朱蓓蓓
(恩施職業(yè)技術學院,湖北 恩施 445000)
犬螨蟲病又名犬疥癬,是以患部劇癢、脫毛、結痂為主要臨床癥狀的一類慢性寄生性傳染病,該病的傳染性非常強,寵物犬感染后稍不注意就會傳染給人,是當前阻礙寵物行業(yè)發(fā)展的主要疫病之一[1]。目前對于寵物犬螨蟲的預防和治療,臨床上多使用伊維菌素等化學藥物,抗生素治療動物螨病具有作用快、療效高、使用方便等優(yōu)點[2],但抗生素大量使用會產生耐藥性、藥物殘留及環(huán)境污染等問題。當前研制廣譜、高效、無殘留、無毒、經濟、方便,尤其是能夠適用于寵物醫(yī)院及基層獸醫(yī)站使用和推廣的殺蟲藥十分必要。中藥用于人類疾病的防治具有悠久的歷史,但在動物疫病防治中的應用尚處于起步階段。與抗生素相比,中草藥不良反應較少,不產生耐藥性,是研發(fā)新型動物抗菌藥物的重要來源[3]。鑒于此,本研究比較分析了花椒制劑、蒜酊合劑、復方制劑、復方橘皮素、小蘭杜制劑5種中藥制劑對寵物犬螨蟲的體外殺滅效果,以期篩選出對寵物犬螨蟲具有殺滅效果的最佳中藥制劑,為天然殺螨劑的開發(fā)與研制提供參考數(shù)據,為中藥在寵物犬螨蟲防治中的應用奠定基礎。
花椒制劑、蒜酊合劑、復方制劑(百部、苦參、檳榔、蛇床子、沙參5味草藥等比例混合)、復方橘皮素、小蘭杜制劑5種中藥制劑,各取50 g分別水煎,將藥液過濾、濃縮至生藥含量約為10 mg/ml,將5種藥物分別溶于液體石蠟,置于冰箱備用。
經實驗室確診為患有螨蟲病的寵物犬,從嚴重感染的患病部位收集痂皮置于玻璃平皿中,用柔軟的昆蟲分離針挑取成蟲蟲體120只備用,顯微鏡下鑒定120只蟲體均具有較強的活力。
將60只螨蟲隨機分為6組,每組10只,在24孔細胞培養(yǎng)板中每孔放入1組螨蟲,60只螨蟲共放置于6個孔中,前5孔為中藥制劑組,分別滴加溶于液體石蠟的花椒制劑、蒜酊合劑、復方制劑、復方橘皮素、小蘭杜制劑水煎藥液0.1 ml。第6孔為對照組,滴加液體石蠟0.1 ml。保證各孔中的藥液與蟲體充分接觸,把細胞培養(yǎng)板置于溫度為25℃、相對濕度為75%的恒溫箱中保育,每隔1小時取出在顯微鏡下觀察記錄螨蟲活動與死亡情況,當蟲體完全不動、對刺激沒有任何反應時判定為死亡。
將生藥含量為10 mg/ml的花椒制劑2倍倍比稀釋成5個濃度,即10 mg/ml、5 mg/ml、2.5 mg/ml、1.25 mg/ml、0.63 mg/ml。將剩余60只螨蟲隨機分為6組,每組10只,分別放置于24孔細胞培養(yǎng)板的6個孔中,前5孔為花椒制劑不同使用劑量組,分別滴加溶于液體石蠟的10 mg/ml、5 mg/ml、2.5 mg/ml、1.25 mg/ml、0.63 mg/ml花椒制劑水煎藥液0.1 ml。第6孔為對照組,滴加液體石蠟0.1 ml。保證各孔中的藥液與蟲體充分接觸,把細胞培養(yǎng)板置于溫度為25℃、相對濕度為75%的恒溫箱中保育,每隔1小時取出在顯微鏡下觀察記錄螨蟲活動與死亡情況,統(tǒng)計分析花椒制劑不同使用劑量對螨蟲的殺滅時間。
由表1可知,花椒制劑、蒜酊合劑、復方制劑、復方橘皮素、小蘭杜制劑5種中藥制劑將試驗螨蟲全部殺死的時間分別為4 h、6 h、5 h、7 h、6 h,而對照組在12 h后試驗螨蟲存活率仍達80%。表明5種中藥制劑對寵物犬螨蟲均具有一定的殺滅效果,且花椒制劑對寵物犬螨蟲的殺滅效果最好。

表1 中藥制劑對螨蟲體外存活的影響
由表2可知,當花椒制劑濃度在5 mg/ml及以上時,可在4 h內將螨蟲100%滅殺;當花椒制劑濃度為2.5 mg/ml時,可在8 h內將螨蟲100%滅殺;當花椒制劑濃度為1.25 mg/ml時,可在11 h內將螨蟲100%滅殺;當花椒制劑濃度為0.63 mg/ml時,在12 h內對螨蟲的滅殺率僅為50%。表明隨著花椒制劑濃度的降低,花椒制劑對螨蟲的殺滅時間逐步延長,為確保滅殺效果、縮短滅殺時間,應保持花椒制劑濃度在5 mg/ml以上。

表2 花椒制劑不同劑量對螨蟲體外存活的影響
近幾年隨著我國寵物行業(yè)的快速發(fā)展,犬皮膚性疫病的發(fā)病率呈現(xiàn)出逐年升高的趨勢,而在寵物犬的諸多皮膚病中,有一半以上是犬螨蟲病。中藥不產生耐藥性,在自然界中可自行降解,不存在藥物長期殘留和環(huán)境污染問題,且中藥在治療動物疾病的同時能夠提高動物機體的免疫力和抗病力,達到標本兼治的效果。因此,中藥在寵物犬螨蟲病的防治中具有廣闊的開發(fā)應用前景。本研究結果表明:花椒制劑、蒜酊合劑、復方制劑、復方橘皮素、小蘭杜制劑5種中藥制劑對寵物犬螨蟲均具有一定的殺滅效果,但以花椒制劑對寵物犬螨蟲的殺滅效果最好,該結論與譚德展等[4]進行的五種中藥制劑對兔螨蟲殺滅效果的研究表現(xiàn)出了高度的相似性。譚德展等[4]比較分析了花椒制劑、苦參水煎劑、苦楝皮水煎劑、明雄散、擦疥散5種中藥制劑對兔螨蟲離體成蟲的體外滅殺作用,結果表明花椒制劑的殺螨效果最好。同時,本研究進一步分析了花椒制劑不同使用劑量對寵物犬螨蟲的殺滅效果,表明隨著花椒制劑濃度的降低,其殺滅螨蟲所需時間逐步延長,為確保滅殺效果,應保持花椒制劑濃度在5 mg/ml以上。當然,本研究確定的花椒制劑使用劑量是針對離體螨蟲而言,由于螨蟲在離體情況下受到外界環(huán)境應激的影響,其活力越來越低,故在臨床中應用花椒制劑治療寵物犬螨蟲病時還需要根據實際情況進一步確定使用劑量和殺滅時間,切記盲目使用。總之,本研究通過體外離體試驗篩選出了對寵物犬螨蟲具有良好殺滅效果的中藥制劑,并明確了花椒制劑體外使用劑量和殺滅所需時間,為中藥在寵物犬螨蟲防治中的應用奠定了基礎。