黃岡市區育齡婦女抗苗勒管激素參考區間的建立

豐琳

【摘要】 目的：建立黃岡市區育齡女性抗苗勒管激素（AMH）參考區間。方法：選取2019年3-12月本院收治的黃岡市區育齡女性200例，依據年齡分為育齡早期（20～34歲，n=151）與育齡晚期（35～50歲，n=49）;根據研究期間處于的月經周期時期分為卵泡早期（n=118）與黃體中期（n=82）。比較不同育齡期及不同月經周期時期AMH及相關激素水平，分析AMH與年齡以及月經周期相關性。建立黃岡市地區育齡女性抗苗勒管激素的參考區間。結果：卵泡早期與黃體中期AMH水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）。育齡早期AMH水平明顯高于育齡晚期（P<0.05）。卵泡早期雌二醇（E2）與黃體酮（P）水平明顯低于黃體中期，且促卵泡激素（FSH）水平高于黃體中期（P<0.05）。育齡早期催乳素（PRL）水平高于育齡晚期（P<0.05）;AMH水平與年齡存在負相關性（P<0.05），AMH水平與月經周期時期無明顯相關性，差異無統計學意義（P>0.05）。以百分位數法（P2.5，P97.5）作為標準，建立育齡女性的血清AMH參考值區間，21～30歲：0.9～11.5 ng/mL，31～40歲：0.23～11.45 ng/mL，41～50歲：0.35～3.28 ng/mL。結論：建立黃岡市區育齡區期女性AMH參考區間，有利于了解該地區不孕女性的卵巢功能以及生育潛力。

【關鍵詞】 黃岡市 育齡期女性 抗苗勒管激素 參考區間 生育能力

[Abstract] Objective： To establish the reference interval of anti mullerian hormone （AMH） for women of childbearing age in Huanggang City. Method： A total of 200 women of childbearing age in Huanggang City were selected from March to December 2019. According to their age， they were divided into early childbearing age （20-34 years old， n=151） and late childbearing age （35-50 years old， n=49）. According to the menstrual cycle phase during the study period， they were divided into early follicle phase （n=118） and middle corpus luteum phase （n=82）. The levels of AMH and related hormones in different childbearing ages and different menstrual cycles phase were compared. The correlation between AMH and childbearing ages and menstrual cycle phase were analyzed. The reference interval of AMH in women of childbearing age in Huanggang City was established. Result： There was no significant difference in the level of AMH between early follicle phase and middle corpus luteum phase （P>0.05）. The level of AMH in early childbearing age was significantly higher than that in late childbearing age （P<0.05）. The levels of estradiol （E2） and progesterone （P） in early follicle phase were significantly lower than those in middle corpus luteum phase， and the levels of follicle-stimulating hormone （FSH） was higher than that in middle corpus luteum phase （P<0.05）. The level of prolactin （PRL） in early childbearing age was higher than that in late childbearing age （P<0.05）. AMH level was negatively correlated with age （P<0.05）. AMH level was not significantly correlated with menstrual cycles phase， and the difference was not statistically significant （P>0.05）. Percentile method （P2.5， P97.5） was used as the standard to establish the reference range of serum AMH in women of childbearing age， 21-30 years old： 0.9-11.5 ng/mL， 31-40 years old： 0.23-11.45 ng/mL， 41-50 years old： 0.35-3.28 ng/mL. Conclusion： The establishment of AMH reference interval for women of childbearing age in Huanggang City is beneficial to understand the ovarian function and fertility potential of infertile women in this area.

[Key words] Huanggang City Women of childbearing age Anti mullerian hormone Reference range Fertility

