飼料脂肪水平對大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽生長性能、飼料利用、體成分及血清生化指標的影響

高 攀 焦 飛 劉 晶 胡建勇 時春明 胡江偉 張 鈺

(新疆維吾爾自治區(qū)水產科學研究所，農業(yè)部西北地區(qū)漁業(yè)資源環(huán)境科學觀測試驗站，烏魯木齊 2830000)

額爾齊斯河銀鯽(CarassiusauratusgibelioBlock)為鯽魚的一個亞種，分布于歐亞中北部，我國僅見于黑龍江和額爾齊斯河水系，是一種廣溫、雜食性魚[1-3]。它對各種環(huán)境有廣泛的適應性，與其他鯽魚品種相比，對不良環(huán)境的耐受力較強且營養(yǎng)價值較高，市場前景廣闊[2，4-5]。目前，額爾齊斯河銀鯽產量仍主要依靠額爾齊斯河及其附屬水體的天然漁業(yè)資源，近幾年已呈現逐漸衰退的趨勢，依靠天然捕撈已無法較穩(wěn)定的滿足日益增長的消費需求[2]，急需開展人工養(yǎng)殖，以滿足市場需求。

魚類人工養(yǎng)殖的發(fā)展離不開優(yōu)質水產飼料的支撐[6]。脂肪是構成魚類機體組織的要素，維持其生命活動的主要能源物質，也是脂溶性維生素的媒介體[7]。飼料中適宜的脂肪水平不僅有利于魚體生長與健康，而且對蛋白質也有節(jié)約作用[8-9]，因此有必要研究魚類對飼料中脂肪的需要量。目前，對鯽魚脂肪需要量的研究報道主要集中在異育銀鯽，研究發(fā)現，對于初始體質量為2.05 g/尾的幼魚，其飼料中適宜的脂肪水平為9.93%～11.60%[10-11]，4.5 g/尾的為14.05%[12]，17 g/尾的則為4.08%～6.08%[7]，而大規(guī)格鯽魚魚種飼料中適宜的脂肪尚缺乏參考依據。因此，本研究擬以大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽為研究對象，研究飼料脂肪水平對其生長性能、飼料利用、體成分和血清生化指標的影響，以期獲得大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽飼料中適宜的脂肪水平，為其精準配合飼料的開發(fā)提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 試驗設計

以魚粉、豆粕、菜籽粕為蛋白質源，以魚油為脂肪源，配制脂肪水平分別為3.88%、6.52%、8.87%、11.25%和13.52%的5種等氮不等脂的實用飼料(分別記為CL3.88、CL6.52、CL8.87、CL11.25和CL13.52)，試驗飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。將需粉碎的原料經粉碎機(9FZ-15型，四川簡陽城西精工機械有限公司生產)粉碎后過60目篩，按表1將不同固體原料稱重，少量的組分(<5%)采用逐級預混法充分混勻，隨后加入魚油，再次混合后加約30%的自來水，用飼料機(120型，山東章丘宇龍機械有限公司生產)制作成直徑為2 mm的圓柱形長條飼料，自然風干破碎后置于-20 ℃冰箱中冷藏備用。

表1 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

1.2 試驗魚

試驗用大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽取自新疆水生野生動物救護中心，為自繁池塘養(yǎng)殖1齡魚種。試驗正式開始前在室內圓形水泥池中用CL3.88飼料馴養(yǎng)4周，使其適應試驗飼料和養(yǎng)殖環(huán)境。

1.3 養(yǎng)殖管理

試驗魚在正式試驗前停食24 h，隨后挑選150尾外觀健康、規(guī)格整齊的試驗魚，初始體質量為(52.78±0.10) g，放入同一套循環(huán)水養(yǎng)殖系統的15個養(yǎng)殖玻璃缸(長0.6 m×寬0.4 m×高0.7 m)中，每缸放魚10尾。將15缸試驗魚隨機分為5組，每組3缸，分別投喂5種試驗飼料，并根據所投喂飼料名稱分別命名為CL3.88、CL6.52、CL8.87、CL11.25和CL13.52組。養(yǎng)殖試驗持續(xù)8周，每天飽食投喂3次(10：00、14：00和18：00)，保證無殘餌剩余。

