圓耳管鼻蝠在云南西雙版納的新發現

周全，李彥男，余文華，黃正瀾懿，劉碩，王巧燕，權銳昌，李松*，吳毅*

(1.廣州大學生命科學學院，廣州510006；2.中國科學院昆明動物研究所,昆明動物博物館，昆明650223；3.西雙版納傣族自治州國家級自然保護區管理局科研所，云南景洪666100；4.中國科學院西雙版納熱帶植物園，云南勐臘666303)

圓耳管鼻蝠Murina cyclotis隸屬于翼手目Chiroptera蝙蝠科Vespertilionidae管鼻蝠亞科Murininae(Simmons，2005；Smith，解焱，2009；Sonetal.，2015)，為典型的森林型蝙蝠。由于該類群常棲于遠離人煙的森林區域，標本難于捕獲，基礎數據缺乏，故早期管鼻蝠研究進展緩慢(Fransicetal.，2010)。但隨著針對森林型蝙蝠調查強度的提高與豎琴網的逐漸使用，近10年該類群國內外研究發展迅速。目前全世界已報道管鼻蝠合計41種(Wilson &Mittermeier，2019；Yuetal.，2020)，中國分布19種(王應祥，2003；Simmons，2005；劉少英，吳毅，2019；Yuetal.，2020)。在我國管鼻蝠新分布報道也逐漸增多(黎舫等，2017；吳毅等，2017；陳子禧等，2018；黃正瀾懿等，2018)，但涉及圓耳管鼻蝠的研究相對較少(Soisooketal.，2013；Yueetal.，2019；李彥男等，2020)。

本課題組近年來持續在中國南部區域開展森林型蝙蝠多樣性資源調查。在2019年4—5月利用蝙蝠豎琴網在云南西雙版納采集到中等偏小體型管鼻蝠5只(3♀，孕期；2♂)。根據其外形、頭骨和毛色特征，并結合分子系統學證據將其鑒定為圓耳管鼻蝠，為該種在云南省分布的新發現。

1 標本采集

該批標本采集于云南省勐臘縣龍林新村水溝(101°29.967′E，21°32.186′N，海拔1 024 m)，屬典型的熱帶雨林氣候，森林覆蓋率高，氣候溫暖潮濕，生物多樣性極為豐富。通過架設蝙蝠豎琴網共采集到5只中等體型管鼻蝠(GZHU 19207～09、19217、19332)，標本現保存于廣州大學生命科學學院。

2 研究方法

根據Corbet和Hill(1992)對標本進行外部形態鑒定，參照楊奇森等(2007)的測量標準，使用電子天平(精度0.1 g)和數顯游標卡尺(精度0.01 mm，上海量具刃具廠)進行測量。外部形態指標7項(表1)：體質量(body weight，Wt)、頭體長(head and body length，HB)、前臂長(forearm length，FA)、耳長(ear length，EL)、后足長(hindfoot length，HF)、脛骨長(tibia length，Tib)和尾長(tail length，TL)。頭骨指標測量10項：顱全長(greatest length of skull，GTL)、枕犬長(condylo-canine length，CCL)、腦顱寬(breadth of braincase，BB)、顴寬(zygomatic width，ZW)、眶間寬(interorbital of width，IOW)、上齒列長(maxillary tooth row length，C1-M3)、上犬齒寬(upper canine width，C1-C1)、上臼齒寬(upper third molar width，M3-M3)、下齒列長(mandibular tooth row length，C1-M3)和下頜長(mandibular length，ML)。

使用通用總DNA提取試劑盒(AG通用型基因組AG21009，艾科瑞生物)提取總DNA。根據管鼻蝠亞科種類在NCBI-nt(GenBank)數據庫基因覆蓋豐度篩選使用線粒體細胞色素氧化酶亞基Ⅰ基因(cytochrome oxidase subunitⅠgene，COⅠ)片段和核基因重組激活基因2(recombination activating protein 2，Rag2)片段為分子標記。PCR引物、擴增體系及PCR程序設置參考Yu等(2020)。擴增成功的PCR產物送往上海生工生物工程公司進行測序。利用Geneious 4.8.5對測序結果進行人工拼接與校對。從NCBI-nt數據庫下載管鼻蝠屬的COⅠ和Rag2各物種代表性序列，將毛翼管鼻蝠Harpiocephalus harpia設置為外群，MUSCLE排序比對(Edgar，2004)，MEGA 5.0構建最大似然樹(Tamuraetal.，2011)，自展100次估計節點支持度。

