ELISA檢測抗-HCV灰區、弱反應標本與FQ-PCR檢測結果比較研究

王真真

(南陽市中心醫院,河南 南陽 473000)

丙型肝炎是一種傳染性疾病，傳播途徑主要有血液傳播、血液制品及靜脈吸毒等，該病的病發較為隱匿，臨床癥狀極不典型，若不及時的進行診斷及治療，將會引發肝硬化、肝臟的慢性炎性變化，對生命健康造成極為嚴重的威脅。目前，診治丙型肝炎最常用的指標是抗-HCV，檢測方式主要為酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，ELISA檢測法雖具有快速、低成本、操作簡單、高靈敏度及高特異性等特點，但其易出現誤診及漏診情況，特別是檢測某些變異病毒、免疫靜默期的感染病毒及“窗口期”的感染病毒，誤診、漏檢情況時有發生。對此，本研究采取熒光定量PCR法(FQ-PCR)復測LISA檢測抗-HCV灰區、弱反應標本情況，對比兩種檢測方法的結果，分析其在HCV感染檢測中的意義，現報告如下。

1 資料與方法

1 一般資料

選取2018年4月～2019年4月在南陽市中心醫院進行無償獻血者的450例血樣標本作為研究對象，根據ELISA檢測抗-HCV檢測結果，將血液標本分為三組，即甲組：陰性(S/C0<0.3)200例；乙組：灰區(0.7≦S/CO<1)240例，其中雙試劑灰區64例，單試劑灰區176例；丙組:弱反應標本〈1≦S/C0<3.0)210例。將所有血樣標本進行分離，并將分離后的血清標本置于-20℃以下的冰箱內進行冷凍保存，備用。

1.2 方法

采取ELISA法檢測三組研究對象的抗-HCV灰區、弱反應標本，若標本的S/CO的檢測值均在0.7～3.8之內，則采用同一種試劑檢測，若標本的檢測結果顯示為灰區、弱反應性，則采取FQ-PCR法進行檢測。ELISA檢測所用是試劑、質控物來源于上海潤裕生物科技有限公司，抗-HCV的質控物一般含量有200 IU/mL；HCV-DNA FQ-PCR檢測的試劑盒來源于上海酶聯生物科技有限公司，試劑檢測的限度為100 IU/mL[1]。檢測設備：濟南光耀醫療設備有限公司提供的TL988型實時熒光定量PCR儀，上海京工實業有限公司提供的PHOTO全自動酶標儀，深圳市盛信康科技有限公司提供的ADACLIA400全自動洗板機。

1.3 統計學方法

采取SPSS18.0統計學軟件對數據進行分析處理，計數資料采取%表示，組間對比檢驗采取χ2表示，P<0.05時表明數據間比較具有統計學意義。

2 結果

2.1 ELISA檢測抗-HCV和FQ-PCR檢測結果對比(見表1)

表1 血液樣本ELISA檢測弱反應性與陰性標本FQ-PCR檢測結果對比

2.2 ELIsA檢測抗-HCV灰區、弱反應性與FQ-PCR檢測結果對比(見表2、3)

表2 不同灰區與HBV-DNA FQ-PCR復測結果對比

表3 不同弱反應性標本與HBV-DNA FQ-PCR復測結果對比

3 討論

目前，臨床一般采取ELISA法檢測抗-HCV來診斷HCV感染。但ELISA法具有較大的局限性，加之不同廠家的試劑的特異性、靈敏度存在差異，在檢測過程中往往出現一些數值在臨界點時無法正確的判斷結果[2]。因此，如何準確判斷、診治HCV感染，避免發生醫患糾紛一直深受臨床的重視。FQ-PCR檢測技術是一種核酸定量檢測法，高靈敏性是其一項重要的特點，當檢測HCV感染時，能有效檢測HCV感染的水平含量，且該方式還能檢測出病毒突變株，其結果能顯示出病毒具有多高強度是傳染性，還能顯示病毒的復制水平[3]。 本文結果顯示，在650例抗-HCV灰區標本中，共有23例(3.534%)HBV-DNA的濃度大于100 IU/mL，這表明，采取ELISA法對抗-HCV進行檢測時，其結果顯示S/CO<1時，仍不能全部排除HCV感染。有關研究認為，當檢測的試劑盒的靈敏度弱、HCV感染處于“窗口期”、HCV變異株感染等情況下，ELISA檢測時并不可以產生相應的免疫應答，這就會導致抗-HCV的漏檢、誤診情況發生[1，3]。而本研究結果顯示，采取ELISA檢測抗-HCV時，呈現弱反應性(1≤S/C0<3.0)的210例研究對象中，有188例(89.52%)檢出HBV-DNA。當抗-HCV呈現弱反應性時，則表明已有HCV感染，但這時并不能明確感染是現癥感染還是以往感染，而HBV-DNA卻是明確為現癥感染的一個特異性指標。因此，應用FQ-PCR檢測標本灰區及弱反應性對檢測丙型肝炎具有十分重要的意義。

綜上所述，采取ELISA法聯合FQ-PCR法檢測抗-HCV結果灰區、弱反應樣標本，能降低感染HCV誤診、漏診情況發生，利于疾病的早期診治，避免醫患糾紛發生。