試驗用水為經充分曝氣后的深井水。每個養(yǎng)殖缸的循環(huán)水量為100～120 L/h。試驗期間水溫為21～23 ℃，pH為8.0～8.6，溶氧濃度≥6.0 mg/L，氨氮濃度<0.15 mg/L，亞硝酸鹽濃度<0.05 mg/L。

1.4 樣品采集

飼養(yǎng)試驗結束后，停食24 h，最后，對每缸試驗魚進行計數和稱重。每缸隨機選取試驗魚2尾，麻醉(苯氧乙醇，300 μL/L)測定體長、體重后，用1 mL無菌注射器于尾靜脈取血，在4 ℃下1 000×g離心(3K15型離心機，德國希格瑪實驗室離心機公司生產)10 min后，取血清用于測定血清生化指標；解剖魚體取肝臟、內臟并稱重，隨后取背部肌肉，置于-20 ℃保存，用于檢測肌肉營養(yǎng)組成。另每缸隨機選取3尾試驗魚，稱重后置于-20 ℃保存，用于檢測全魚營養(yǎng)組成。

1.5 指標測定

1.5.1 生長性能和飼料利用

根據下列公式，計算試驗魚的增重率(weight gain rate，WGR)、特定生長率(special growth ratio，SGR)、飼料效率(feed efficiency，FE)、攝食率(feed intake，FI)、臟體比(viscerosomatic index，VSI)、肝體比(hepatosomatic index，HSI)和肥滿度(condition factor，CF)。

WGR(%)=[(W1-W0)/W0]×100；
SGR(%/d)=[lnW1-lnW0]×100/t；
FE=(Wf-Wi)/FT；
FI(%/d)=FT×100/[t×(Wi+Wf)/2]；
VSI(%)=(Vw/W)×100；
HSI(%)=(Hw/W)×100；
CF(g/cm3)=(W/L3)×100。

式中：W0為試驗魚初始體質量(g)；W1為試驗魚終末體質量；Wi為試驗魚初始總質量；Wf為試驗魚終末總質量(g)；t為養(yǎng)殖時間(d)；FT為試驗期間投喂飼料總質量(g)；Vw為試驗魚內臟質量(g)；W為試驗魚體質量(g)；Hw為試驗魚肝臟質量(g)；L為試驗魚體長(cm)。

1.5.2 營養(yǎng)成分含量

試驗樣品的粗蛋白質含量采用凱氏定氮法(GB/T 5009.5—2003)測定，粗脂肪含量采用索氏抽提法(GB/T 5009.6—2003)測定，粗灰分含量采用馬福爐灰化法(GB/T 5009.4—2003)測定，水分含量采用103 ℃恒溫干燥失重法(GB/T 5009.3—2003)測定。

1.5.3 血清生化指標

血清生化指標包括谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)活性以及總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量，采用7180型全自動生化分析儀(日立，日本)測定。

1.6 數據處理與分析

試驗結果采用SPSS 22.0的單因素方差分析(one-way ANOVA)和Turkey均值多重比較法進行差異顯著性分析，所有結果均以平均值±標準差(mean±SD)表示，P<0.05為差異顯著。

2 結 果

2.1 生長性能和飼料利用

在整個養(yǎng)殖試驗期間，各組試驗魚的攝食情況良好，體表正常，成活率均為100%。由表2可知，飼料脂肪水平對試驗魚的終末體質量無顯著影響(P>0.05)，但試驗魚的WGR、SGR和FE隨飼料脂肪水平的升高先增加后降低，在CL8.87組達到最高，顯著高于CL3.88組(P<0.05)，而與CL11.25和CL13.52組差異不顯著(P>0.05)。試驗魚的FI隨飼料脂肪水平的升高而持續(xù)下降，至CL13.52組最低，顯著低于CL3.88、CL6.52和CL8.87組(P<0.05)。