3 研究結果

3.1 外形及頭骨特征

該批標本均為中等偏小體型管鼻蝠，鼻孔呈管狀(圖1：a)。雄性前臂長(30.03 mm，30.41 mm)較雌性(33.03 mm±0.24 mm)略小；顱全長在雌雄間同樣存在差異，雄性(16.21 mm，16.42 mm)較雌性(17.15 mm±0.15 mm)略小。上述度量指標與貴州和廣西圓耳管鼻蝠基本吻合(表1)。在外部形態方面，耳廓較圓，無明顯凹痕，耳前緣內側底部具黃色毛發；背部毛尖呈褐色，中段為金黃色，毛基淺灰色；尾部毛色相對暗淡，為灰褐色，中間具有黃褐色剛毛；頸部與喉部毛發呈黃褐色，與胸部以下的淺灰色腹毛截然不同；體側膜連于第一趾的基部，足部覆蓋些許金黃色毛發(圖1：a、b、c)。頭骨方面，整體略呈半球形，人字嵴和矢狀嵴較明顯；顴弓較發達；第一上前臼齒(P2)較發達，大小接近第二上前臼齒(P4)；犬齒(C)、第一上前臼齒(P2)和第二上前臼齒(P4)的尖端均有后傾趨勢；第一上臼齒(M1)和第二上臼齒(M2)的中齒尖退化，呈“U”型咬合面；下頜具有較發達的冠狀突，齒式為2.1.2.3/3.1.2.3=34(圖1：d～g)。其外形和頭骨特征也與貴州和廣西同種標本相符(Corbet &Hill，1992；Eger &Lim，2011)。

表1 不同地區圓耳管鼻蝠的外形及頭骨特征Table 1 External and skull measurements of Murina cyclotis from different locales

3.2 分子鑒定

基于線粒體基因COⅠ和核基因Rag2片段所構建的系統發育樹均支持該批標本為圓耳管鼻蝠(圖2：a、b)。基于COⅠ基因的系統樹中該支系支持度為100，Rag2標記的系統樹中為99。值得注意的是COⅠ標記提示圓耳管鼻蝠中存在多個高支持度的支系，且本研究標本與NCBI-nt數據庫上來自老撾的圓耳管鼻蝠COⅠ序列JF443973有更近的親緣關系(圖2：a)。

4 討論

由于管鼻蝠常棲息于植被較好且遠離人煙的森林，其小體型和敏捷飛行能力導致標本捕獲相對困難，且物種間形態相似、難以區分，故其本底資料和基礎生物學資料匱乏，分類學問題爭議較多(Fransicetal.，2010；Yuetal.，2020)。在我國，圓耳管鼻蝠的研究報道一直較少，本底狀況未明。本研究參考Corbet和Hill(1992)外形、頭骨和毛色等形態學特征，結合系統發育樹證據，確認該批標本為圓耳管鼻蝠，為該種在云南省的翼手類分布新記錄。國內與本種形態及大小類似的管鼻蝠有3種，即：中管鼻蝠Murina huttoni、哈氏管鼻蝠Murina harrisoni和圓耳管鼻蝠，前2種管鼻蝠的第一上臼齒和第二上臼齒具有明顯的中齒尖(陳子禧等，2018；黃正瀾懿等，2018)，而本研究標本上述臼齒中齒尖不明顯，外形與頭骨的度量數據和特征也與圓耳管鼻蝠吻合(Eger &Lim，2011；Soisooketal.，2013)。歷史文獻指出該種在我國的分布區主要集中在華南區域，即：江西、廣東、廣西、海南(蔣志剛等，2016)和貴州(李彥男等，2020)，而其國外分布區則包括尼泊爾、緬甸、越南、泰國、老撾和印度等地(Wilson &Mittermeier，2019)。故本次分布新發現，明確了該物種在中國西部區域存在的可能性，豐富了該物種的本底分布資料。值得注意的是，該種管鼻蝠在廣東僅發現分布于粵西云開大山一帶，在粵北和粵東僅見其近似種中管鼻蝠分布，因此，對二者展開細致的親緣地理學和種群歷史動態分析，將有助于進一步明確二者分布界限，加深對管鼻蝠類群在我國歷史演化進程與物種形成機制的理解。