30%二嗪磷微囊懸浮劑高效液相色譜分析

王昌錦，林炳松，蘇君一，康占海，陶 婧，劉細平，徐 妍

(1.北京宇悅生物科技有限公司，北京 100085；2.河北農業大學，河北保定 200020)

二嗪磷(diazinon)是一種高效、廣譜的有機磷殺蟲殺螨劑，對鱗翅目、半翅目等多種害蟲均有較好的防治效果，主要登記用于防治水稻、棉花、果樹、蔬菜、甘蔗、玉米、煙草、馬鈴薯等作物的各種刺吸式口器害蟲和食葉害蟲[1]。二嗪磷的殘留分析及顆粒劑含量分析方法已有報道[2-3]，但有關二嗪磷微囊懸浮劑的分析方法，目前尚未見公開報道。本文采用高效液相色譜技術建立了30%二嗪磷微囊懸浮劑的分析方法，以期為該產品質量控制提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 主要儀器

Agilent 1260型高效液相色譜儀配紫外檢測器、自動進樣器及Agilent色譜工作站(安捷倫科技有限公司)；島津UV-1800型紫外可見分光光度計(島津公司)；GD410DP型超聲波清洗器(深圳市光點超聲波設備有限公司)。

1.2 試劑

二嗪磷標準品(質量分數98.4%，北京宇悅生物科技有限公司)；甲醇(色譜純)；水：新蒸二次蒸餾水；30%二嗪磷微囊懸浮劑(北京宇悅生物科技有限公司)。

1.3 液相色譜條件

Agilent 1260型高效液相色譜儀，具有紫外檢測器和自動進樣器；色譜柱：WondaSil C18-WR(150 mm ×4.6 mm，5 μm)；流動相：甲醇＋水(體積比80∶20)；流速：1.0 mL/min；柱溫：室溫；檢測波長：254 nm；進樣體積：5 μL。采用外標法定量。在該色譜條件下，二嗪磷的保留時間約為5.8 min。二嗪磷標樣及樣品的典型液相色譜圖見圖1、圖2。

圖1 二嗪磷標樣的色譜圖

圖2 30%二嗪磷微囊懸浮劑的色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1 標準溶液的配制

準確稱取二嗪磷標準品0.05 g (精確至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，超聲溶解，備用。

1.4.2 試樣溶液的配制

準確稱取30%二嗪磷微囊懸浮劑樣品0.17 g (精確至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，超聲溶解后，過0.45 μm有機濾膜，備用。

1.4.3 測定

按1.3色譜條件，連續注入數針標樣溶液，待相鄰2針的相對響應值變化小于1.5%時，依標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進樣測定。

1.4.4 計算

將測得的2針試樣溶液及其前后2針標樣溶液中二嗪磷峰面積分別進行平均。試樣中二嗪磷的質量分數w(%)按下式計算。

式中：A1為標樣溶液中二嗪磷峰面積的平均值，mAU·s；A2為試樣溶液中二嗪磷峰面積的平均值，mAU·s；m1為二嗪磷標樣的質量，g；m2為試樣的質量，g；P為標樣中二嗪磷的質量分數，%。

2 結果與分析

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 流動相的選擇

分別試用不同比例的甲醇+水、乙腈+水作為流動相對試樣進行分離檢測，結果發現選用乙腈和水作為流動相出峰時間長且峰型不對稱。當選用甲醇和水作為流動相且體積比為80∶20時，峰形對稱，分離效果理想，出峰時間適中，故最終選定流動相為甲醇+水，二者的體積比為80∶20。

2.1.2 檢測波長的選擇

通過紫外可見分光光度計UV-1800在240~400 nm進行紫外掃描，二嗪磷在247 nm處有最大吸收。考慮溶劑、助劑對吸收的影響，最終選定以254 nm為檢測波長(圖3)。

圖3 二嗪磷的紫外掃描圖

2.2 特異性的測定

本試驗方法采用全波長紫外掃描檢測峰純度分析法來鑒別。二嗪磷最小峰純度相似度為1.000 000，最小峰純度閾值為0.999 625，最小峰純度指數為正值，說明樣品色譜峰中不含有雜質。標樣液相色譜峰與試樣液相色譜峰出峰時間差在1.0%以內，如圖1和圖2所示。制劑中峰純度色譜圖如圖4所示。

2.3 分析方法的線性相關性測定

按1.4.1中方法配制不同質量濃度的標樣溶液，在1.3色譜條件下進樣，每個質量濃度重復進樣2次，求其峰面積平均值。以質量濃度為橫坐標，峰面積值為縱坐標，繪制標準曲線。二嗪磷線性方程為y=5 206.7x+1 519.3，相關系數為(R2) 0.999 8。二嗪磷線性關系圖見圖5。

圖4 制劑中二嗪磷峰純度色譜圖

圖5 二嗪磷線性關系圖

2.4 分析方法的精密度測定

選取有代表性的30%二嗪磷微囊懸浮劑試樣，在上述色譜操作條件下平行測定5次，結果見表1。可見，二嗪磷的標準偏差為0.18，變異系數為0.59%。

表1 分析方法的精密度測定結果

2.5 分析方法的準確度測定

采用標準添加法，在已知質量分數的試樣中，加入一定量的二嗪磷標準品，按1.3色譜操作條件進行測定，結果見表2。可見，二嗪磷的平均回收率為99.90%，相對標準偏差為0.254 2%。

2.6 非分析物干擾試驗

在評價準確度時，通常包含非分析物質的干擾，因有效成分中的任何干擾物均會導致分析方法出現系統誤差。分析時應同時測定不帶有效成份的空白樣品，或證明其無干擾。通過對溶劑(甲醇)、空白樣品(不含有效成分的助劑)、原藥等按1.3色譜條件進行分析，結果發現甲醇、原藥及不含有效成分的助劑對分析均無明顯干擾，因此使用該分析方法未受到非分析物干擾而影響測定。

表2 分析方法的準確度測定結果

3 結 論

本文建立了30%二嗪磷微囊懸浮劑中有效成分的質量分析方法，此方法具有較高的準確度和精密度，線性關系良好，具有操作簡便、快速、準確的優點，可適用于該產品生產過程的質量檢測和控制。