表2 飼料脂肪水平對試驗魚生長性能和飼料利用的影響

以SGR和FE為評價指標，分別進行折線和二次回歸分析，得出大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽飼料中適宜的脂肪水平分別為8.51%和10.45%(圖1)。

圖1 基于模型估測飼料中適宜的脂肪水平

2.2 形體指標

由表3可知，飼料脂肪水平對試驗魚的CF、VSI和HSI均無顯著影響(P>0.05)。

表3 飼料脂肪水平對試驗魚形體指標的影響

2.3 全魚和肌肉營養(yǎng)組成

由表4可知，飼料脂肪水平對全魚粗蛋白質和粗灰分含量以及肌肉水分、粗蛋白質和粗灰分含量無顯著影響(P>0.05)。在全魚和肌肉中，隨飼料脂肪水平的升高，水分含量有下降的趨勢，而粗脂肪含量有上升的趨勢。CL11.25和CL13.52組的全魚水分含量顯著低于其他組(P>0.05)。CL11.25組的全魚粗脂肪含量與CL8.87和CL13.52組差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于CL3.88和CL6.52組(P<0.05)。CL11.25組的肌肉粗脂肪含量與CL6.52、CL8.87、CL11.25和CL13.52組差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于CL3.88組(P<0.05)。

表4 飼料脂肪水平對試驗魚全魚和肌肉營養(yǎng)組成的影響(濕重基礎)

續(xù)表4項目 Items組別 GroupsCL3.88CL6.52CL8.87CL11.25CL13.52肌肉 Muscle水分 Moisture75.13±0.0975.67±0.3375.20±0.2074.97±0.0974.90±0.17粗蛋白質 CP20.47±0.2020.03±0.3519.17±0.1720.63±0.5520.47±0.41粗脂肪 EE1.47±0.09a1.93±0.09ab2.07±0.09ab2.17±0.18b2.33±0.22b粗灰分 Ash1.37±0.091.37±0.121.20±0.061.27±0.031.27±0.07

2.4 血清生化指標

由表5可知，飼料脂肪水平對血清ALT、AST活性以及TP、ALB、GLOB含量無顯著影響(P>0.05)。CL3.88組試驗魚的血清TC含量顯著低于其他4組(P<0.05)。隨著飼料脂肪水平的升高，試驗魚血清TG、HDL和LDL含量先逐漸增加，在飼料脂肪水平達到8.87%后保持相對穩(wěn)定，CL8.87、CL11.25和CL13.52組間差異不顯著(P>0.05)。

表5 飼料脂肪水平對試驗魚血清生化指標的影響

3 討 論

3.1 飼料脂肪水平對大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽生長性能和飼料利用的影響

在本試驗中，隨飼料脂肪水平的升高，大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽的WGR、SGR和FE表現出先升高后下降的趨勢，最高值均出現在飼料脂肪水平為8.87%時。類似的結果在草魚[13]、羅非魚[14]等的研究中也有所發(fā)現，表明攝食適量脂肪水平的飼料可以促進其生長和飼料利用。本試驗中，試驗魚的FI隨飼料脂肪水平的升高而降低，這也在初始體質量為4.5 g的異育銀鯽研究中有所表現[12]，基于本試驗中試驗飼料的能量水平隨脂肪水平的增加而升高，表明試驗魚可以根據飼料中的能量水平來調節(jié)攝食量[15]。

