林 凌 福清市畜牧獸醫中心港頭畜牧獸醫站 福建福清 350317
肝臟是動物存活時最后一個比較正常的器官。肝臟的病變最多,情況非常復雜,除了一般性的淤血、出血等血液循環障礙、顆粒變性、水泡變性、脂肪變性等變質性變化以及炎性變化各種肝炎以外,還有腫瘤等其他多種變化。肝臟是動物患了急性傳染病后首先出現肉眼病變的器官。肝臟還是毒性病變的有價值的指示器官。因此,肝臟是獸醫衛生檢驗的重要器官。本研究對福州地區屠宰生豬病變肝臟進行分類統計,然后進行組織病理學觀察來了解肝臟病變情況[1]。
1.1 樣品的采集 2017年10月至2018年10月,對福州地區兩所生豬屠宰場屠宰的30個生豬群共計9 000頭生豬進行采樣,其中6 000頭生豬來自1號屠宰場的20個豬群,3 000頭生豬來自2號屠宰場的10個豬群。所有生豬均完成標準免疫程序,且體重大于120 kg,年齡為7~8月齡。共采集有效的肝臟樣品8 870份。記錄所有樣品的來源、疫苗接種情況、生豬品種、飼養情況等信息。檢疫時,采集1 cm×1 cm各種病變肝臟組織塊。用紗布將組織塊包好并迅速固定于10%中性甲醛液(體積5~10倍于組織塊),用于組織切片以及病理學觀察。
1.2 觀察與檢驗方法
1.2.1 視檢 肝的形狀、大小、色澤。
1.2.2 觸檢 肝的彈性和軟硬程度。
1.2.3 剖檢 切開膽管,視其是否擴張、有無寄生蟲侵入。當膽管中有肝片吸蟲、華支睪吸蟲、姜片吸蟲等寄生時膽管努張,切開、觸壓膽管壓,蟲體溢出[2]。
1.2.4 組織切片制作 經過組織塊修整和沖洗、載玻片處理、組織塊脫水和透明、肝臟組織塊浸蠟與包埋、石蠟切片制作、蘇木精-伊紅染色等步驟,切片封好后放在切片托盤上自然干燥24 h,之后用普通光學顯微鏡觀察。
2.1 肝臟病變統計 對8 870頭生豬肝臟樣品進行觀察、記錄、統計,病變肝臟數量是2 998份,占總數的33.8%。病變類型主要有寄生蟲、淤血、出血、變性、壞死等,其中肝出血和淤血所占比例最大,為33.4%;肝變性次之,比例為25.4%。見表1-表3。
2.2 剖檢病變觀察 肝臟病變肉眼觀察情況見圖1。圖1A:肝臟表面中央可見一塊灰白色的壞死灶,規則不一,肝臟腫大,呈土黃色。圖1B:肝色澤變淡,體積腫大,邊緣鈍圓,包膜緊張,質地硬脆。圖1C:肝淤血腫大,重量增加,顏色加深呈紫紅或暗紅,包膜緊張,外觀粗糙,血管斷端有紫紅色血液溢出。圖1D:肝間質結締組織增生,小葉間隔加厚,肝表面形成白色或者灰白色如同牛奶滴下的白色斑塊。
2.3 組織學觀察 肝臟病變顯微觀察情況見圖2。圖2A:肝細胞壞死,肝小葉中央靜脈周圍的肝細胞變性壞死,壞死部被紅細胞取代。圖2B:肝細胞變性,肝細胞發生水泡變性,其胞漿有大小不一的空泡,有的呈網狀,空泡融合成為氣球樣變。圖2C:肝結締組織增生,炎性細胞浸潤,增生的組織中見不少異物巨細胞,導致肝硬變。圖2D:肝小葉間隔結締組織增生,大量嗜酸性粒細胞浸潤。

