采用PCR擴增儀檢測女性HPV的結果分析

帕爾哈提·克力木 古孜力阿依·木合太爾

【關鍵詞】熒光定量POR;高危人乳頭瘤病毒：分型檢測

本研究對PCR檢測HPV結果進行分析，以期為臨床診治提供參考，并提升宮頸癌防治工作質量，報道如下。

1資料及方法

1.1一般資料選取自2019年3月～2020年3月于我院就診并自愿接受HPV檢測的110例患者的宮頸分泌物標本作為研究對象。患者年齡23～56歲，平均（46.78±6.12）歲。

1.2方法

1.2.1標本采集疣體增生、贅生物取材：暴露疣體皮損處，以生理鹽水清洗局部，用小刷子來回擦拭疣體組織表面，獲取脫落細胞，取樣所用拭子置人裝有5ml病毒保存液中，進行漂洗，貼壁擠干，然后丟棄。所獲標本在-20℃條件下冷凍保存，24h內完成檢測。

宮頸分泌物取材：取截石位，置入陰道窺器，暴露宮頸口，以無菌小刷子將宮頸口多余分泌物擦拭干凈，另取一份經生理鹽水提前浸泡的小刷子緊貼宮頸口，順時針旋轉3～5周，取得分泌物與脫落細胞。取樣拭子置人裝有生理鹽水的滅菌離心管中，進行漂洗、并貼壁擠干，然后丟棄。

1.2.2檢測方法取待測標本與對照試劑各50I，分別加入0.5ml離心管，再添加50IxIDNA提取液，進行震蕩，使其充分混勻，然后取上清，加入試劑反應管，試劑反應管置于自動熒光PCR儀上，進行自動分析處理。

1.3統計學分析應用SPSS20.0統計軟件對實驗數據進行統計學分析，計數資料采用（%）表示，進行x2檢驗，計量資料采用（x±s）表示，進行t檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

2結果

110份標本，共檢出57例HPV DNA陽性，陽性檢出率為51.82%。其中低危型27例，高危型30例;有疣體病例HPV DNA陽性率為52.63%，無疣體病例HPV DNA陽性率為50.94%，差異無統計學意義（P>0.05）;低危型病例中，有疣體病例占比較無疣體病例高，高危型病例中，有疣體病例較無疣體占比低（P<0.05），見表1。

3討論

相關研究指出高危型HPV攜帶者，持續呈陽性，尤其是多種高危型符合感染者，2年內患CIN的危險性較HPV陰性者高出200倍左右。目前，HPV尚未在活細胞中分離成功，故細胞培養法無法進行HPV檢查，血清法可檢測HPV感染情況，但由于人體感染HPV后，機體產生的抗體長期存在于衣殼蛋白中，故血清法無法確定近期或既往感染，對臨床診斷和治療的參考價值不大。隨著分子生物技術學的發展，實時熒光PCR在HPV感染監測中得以廣泛應用，使得宮頸癌篩查和防治工作取得長足進步。本研究對實時熒光PCR檢測HPV感染效果進行分析，結果發現110例患者HPV DNA陽性檢出率達51.82%，有疣體與無疣體病例陽性檢出率對比未見顯著差異，但從檢出樣本中所見，有疣體病例低危型HPV感染率更高，無疣體病例則以高危型感染率更高。這一結果提示，在懷疑為生殖道尖銳濕疣病例中，HPV感染一般以低危型為主，而在懷疑為宮頸上皮內瘤變或宮頸癌病例中，則以HPV高危型感染為主。

綜上所述，采用熒光定量PCR進行HPV檢查，可明確HPV感染的定性與分型，有利于HPV早期檢查。自亞臨床患者中篩查HPV高危型陽性患者，給予臨床干預，能夠控制癌前病變向宮頸癌發展。由此可見，采用熒光定量PCR進行HPV檢查值得推廣。