妊娠后期飼糧蛋白質水平對母驢初乳與常乳中蛋白質、脂肪和氨基酸含量的影響

梁曉帥 沈亞軍 齊敬宇 郝 穎 李胤豪 趙艷麗 郭曉宇 史彬林 閆素梅*

(1.內蒙古農業大學動物科學學院，內蒙古自治區高校動物營養與飼料科學重點實驗室，呼和浩特 010018；2.內蒙古草原御驢科技牧業有限公司，和林格爾 011500)

隨著農業機械化程度的提高，驢逐漸退出役用市場，養驢業開始向乳用、肉用方向轉變[1]。Ragona等[2]指出，驢乳具有乳清蛋白和溶菌酶含量高、酪蛋白含量低、脂肪含量低和多不飽和脂肪酸含量高等特點，與人乳最為接近，是一種稀有的乳品資源。因此，提高驢乳的質量對增加養驢效益、促進驢產業的健康發展具有重要的意義。許多研究表明妊娠后期的飼糧能量與蛋白質等營養水平和泌乳階段是影響泌乳質量的主要因素，但目前的研究主要集中在奶牛、母豬等動物上，且研究結果也不盡一致。陳子寧等[3]指出，在奶牛圍產前期降低飼糧能量水平有助于提高分娩后奶牛的干物質采食量、產奶量和血糖濃度，顯著降低產后體重損失。楊鹛等[4]在母豬上的研究發現，增加妊娠期飼糧的能量與蛋白質等營養水平，可提高初乳中脂肪、蛋白質含量，但常乳中脂肪、蛋白質含量主要受母豬泌乳期間平均日采食量和體況的影響。然而，有研究指出，圍產前期飼糧蛋白質水平對奶牛娩后60 d的產奶量及乳成分無顯著影響[5]；在伊犁馬妊娠后期，隨飼糧蛋白質水平增加，初乳中脂肪、蛋白質、總固形物含量和體細胞數無顯著變化[6]。泌乳階段直接影響乳成分，初乳是母畜產后7 d之內分娩的乳汁，初乳成分與常乳存在很大差異。呂岳文等[7]發現，母驢分娩后6 h的初乳中蛋白質含量高達5.07%，脂肪含量達3.85%，且二者含量在分娩72 h后均隨著泌乳時間的延長呈降低趨勢。目前，關于泌乳階段與飼糧蛋白質水平對驢泌乳性能影響的研究少有報道，尤其是產前飼糧蛋白質水平對驢乳成分的影響尚未見報道。鑒于此，本試驗在妊娠后期給母驢飼喂不同蛋白質水平的飼糧，研究產前飼喂不同蛋白質水平飼糧對初乳與常乳中脂肪、蛋白質和氨基酸含量的影響，為妊娠母驢飼糧蛋白質的適量供給和驢乳的優化生產提供數據支撐及理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗設計與飼糧

本試驗在內蒙古草原御驢科技牧業有限公司進行。采用二因素完全隨機試驗設計，因素一為妊娠后期飼糧蛋白質水平，選擇年齡[(7.15±1.69)歲]、體重[(270.11±63.24) kg]、胎次[(1.63±0.48)胎]及預產天數[(58.66±4.28) d]相近的德州三粉母驢24頭，隨機分為3組，每組8頭，每頭為1個重復，產前分別飼喂高(12.48%，HP組)、中(11.52%，MP組)和低(10.54%，LP組)3個蛋白質水平的飼糧，產駒后14 d內統一飼喂相同的泌乳飼糧，試驗期共74 d；因素二為產后時間(PT)，各組母驢分別在產后2、6、12、24、48 h和3、5、7、14 d進行乳樣的采集。試驗期間每頭母驢單獨飼養，精料與苜蓿草每日07:00和14:00飼喂，谷草自由采食，自由飲水，各組的環境條件及飼養管理均保持一致。母驢妊娠后期飼糧與泌乳飼糧組成及營養水平見表1。

