李劍美 管麗佳 趙芳 周明敏 趙鋒



【摘 要】 目的:端午藥市是一年一度的藥膳藥材盛會,“大蘆山當歸”是普洱地區有名的藥膳藥材。方法:本文從普洱藥材市場中收集24份“當歸”藥材,采用石蠟切片法制成永久裝片,用CaseViewer來觀察和測量“當歸”藥材的歸頭、歸身、歸尾的木栓層、皮層、韌皮部、木質部的厚度和油室的大小、面積、數量以及分泌細胞的數量。結果:8種當歸藥材均有雙子葉植物根的基本構造,即從外至內有木栓層、皮層、韌皮部和木質部組成,均有油室的分布,部分種有樹脂道的分布。結論:8種“歸”藥材橫切面結構相似,但是其顯微數量水平差異顯著,因此可以從木栓層厚度、韌皮部厚度、木質部厚度、油室面積4個指標的顯微數據的差異水平鑒別8種當歸藥材。
【關鍵詞】 當歸;混偽品;顯微;組織切片
【中圖分類號】R282 【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517(2021)04-0040-09
當歸[Angelica sinensis (Oliv.) Diels],屬于傘形科植物,多年生草本植物,主要生產在甘肅東南部,岷縣的產量多,質量好,其次為云南、四川、陜西、湖北等省。
普洱端午藥市是一年一度民族藥膳藥材盛會,市場上約有136的藥材[1],常見的藥膳藥材65種[2],其中文獻記載有毒中草藥19種[3]。“大盧山當歸”為當地主要特色、道地和藥膳藥材,“盧山當歸雞”是遠近聞名的一味藥膳。筆者在走訪普洱市其他縣區時發現,其他縣區端午集市也常有“歸”類藥材,多數以“當歸”為名,均為傘形科植物,外形較為相似。
1 材料與方法
1.1 實驗材料 收集端午藥市以“歸”為名的藥材,共收集24份當歸混偽品(每種藥材收集3份),經DNA鑒定分別為紫花前胡[Angelica decursiva.(Mip.)Franch]、遼藁本[Ligusticum jeholense(Nakai et Kitagawa) Nakai et Kitagawa] 石防風[Peucedanum terebinthaceum(Fisn.)Fisch]、藁本(Ligusticum acuminatum Oliv)、拐芹(Angelica polymorpha Maxim)、滇芹(Meeboldia yunnanensis Wollf)、川明參(Chuanminshen violaceum Sheh et Shan)、藁本(Ligusticum acuminatum Oliv)。材料信息見表1。
按照《中國藥典》規定的方法,將待測樣品按照歸頭、歸身和歸尾切成厚20~40μm的橫切片,并用CaseViewer來觀察和測量“當歸”藥材的歸頭、歸身、歸尾的木栓層、皮層、韌皮部、木質部的厚度和油室的大小、面積、數量以及分泌細胞的數量。選取代表性顯微制片拍照。
2 結果分析
2.1 8種“歸”藥材橫切面以及不同部位的細胞簡圖 比較8種“當歸”的細胞簡圖(見附圖1-8),在細胞簡圖中的字母表示為:ck-木栓層、c-皮層、cle-裂隙、oca-油室、ph-韌皮部、cam-形成層、x-木質部、1-樹脂道。
附圖1,墨江大葉當歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形,歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質部,其中韌皮部極其寬廣,且伴有裂隙的存在。油室主要分布在韌皮部與木質部中,數目較多,分泌細胞數量在6~10個之間,歸頭中存在少量樹脂道,歸身和歸尾中沒有樹脂道的分布。
附圖2,墨江矮歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形,且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質部,其中韌皮部相對寬廣,細胞相對緊致,僅歸頭中存在少量裂隙,油室主要分布于皮層、韌皮部與木質部中,且數目較多,分泌細胞的數量在8~12個之間,在歸身韌皮部中存在大量的樹脂道。
附圖3,墨江栽培當歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形,且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質部,其韌皮部比較寬廣,細胞結構松散,存在較多的裂隙,油室主要分布于韌皮部,且數量較少,分泌細胞的數量在6~15個之間,且歸身中無油室存在,細胞中沒有樹脂道的分布。