表1 1號屠宰場豬肝臟病變類型統計

表2 2號屠宰場豬肝臟病變類型統計
3.1 不同肝臟病變的鑒別 從圖1A肉眼觀察可見,該肝臟表面中央可見一塊灰白色壞死灶,規則不一,肝臟腫大,呈土黃色。從圖2A顯微鏡下觀察,肝細胞壞死,肝小葉中央靜脈周圍的肝細胞變性壞死,壞死部被紅細胞取代。說明該病變可能是肝臟局灶性壞死,多見于傳染病例如沙門氏菌、壞死桿菌、原蟲等感染。
從圖1B肉眼觀察可見,該肝臟色澤變淡,體積腫大,邊緣鈍圓,包膜緊張,質地硬脆。在圖2B顯微鏡下觀察,肝細胞發生水泡變性,其胞漿有大小不一的空泡,有的呈網狀,空泡融合成為氣球樣變。說明該病變可能為肝濁腫中的肝水泡變性。若肉眼看全肝黃色,腫大質脆,且邊緣鈍圓,切面油膩,在顯微鏡下肝細胞的胞漿中分布著大小不一或是一致的脂肪滴,這樣的病變可能為肝脂肪變性。若因豬群擁擠關養幾天后導致,稱為“饑餓肝”;如果肝臟和其它內臟也呈現黃色,則可能是黃疸,而不是肝脂肪變性[3]。

表3 肝臟病變觀察結果

圖1 肝臟病變肉眼觀察

圖2 肝臟病變的顯微觀察
從圖1D肉眼觀察可見,該肝臟呈紫紅色,肝間質結締組織增生,小葉間隔加厚,肝表面形成白色或者灰白色如同牛乳滴下的白色斑塊。而從圖2D顯微鏡下觀察,早期肝小葉間隔結締組織增生,大量嗜酸性粒細胞浸潤,少量單核細胞和淋巴細胞浸潤,到后期浸潤的嗜酸性粒細胞慢慢減少,淋巴細胞增多,結締組織中粗大的膠原纖維明顯,有時見漿細胞。說明該病變可能為間質性肝炎,即“乳斑肝”,大多是豬蛔蟲等在體內移行于肝臟細胞造成的組織損傷。若肉眼觀察在肝臟表面附有絲網狀的纖維素,顯微鏡下可見包膜表面附有紅染的纖維素絲;肉眼看見白色結締組織時,顯微鏡下可見纖維素已經被成熟的結締組織代替,且結締組織中只含有少量嗜酸性白細胞和淋巴細胞浸潤時,則可能是包膜炎。
3.2 肝臟物理性出血與病理性出血的鑒別
3.2.1 物理性肝出血 肝臟表面只有少量鮮紅色小出血點,在肝臟實質暗色背景下,這些小出血點并不容易被發現,肝臟整體色澤、質地和淋巴結都正常。
3.2.2 病理性肝出血 肝臟眼觀呈深紅褐色,質脆,膽囊黏膜分布有出血點,肝門淋巴結切面、肝臟包膜下面和切面上散在或有彌漫性的暗紫色出血點,這些病變多是由于急性傳染性疫病引起。若肝臟有線狀彎曲的出血變化,則多是由于寄生蟲移行導致。
通過對福州地區某兩所屠宰場豬肝臟器官病變情況進行觀察、統計分析,發現兩所屠宰場每個豬群生豬肝臟都有不同程度與類型的病變,總病變率占33.8%。該地區的生豬肝臟病變具有相似性,且病變類型主要有肝淤血、肝出血、變性、壞死、寄生蟲感染等,其中,以肝出血、淤血主,占病變的絕大多數。說明該地區生豬肝臟發病情況具有普發的趨勢,須引起生豬養殖戶重視,應加強飼養管理,做好相關疫病的防控措施,從而減少損失。通過不同大量肝臟病變的肉眼觀察,結合相應的組織學檢測,對一些肉眼無法準確判斷的疑似病變,則可通過顯微病變觀察而得到確定,這對生豬屠宰檢疫有很好的技術指導意義,對檢疫員檢疫水平的提高也有很大幫助。