曲古抑菌素A通過JNK/MAPK 信號通路介導乳腺癌MDA-MB-231細胞的凋亡

張海燕，孫麗慧，潘洪明，李林，廉潔，于晶，郎尉雅

齊齊哈爾醫學院基礎醫學院組胚教研室,黑龍江 齊齊哈爾 161000

乳腺癌是全球女性最常見的惡性腫瘤，是女性癌癥疾病導致死亡的最主要原因。據統計，2018 年有超過200 萬例新發病例，約占女性癌癥總數的四分之一[1]。乳腺癌的發生與性激素水平、轉錄因子的異常調控、細胞增殖與凋亡的異常調控等多種因素密切相關[2]。

曲古抑菌素A(TSA)隸屬異羥肟酸類化合物，是目前被認為最有效的組蛋白去乙酰化酶抑制劑(histone deacetylase inhibitors，HDACIs)之一。研究表明，TSA 具有抗卵巢癌、肺癌細胞、前列腺癌等腫瘤的能力，可抑制細胞增殖，其發生機制可能與調控下游相關信號通路基因表達有關[3～5]。以往TSA 抗腫瘤作用多集中于對腫瘤細胞增殖的作用的影響，而TSA對乳腺癌細胞凋亡作用的機制研究尚不十分明確。本研究通過體外培養乳腺癌MDA-MB-231 細胞，采用MTT 法、流式細胞術與Western Blot 法、RT-PCR 半定量檢測等方法探究TSA 對乳腺癌MDA-MB-231 細胞增殖和凋亡作用的影響及其分子作用機制，為乳腺癌尋找和開發新的治療方法提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

乳腺癌MDA-MB-231 購自于中國科學院上海細胞庫；抑制劑SP600125 購自于CSN 公司；DMEM 高糖培養基，胎牛血清、胰蛋白酶均購自于Gibco 公司；RIPA 裂解液、BCA 蛋白濃度測定試劑盒購自碧云天生物技術有限公司；曲古抑菌素A、四甲基亞唑藍(MTT)、DMSO、DAPI 購自美國Sigma 公司；細胞周期染色液、Annexin V/PI 細胞凋亡檢測試劑盒購自BD公司；一抗Cyclin D1、P21、Cdk4、Caspase-3、Bcl-2、Bax、MAPK 家族抗體試劑盒、磷酸化MAPK 家族抗體試劑盒，購自美國Cell Signaling 公司；辣根過氧化物酶標記山羊抗兔二抗、辣根過氧化物酶標記山羊抗小鼠二抗、ECL 顯影液購自BIO-RAD 公司；……