貴陽市奶牛結核病感染情況調查與分析

徐春志 ，張 海 ，藺俐仲 ，楊齊心 ，楊 源 ，劉 艷 ，鄧珊珊 ，袁翠霞 ，景書灝 ，李照偉

（1.貴陽市動物疫病預防控制中心，貴州 貴陽 550081；2.貴陽市草地站，貴州 貴陽 550081；3.貴州省畜禽遺傳資源管理站，貴州 貴陽 550081；4.貴陽市清鎮市農業農村局，貴州 貴陽 551400；5.貴州省動物疫病預防控制中心，貴州 貴陽 550081）

牛結核病（Bovine tuberculosis）是由牛結核分枝桿菌引起的一種人畜共患慢性消耗性傳染病，牛、羊、豬等多種動物易感，其中以奶牛最為易感。該病廣泛分布于世界各地[1-2]。奶牛感染后可引起乳房炎、結核性胸膜炎等疾病，還可造成產乳率和乳品質下降[3]。該病的特征是在多種組織和器官內形成結節性肉芽腫，使機體呈現慢性消耗性病變[4]。世界動物衛生組織(OIE)將牛結核病列為B類動物疫病，我國農業農村部將其列為二類動物傳染病[5-6]。牛結核病還是威脅人類健康的傳染病，每年都有一定數量的人受到感染。1979年、1985年和1990年3次全國結核病流行病學調查結果顯示，由牛型分枝桿菌導致的結核菌病所占比例分別為3.8%、4.2%和6.4%[7]。據世界衛生組織（WHO）估算，全球結核病潛伏感染人群約有17億，占總人群的1/4左右。2018年，全球新發結核病患者約為1000萬。

近年來，按照“奶瓶子”市長負責制的具體要求，貴陽市大力發展生態畜牧養殖業，從國內外引進大量奶牛，貴陽市奶牛養殖量占到貴州省總體養殖量的90%以上。為了解貴州省貴陽市2018～2020年奶牛結核病流行情況，本研究對全市7個奶牛養殖場的28781頭奶牛進行了檢測，以期為貴陽市奶牛場結核病的綜合防控提供流行病學調查依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣本來源。2018～2020年，在貴陽市息烽縣、觀山湖區、清鎮市、修文縣和開陽縣的7個規模化奶牛場，共計檢測奶牛28781頭。

1.1.2 檢測試劑。提純牛結核菌素購自哈藥集團生物疫苗有限公司。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法。按照中華人民共和國國家標準《動物結核病診斷技術》（GB/T 18645-2002）中牛分枝結核桿菌PPD皮內變態反應試驗要求進行檢測，分別于注射前、注射后12 h、24 h和72 h測量皮膚厚度，并計算皮膚厚度差。

1.2.2 數據分析。根據不同年份和不同養殖場的檢測結果，采用Excel軟件進行統計分析。

2 結果

2.1 不同年份奶牛結核病檢測結果

對貴陽市2018～2020年牛結核病感染情況采用牛分枝結核桿菌PPD皮內變態反應試驗進行檢測，對檢測結果進行統計。統計結果見表1。統計結果顯示，牛結核病個體陽性率為0.066%（19/28781），奶牛場群體陽性率為19.05%（4/21）；2018年的陽性率最低，為0.01%（1/10983），2019 年的陽性率為 0.02%（2/9817），2020年的陽性率最高，為0.20%（16/7981）。2020年的陽性率是2018年的20倍，是2019年的10倍。說明近3年來貴陽市奶牛牛結核病陽性率呈現上升趨勢。

表1 不同年份奶牛結核病檢測結果統計

2.2 不同奶牛場結核病檢測結果

對貴陽市7個規模化奶牛場采用牛分枝結核桿菌PPD皮內變態反應試驗進行檢測，檢測結果見表2。表2顯示，3年內共計檢測28781頭奶牛，其中奶牛場A的陽性率最高，為0.20%（6/2974），奶牛場B的陽性率為0.14%（13/9109），其余奶牛場均未檢測出陽性牛。

表2 不同奶牛場奶牛結核病檢測結果

3 討論

奶牛結核病多侵害肺、乳房、腸和淋巴結等器官和組織，以出現組織和器官的結核結節性肉芽腫和干酪樣、鈣化壞死病灶為特征，病程呈慢性經過，表現為進行性消瘦，咳嗽、呼吸困難等癥狀。調查結果顯示，貴陽市存在奶牛結核病感染情況，但感染率較低，仍保持在國家控制標準以內。針對這一情況，今后宜實行檢疫和撲殺相結合的防控策略。

從全國來看，羅鵬飛等[9]2015～2019年對新疆阿勒泰地區8個鄉鎮的64442頭牛進行了結核病監測，發現平均陽性率為0.18%。趙燕娟等[10]2016～2017年分別從甘肅、青海、西藏、四川4省區隨機采集牛血清1252頭份，采用ELISA方法對其進行抗體檢測，發現牛結核病總抗體陽性率達0.8%。張喜悅等[11]2018年對北方某地區33個奶牛場的990份全血進行牛結核病調查，采用γ-干擾素ELISA診斷試劑盒進行檢測，結果顯示個體陽性率為13.99%，群體陽性率為51.51%。李智勇[12]對內蒙古地區15個奶牛養殖場的2112份血清進行了奶牛結核病調查，結果顯示平均陽性率為5.6%（0%～22.9%）。邴睿[13]在2011年10月至2012年6月間，對新疆、河北、寧夏等12個省區的29個縣共97個場村的1187頭奶牛進行了牛結核病檢測，經采用γ-干擾素酶聯免疫試驗檢測篩選，發現陽性率為24.1%。以上數據表明，牛結核病在大部分省區都有存在，因此在調運和引種時必須嚴把奶牛檢疫關。

目前，常用的牛結核病診斷方法有牛結核菌素皮內變態反應、γ-干擾素 ELISA試驗和 PCR （熒光PCR）方法。牛結核菌素皮內變態反應的優點是對操作人員的專業水平要求比較低，經簡單培訓后就能上手，所需的結核菌素抗原也比較便宜。該方法的缺點是操作步驟繁瑣，耗時耗力，容易出現非特異性反應，重復性不好。γ-干擾素ELISA試驗的優點是可以檢測早期感染牛只，特異性較好，易于標準化。缺點是需要在采血后2 h內檢測且試劑盒成本較高。PCR（熒光PCR）方法的優點是具有高敏感性和強特異性，可以檢測臨床癥狀不明顯的隱性感染和初期感染，且重復性較好。缺點是對檢測人員的專業素質要求高、檢測儀器和檢測試劑昂貴、對試驗環境要求高，因此很難在基層推廣。