隨著生活習慣以及工作壓力的改變，不孕的發生率明顯增加，因此有效評估育齡期女性生育能力對于判斷其卵巢功能及生育潛力有著非常重要的意義[1]。抗苗勒管激素（AMH）是轉化生長因子-P家族的成員，屬于卵巢特異性生長因子，主要在竇卵泡以及竇前泡中進行表達，由顆粒細胞進行分泌，在育齡期女性中具有較高水平的表達[2]。目前已經研究證實，不同直徑的竇卵泡釋放AMH的占比不同，其中5～8 mm的竇卵泡釋放的AMH占比較高，而直徑較大的竇卵泡釋放AMH的能力明顯降低。因此，分析其釋放AMH的能力可以很好地反應竇卵泡大小，評估剩余原始卵泡的數量，分析女性生育能力[3]。當前臨床主要是通過預測女性絕經年齡或評估卵巢儲備功能的方式判斷女性生育能力，但是其診斷復雜，經費較高，影響其臨床推廣[4]。本研究為進一步了解AMH水平在不同女性中的表達情況，特選取本院收治的200名育齡期女性，分析不同階段育齡期女性的AMH水平以及相關激素水平，探究AMH的參考區間，為臨床評估女性生育能力提供數據支持，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年3-12月本院收治的黃岡市區育齡女性200例。納入標準：（1）近期未服用避孕藥物;（2）基礎體溫典型雙相;（3）臨床資料完整。排除標準：（1）伴有高催乳素情況;（2）伴有婦科腫瘤;（3）既往存在卵巢手術史;（4）伴有內分泌失調情況;（5）經檢查確定存在黃體功能不全情況。20～50歲，平均（27.6±2.6）歲。依據年齡分為育齡早期（20～34歲，n=151）與育齡晚期（35～50歲，n=49）;在根據研究期間處于的月經周期時期分為卵泡早期（n=118）與黃體中期（n=82）。所有研究對象均知情同意并簽署知情同意書，本研究已經醫院倫理委員會批準。

1.2 方法 （1）調查基本信息。了解月經情況，年齡等基礎信息。（2）標本采集。卵泡早期的標本采集時間點為月經第2～5天;黃體中期的標本采集時間點為基礎體溫升高4～8 d。抽取空腹肘靜脈血，抽血時間為上午8：00-11：00時，抽取劑量為5 mL，室溫下靜置1 h，然后對血液樣本進行離心處理，轉速設置為3 000 r/min，離心時間為10 min，離心后分離血清，并將制備好血清樣本置于低溫冰箱中進行保存。（3）指標檢測。采用量子點熒光免疫法對患者AMH水平進行檢測，試劑盒購于南京諾唯贊資料科技有限公司，儀器為Vazyme AFS-1000干式熒光免疫分析儀;采用量子點熒光免疫法對促卵泡激素（FSH）、雌二醇（E2）、黃體生成素（LH）、催乳素（PRL）及黃體酮（P）水平進行檢測，試劑盒均購于南京諾唯贊資料科技有限公司。本次研究所有檢測操作均由同組人員完成，并且嚴格按照試劑盒說明書進行操作，保障檢測結果的準確性。（4）相關性分析。將AMH水平作為因變量，將年齡及月經周期作為自變量，分析健康育齡期女性AMH水平與自身年齡以及月經周期之間的關系。（5）建立女性血清正常AMH的參考區間。將200例黃岡市區育齡女性分為不同年齡段建立健康正常女性的血清AMH參考值區間，其中21～30歲：68例，31～40歲：75例，41～50歲：57例。

1.3 統計學處理 采用SPSS 18.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗;計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。相關性使用Spearman秩相關進行分析。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同月經周期時期及育齡期血清AMH水平 卵泡早期與黃體中期AMH水平比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。育齡早期AMH水平明顯高于育齡晚期，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 不同月經周期時期女性相關生殖激素水平 卵泡早期與黃體中期T、LH及PRL水平比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。卵泡早期E2與P水平明顯低于黃體中期，且FSH水平高于黃體中期，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.3 不同育齡期相關生殖激素水平 育齡早期與晚期T、E2、LH、FSH及P水平比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。育齡早期PRL水平高于育齡晚期，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表3。

2.4 AMH與年齡以及月經周期相關性分析 AMH水平與年齡呈負相關，差異有統計學意義（P<0.05）;AMH水平與月經周期時期無明顯相關性，差異無統計學意義（P>0.05）。見表4。

2.5 建立女性血清正常AMH的參考區間 21～30歲女性AMH水平為（3.65±2.61）ng/mL;31～40歲女性AMH水平為（2.75±2.17）ng/mL，41～50歲女性AMH水平（1.77±1.13）ng/mL。結果提示，AMH水平不符合正態分布，根據CLSI的C28-A3文件建議，非正態性的數據使用的參考區間為2.5%～97.5%。以百分位數法（P2.5，P97.5）作為標準，建立健康正常女性的血清AMH參考值區間，21～30歲：0.9～11.5 ng/mL，31～40歲：0.23～11.45 ng/mL，41～50歲：0.35～3.28 ng/mL。