在本試驗中，以SGR和FE為依據，得出大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽飼料中脂肪的適宜水平為8.51%～10.45%，低于之前對初始體質量2.05 g[10-11]和4 g[12]異育銀鯽的研究中所得結果，這可能與本試驗選取的試驗魚規(guī)格較大有關；但是高于初始體質量17 g異育銀鯽(養(yǎng)殖水溫25～30 ℃)的研究中所得結果[7]，這可能是因為本試驗使用的水溫(21～23 ℃，新疆地區(qū)池塘水可以較長時間維持的溫度)較低，而低溫需要較高的不飽和脂肪酸[16]和脂肪水平[17]來滿足魚類生長。

3.2 飼料脂肪水平對大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽形體指標的影響

魚類的形體指標可以反映其營養(yǎng)狀況。在多種魚類，如大口黑鱸[18]、多鱗白甲魚[19]、巴丁魚[20]等中均發(fā)現飼料脂肪水平的升高引起組織脂肪沉積增加[21]，導致CF、VSI和HSI逐漸升高。而在本試驗中，形體指標未受到飼料脂肪水平的顯著影響。在對初始體質量17 g的異育銀鯽的研究中發(fā)現，飼料中4.08%～9.88%的脂肪水平未對CF、VSI和HSI造成顯著影響[7]，而對初始體質量2.5 g的異育銀鯽的研究中也發(fā)現1.4%～11.6%的脂肪水平未影響到CF、VSI和HSI[10]。這可能表明形體指標在額爾齊斯河銀鯽的飼料脂肪需要研究中不是敏感指標。

3.3 飼料脂肪水平對大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽魚體和肌肉營養(yǎng)組成的影響

通常，體脂量會隨飼料脂肪水平的升高而增加[12]，這與脂肪代謝的外源性途徑有關。飼料中的脂肪在腸道酶的作用下，主要分解產物為游離脂肪酸和甘油，然后過腸道膜在黏膜細胞內合成TG，并與磷脂、膽固醇和蛋白質結合成為乳糜微粒，大部分通過淋巴系統進入血液循環(huán)，被肌肉、脂肪組織等外周組織利用[22]，過量的脂肪被儲存在體內，引起體內脂肪含量增加[18]。在本試驗中，隨著飼料脂肪水平的升高，全魚和肌肉粗脂肪含量逐漸增加，結合形體指標來看，表明試驗魚更能有效的利用脂肪沉積于可食組織中。

3.4 飼料脂肪水平對大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽血清生化指標的影響

轉氨酶尤其是ALT在肝細胞內的活性是血清中1 100～5 000倍，若有1%的肝細胞受到損害，就會使血清中ALT的活性顯著增高，因此，血清中轉氨酶活性是判斷肝功能損傷的敏感指標[23]。TP和ALB是檢測肝臟健康的重要指標，肝臟損傷會造成血清TP、ALB含量下降[24]；同時，它們也與機體營養(yǎng)狀況呈正相關[25]，而在本試驗中發(fā)現這些指標隨飼料脂肪水平的升高均無顯著變化，表明本試驗設定的飼料脂肪水平對肝功能均無顯著負面影響。

血漿中TC和TG的來源包括外源性和內源性的。外源性的TC和TG是從飼料中獲取并經消化道進入血液，內源性TC和TG在肝臟、脂肪組織等部位合成后進入血液[26]。LDL的主要作用是將肝臟中過多的脂肪轉運到外周組織；HDL主要負責膽固醇的逆向轉運，血漿中高含量的HDL表明外周組織向肝臟轉運膽固醇的速率較快[22]。本試驗發(fā)現，與脂肪代謝相關的血清產物TC、TG、HDL和LDL的含量均與飼料脂肪水平存在正相關關系，表明隨飼料脂肪水平的升高魚體的脂代謝在增強。

4 結 論

飼料中過高的脂肪水平不利于大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽魚種的生長和飼料利用。以SGR和FE為評價指標，分別進行折線和二次回歸分析，得出大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽飼料中脂肪的適宜水平為8.51%～10.45%。