附圖4,墨江野生當歸歸頭呈不規則形狀,歸身與歸尾皆呈圓柱形,且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質部,其韌皮部比較寬廣,細胞結構松散,存在較多裂隙,油室主要分布于皮層、韌皮部與木質部中,且數量較多,分泌細胞的數量在5~11個之間,細胞中無樹脂道的分布。
附圖5,瀾滄當歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形,且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質部,其韌皮部相對寬廣,細胞結構松散,存在較多裂隙,油室主要分布于皮層和韌皮部中,且數量中等,但其歸頭的木質部中也存在一些油室,分泌細胞的數量在5~11個之間,細胞中無樹脂道的分布。
附圖6,西盟當歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形,且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質部,其韌皮部相對寬廣,歸頭細胞緊致無裂隙存在,但歸身與歸尾的細胞結構松散,存在較多的裂隙,油室主要分布于韌皮部,數量較多,但其歸頭的木質部中也存在油室,分泌細胞的數量在4~7個之間,細胞中無樹脂道的分布。
附圖7:大蘆山當歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形,且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質部,其韌皮部相對寬廣,細胞結構松散,存在大量的裂隙,其油室主要分布于皮層、韌皮部與木質部中,,數量較多,分泌細胞的數量在5~12個之間,細胞中無樹脂道分布。
附圖8,鎮沅秦歸歸頭、歸身與歸尾皆呈圓柱形,且歸頭橫切面>歸身橫切面>歸尾橫切面。組織切片由外至內可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層、木質部,其韌皮部較為寬廣,細胞結構松散,存在大量的裂隙,其油室主要分布于歸尾韌皮部中,且數量較少,其歸頭、歸身中皆無油室,分泌細胞的數量在5~7之間,細胞中無樹脂道分布。
8種不同地方的“歸”藥材,橫切面外至內可分為木栓層、皮層、韌皮部、形成層和木質部,韌皮部相對寬廣,均有油室和分泌細胞。樹脂道僅見于墨江大葉當歸和墨江矮歸中。 因此單從組織結構上不能將8種“歸”藥材鑒別開來,需要做8種“歸”藥材的顯微數量比較。
2.2顯微組織切片的數量比較分析
2.2.1不同部位的木栓層厚度比較 見表2。
以某一指標條件下的兩個物種顯著差異為分支點,建立8種“當歸藥材”的檢索路徑如下:
1.歸頭木栓層厚度大于等于127μm2
1.歸頭木栓層厚度小于127μm3
2.歸身木栓層厚度大于等于101μm 墨江野生當歸
2.歸身木栓層厚度小于101μm 西盟當歸
3.歸頭木栓層厚度為66μm以下瀾滄當歸
3.歸頭木栓層厚度為66~91μm4
4.歸身木栓層厚度大于等于139μm墨江大葉當歸
4.歸身木栓層厚度小于139μm5
5.歸身大于木栓層厚度大于等于77μm 墨江矮歸
5.歸身大于木栓雙層厚度小于77μm6
6.歸身大于木栓層厚度大于等于66μm大蘆山當歸
6.歸身大于木栓層厚度小于66μm7
7.歸尾大于木栓雙層厚度大于30μm墨江栽培當歸
7.歸尾大于木栓層厚度大于30μm鎮沅秦歸
綜上,以木栓層厚度顯微數量為鑒定依據,可以鑒別8種“當歸”藥材,由此木栓層可作為獨立的鑒定點。
2.2.2 不同部位的皮層厚度比較 見表3。
以皮層厚度指標下的兩個物種顯著差異為分支點,建立8種“當歸藥材”的檢索路徑如下:
1.歸頭皮層厚度大于113μm墨江栽培當歸
1.歸頭皮層厚度小于113μm2
2.歸尾皮層厚度大于34μm3
2.歸尾皮層厚度小于34μm墨江野生當歸
3.歸尾皮層厚度大于56μm4
3.歸尾皮層厚度小于56μm墨江大葉當歸
4.歸頭皮層厚度大于68μm5
4.歸頭皮層厚度小于68μm瀾滄當歸
5.歸尾皮層厚度大于78μm墨江矮歸
綜上,以木栓層厚度顯微數據為鑒定依據時,只可以鑒別出墨江栽培當歸、墨江野生當歸、墨江大葉當歸、瀾滄當歸和墨江矮歸,其他3種當歸的皮層厚度極其相近,無法進行鑒別。由此皮層厚度不可作為獨立的鑒定點。
