比較

3討論

目前確診RB的方法主要依靠眼底照相、眼部CT及超聲等常規(guī)檢測技術(shù)，但這些常規(guī)技術(shù)手段均難以做到早期發(fā)現(xiàn)及診斷，從而導(dǎo)致RB的確診通常發(fā)生在疾病的中晚期，給患兒的生存及生活質(zhì)量帶來較大危害。隨著分子生物技術(shù)的發(fā)展和進步，血清腫瘤標(biāo)記物在臨床上已被廣泛應(yīng)用于多種腫瘤臨床診斷[9-11]，也已成為監(jiān)測腫瘤的重要手段之一。血清腫瘤標(biāo)記物是由腫瘤細胞自身產(chǎn)生并釋放，它在體液里的存在和不同時期含量變化在臨床上具有重要的參考價值，可以明確腫瘤的發(fā)生、治療及預(yù)后評判。如何確定一個理想的血清腫瘤標(biāo)記物是目前的難題，如何篩選這類理想的血清腫瘤標(biāo)記物也是熱門研究方向之一。一個好的血清腫瘤標(biāo)記物不僅應(yīng)密切符合該腫瘤的臨床病理特征而且還需具備較高特異性及靈敏度，這樣才能更好地提高早期癌癥的診斷率和監(jiān)測治療效果。

國內(nèi)學(xué)者劉智屏選擇7個常用血清腫瘤標(biāo)記物進行研究，發(fā)現(xiàn)NSE、CA199、CA153可能是作為RB診斷及療效監(jiān)測的理想標(biāo)記物。NSE主要儲存于腦組織等中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元，神經(jīng)內(nèi)分泌細胞中也有一定量的儲存，已經(jīng)被證實是神經(jīng)損傷、神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤如小細胞肺癌、神經(jīng)母細胞瘤的特異性標(biāo)志之一，得到較為廣泛的研究和應(yīng)用。既往研究也發(fā)現(xiàn)NSE對于RB診斷同樣具有較大的價值[12]。CA199是黏液糖蛋白抗原，是腫瘤與機體相互作用后生成，正常體液中含量極低，廣泛存在于消化道上皮細胞膜，常用于消化道癌癥及婦科癌癥的治療及預(yù)后檢測，當(dāng)病情好轉(zhuǎn)該值會降低，若指數(shù)再次上升，需要高度注意腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的可能[13-14]。CA153是由腺體分泌的上皮糖蛋白，參與了腫瘤進展、啟動和轉(zhuǎn)移，當(dāng)出現(xiàn)癌變時會出現(xiàn)高表達，而且中晚期的檢出率較早期明顯增高，提示CA153檢出率的變化趨勢與乳腺癌臨床分期相關(guān)[15]，是乳腺癌重要的腫瘤標(biāo)記物之一。本研究發(fā)現(xiàn)，NSE、CA199、CA153水平在不同性別RB患兒血清中的表達并無統(tǒng)計學(xué)差異，但隨著RB病情進展，臨床分期越往后，其水平越高，尤其是NSE的水平，晚期組明顯高于早中期組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，可能與RB對神經(jīng)元持續(xù)損害、腫瘤本身釋放NSE有關(guān)，這與吳星等[16]研究結(jié)果基本一致。CA199和CA153由于腫瘤與機體不斷相互作用、參與疾病進程，隨著時間的持續(xù)而逐漸出現(xiàn)高濃度、高表達，劉智屏等[6]發(fā)現(xiàn)CA199和CA153在RB中表達特異度較高，但靈敏度均較低，而NSE恰好相反，因此NSE、CA199、CA153這三個血清腫瘤標(biāo)記物聯(lián)合可能對判斷RB預(yù)后及臨床分期具有較大價值。本研究中，單眼受累組和雙眼受累組患兒血清NSE、CA199、CA153的水平差異并無統(tǒng)計學(xué)意義，提示單眼或雙眼受累并不影響三個指標(biāo)的水平，但雙眼受累組中NSE水平上升的結(jié)果仍然需要值得注意，較之單眼受累組，其水平較CA199、CA153升高得更為明顯，雖無統(tǒng)計學(xué)差異，但可能與本研究納入樣本量較少有關(guān)，故研究結(jié)論具有一定的局限性。未來在擴大樣本量的同時，可結(jié)合單雙眼病情程度、化療時間、眼科手術(shù)方式等因素進行分組研究比較，以便更準(zhǔn)確地了解各腫瘤標(biāo)記物在RB中的臨床意義。

1錢誠, 張成娟, 王煒, 等. 視網(wǎng)膜母細胞瘤的遺傳學(xué)特征及臨床篩查與治療. 國際眼科雜志2019; 19(7):1134-1137