3 討論

隨著生活習慣以及工作壓力的改變，不孕的發生率明顯增加，因此有效評估育齡期女性生育能力對于判斷其卵巢功能及生育潛力有著非常重要的意義[5]。已有學者在研究中指出，卵巢生長卵泡主要進行AMH分泌，其中包含小竇狀卵泡顆粒細胞、竇前卵泡顆粒細胞以及初級卵泡細胞，而卵泡膜細胞或閉鎖卵泡中不存在AMH表達[6]。AMH對于優勢卵泡形成可以起到抑制原始卵泡池過快消耗的作用，對于原始卵泡的起始募集以及循環募集可以起到調控作用，促進優勢卵泡的形成[7]。已有研究指出，AMH水平不會受到垂體-卵巢軸的影響，且經研究證實，在不同月經周期內育齡期女性的AMH水平不會出現明顯波動，并在研究結論中指出，AMH可作為判斷育齡期女性卵巢儲備功能的準確指標[8]。有報道指出，對育齡期女性AMH水平進行檢測，可以間接評估女性生殖能力，且不受檢測周期限制，可實現隨時測量，有效彌補傳統血清指標受月經周期影響的弊端，更適用于臨床推廣[9]。

本研究結果顯示，卵泡早期與黃體中期AMH水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）。育齡早期AMH水平明顯高于育齡晚期（P<0.05），由此可以看出，不同月經周期健康育齡期女性AMH無明顯差異，進一步證實以往研究中月經周期不會影響患者AMH水平這一結論[10]。年齡會影響健康育齡期女性的AMH水平，其中育齡期早期AMH水平更高，隨年齡增長會出現AMH水平明顯降低情況[11]。由此可以看出，年齡是影響健康女性生殖能力的關鍵因素[12]。本次研究不僅對健康育齡期女性AMH水平進行分析，還對其相關性激素水平進行分析，結果顯示，卵泡早期與黃體中期T、LH及PRL水平比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。卵泡早期E2與P水平明顯低于黃體中期，且FSH水平高于黃體中期（P<0.05），由此可以看出，E2、P以及FSH水平更容易受到月經周期的影響，降低其診斷的有效性。在對不同育齡期女性相關激素水平進行分析時發現，育齡早期與晚期T、E2、LH、FSH及P水平比較，差異均無統計學意義（P>0.05）;育齡早期PRL水平高于育齡晚期（P<0.05），由此可以看出，健康育齡期女性PRL水平會受到年齡的影響[13]。

本研究結果顯示，AMH水平與年齡呈負相關（P<0.05），AMH水平與月經周期時期無明顯相關性，差異無統計學意義（P>0.05），由此可以看出，AMH是評估健康女性生育能力的重要指標，且不會受月經周期影響[14]。已有研究指出，生育能力正常女性AMH水平與其年齡段存在明顯相關性，且隨年齡增長，育齡期女性AMH水平呈現下降趨勢[15]。雖然女性年齡與生殖能力存在密切聯系，但是并代表，女性的實際年齡與卵巢年齡相符，而卵巢年齡主要決定于卵巢內早期卵泡數量以及質量，也就是臨床常說的卵巢儲備量[16]。

為進一步分析黃岡市育齡期女性AMH參考區間，本研究對以往研究進行匯總分析，結果發現，國內外多關于AMH水平的研究并無統一定論，也無明確的參考范圍[17]。曾有學者在研究中心指出，即使使用相同的試劑盒進行檢查，不同地區以及不同國家的健康育齡期女性AMH水平同樣存在明顯差異，并在研究中指出，AMH參考范圍水平會因為地域、種族等因素而發生改變，在進行鑒別時應當結合相關數據進行確定[18]。本次研究結果只用于臨床數據參考，為進一步確定該數值區間的參考價值，還需納入更多的研究樣本，進行更加綜合的分析，排除影響AMH水平的相關因素，證實本次研究數據的參考性[19]。雖然目前臨床關于AMH參考區間的明確規定，但是已有大量研究證實，AMH水平與卵巢儲備功能之間存在密切聯系，AMH水平很大程度上可反映育齡期女性的生殖能力，相較于其他臨床常用傳統指標其穩定性更高，影響因素更少[20]。

綜上所述，建立黃岡市區育齡區期女性AMH參考區間，有利于了解該地區不孕女性的卵巢功能以及生育潛力。

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（收稿日期：2020-05-29） （本文編輯：田婧）