2.2.3 不同部位的韌皮部厚度比較 見表4。
1.歸頭韌皮部厚度大于6748μm墨江大葉當歸
1.歸頭韌皮部厚度小于6748μm2
2.歸頭韌皮部厚度大于3015μm墨江栽培當歸
2.歸頭韌皮部厚度小于3015μm3
3.歸頭韌皮部厚度大于1456μm大蘆山當歸
3.歸頭韌皮部厚度小于1456μm4
4.歸頭韌皮部厚度大于1301μm5
4.歸頭韌皮部厚度小于1301μm6
5.歸身韌皮部厚度大于1945μm鎮沅秦歸
5.歸身韌皮部厚度小于1945μm墨江野生當歸
6.歸身韌皮部厚度大于1705μm墨江矮歸
6.歸身韌皮部厚度小于1705μm7
7.歸身韌皮部厚度大于625μm瀾滄當歸
7.歸身韌皮部厚度小于625μm西盟當歸
綜上,以韌皮部的顯微數據為鑒定依據,可以鑒別8種“當歸”藥材,由此韌皮部可作為獨立的鑒定點。
2.2.4 不同部位木質部厚度比較 見表5。
1.歸頭木質部厚度大于5901μm墨江栽培當歸
1.歸頭木質部厚度小于5901μm2
2.歸頭木質部厚度大于4813μm墨江大葉當歸
2.歸頭木質部厚度小于4813μm3
3.歸頭木質部厚度大于1875μm大蘆山當歸
3.歸頭木質部厚度小于1875μm4
4.歸頭木質部厚度大于1281μm5
4.歸頭木質部厚度小于1281μm6
5.歸身木質部厚度大于1968μm墨江矮歸
5.歸身木質部厚度小于1968μm7
6.歸頭木質部厚度大于1166μm瀾滄當歸
6.歸頭木質部厚度小于1166μm鎮沅秦歸
7.歸身木質部厚度大于668μm墨江野生當歸
7.歸身木質部厚度小于668μm西盟當歸
綜上,以木質部的顯微數據為鑒定依據,可以鑒別8種“當歸”藥材,由此木質部可作為獨立的鑒定點。
2.2.5 不同部位的油室面積比較 見表6。
1.歸頭油室面積大于7834πμm墨江矮歸
1.歸頭油室面積小于7834πμm2
2.歸頭油室面積大于1186πμm3
2.歸頭油室面積小于1186πμm西盟當歸
3.歸身油室面積大于5033πμm4
3.歸身油室面積小于5033πμm5
4.歸尾油室面積大于2936πμm墨江大葉當歸
4.歸尾油室面積小于2936πμm墨江野生當歸
5.歸身油室面積大于2413πμm6
5.歸身油室面積小于2413πμm瀾滄當歸
6.歸身有油室大蘆山當歸
6.歸身無油室7
7.歸頭有油室墨江栽培當歸
7.歸頭無油室鎮沅秦歸
綜上,以木質部的顯微數據為鑒定依據,可以鑒別8種“當歸”藥材,由此木質部可作為獨立的鑒定點。
在普洱藥材市場上流通著的8種“當歸”中,墨江矮歸的歸身中存在大量的樹脂道,墨江大葉當歸的歸頭中有少量的樹脂道,通過檢索表檢索,可以從木栓層、韌皮部、木質部、油室面積這四個方面確定當歸的物種,皮層檢索表只可鑒別出部分,要想鑒別出其他還需要其他的輔助手段。
3 結論與討論
當歸作為普洱當地主要的一味藥膳食材,在“端午藥市”上同物異名,同名異物的現象非常普遍,嚴重干擾了當歸藥材的秩序。市場流通的“當歸”都是傘形科的植物塊根,分屬于當歸屬(2種)、藁本屬(4種)、川明參屬(1種)、滇芹屬(1種)。《中國藥典》[4]收錄的有藁本、遼藁本、紫花前胡3種。藁本、遼藁本有祛風,散寒,除濕,止痛。用于風寒感冒,巔頂疼痛,風濕痹痛。紫花前胡當歸屬植物,降氣化痰,散風清熱。用于痰熱喘滿,咯痰黃稠,風熱咳嗽痰多。川明參屬只有1種,特產于中國,根入藥,為利肺、和胃、化痰、解毒的作用[5]。滇芹屬只產1種,產于云南,主治感冒風寒,發熱頭痛[5]。正品當歸為當歸屬當歸植物,能補血活血,調經止痛,潤腸通便,用于經閉。痛經,風濕痹痛,跌打損傷。
傘形科植物多數可入藥,花小、形態差異小,因此彼此之間互為混偽品的現象較為普遍,石防風常作為前胡的混偽品[6]。同科同屬植物的顯微結構很類似,因此顯微數量差異比較分析是近緣屬種鑒別的主要依據,如李劍美[7]利用顯微數量的差異鑒別了蘭科白及及其混偽品。
本文以某一指標條件下的兩個物種顯微數量顯著差異為分支點,利用平行檢索表鑒別“當歸”藥材,在觀察分析的5個指標中,除皮層厚度不能鑒別外,其余的木栓層厚度、韌皮部厚度、木質部厚度、油室面積4個指標都可以鑒別8種藥材。但是其方法有一定的局限性,例如生長周期、生育期、地理環境都都會受到一定程度的影響。因此還應以油室的數量,分布的區域,樹脂道的有無作為鑒別8種“當歸”藥材的輔助手段。
參考文獻
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(收稿日期:2020-8-30 編輯:劉斌)