表1 母驢妊娠后期飼糧與泌乳飼糧組成及營養水平(風干基礎)

1.2 樣品采集與指標測定

按照試驗設計分別在母驢產駒后的不同時間點對母驢人工擠奶采集乳樣，樣品分裝在一次性無菌離心管內，-20 ℃保存。乳中干物質、脂肪、蛋白質含量參照張麗英[8]主編的《飼料分析與質量檢測技術》測定。乳中氨基酸(AA)含量參照GB/T 5009.124—2003[8]，采用酸解法測定，測定儀器為L-8900型氨基酸自動分析儀，所測指標包括17種單一氨基酸[賴氨酸(Lys)、苯丙氨酸(Phe)、蘇氨酸(Thr)、蛋氨酸(Met)、纈氨酸(Val)、異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、組氨酸(His)、天冬氨酸(Asp)、絲氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、半胱氨酸(Cys)、酪氨酸(Tyr)、精氨酸(Arg)和脯氨酸(Pro)]的含量，并計算必需氨基酸(EAA)、非必需氨基酸(NEAA)、總氨基酸(TAA)、支鏈氨基酸(BCAA，包括Leu、Val和Ile)、游離氨基酸(FAA，包括Asp、Glu、Ala、Leu、Tyr、Phe和Lys)、限制性氨基酸(LAA，包括Met和Lys)、呈味氨基酸(DAA，包括Glu、Asp、Phe、Ala、Gly和Tyr)的含量及EAA/NEAA、EAA/TAA。

1.3 數據統計與分析

試驗數據采用SAS 9.0軟件進行方差分析，并采用Duncan氏法進行多重比較，對主效應和互作效應進行檢驗；統計結果P<0.05表示差異顯著，0.05≤P≤0.10表示差異趨于顯著，P>0.10表示差異不顯著。

2 結 果

2.1 驢乳中干物質、蛋白質和脂肪含量

由表2可知，HP、MP組驢乳中干物質含量顯著高于LP組(P<0.05)；HP組驢乳中蛋白質含量最高，顯著高于MP和LP組(P<0.05)，但驢乳中脂肪含量正好相反。產后時間對驢乳中干物質、蛋白質和脂肪含量有顯著影響(P<0.05)，三者均隨著產后時間的延長而降低。其中，驢乳中干物質與蛋白質含量在產后2 h顯著高于產后6 h(P<0.05)，二者又顯著高于其他時間點(P<0.05)，在產后12 h降低的趨勢趨于平緩，以產后14 d最低；驢乳中脂肪含量在產后2、6和12 h顯著高于其他時間點(P<0.05)，尤以產后2 h最高，在產后24 h降低的趨勢趨于平緩，以產后14 d最低。妊娠后期飼糧蛋白質水平和產后時間的交互作用對驢乳中干物質、蛋白質和脂肪含量具有顯著的影響(P<0.05)，其中，干物質、蛋白質含量均以HP組的產后2 h最高，顯著高于其他組合(P<0.05)，3組干物質、蛋白質含量均在產后12 h開始快速下降，干物質含量以LP組的產后14 d最低，蛋白質含量以HP組的產后14 d最低；脂肪含量以MP組的產后2 h最高，3組均在產后24 h開始降低，且以LP組的產后14 d最低。

表2 妊娠后期飼糧蛋白質水平對驢乳中干物質、蛋白質和脂肪含量的影響(鮮重基礎)

2.2 驢乳中氨基酸含量

由表3和表4可知，HP、MP組驢乳中Asp、Ala、Val、Ile、Leu、Tyr、His及Arg含量顯著高于LP組(P<0.05)；驢乳中Thr、Ser、Gly和Cys含量在HP組最高，顯著高于其他2組(P<0.05)，以LP組最低。HP、LP組驢乳中Glu含量顯著低于MP組(P<0.05)。產后時間對驢乳中各氨基酸含量均有顯著影響(P<0.05)，并均隨著產后時間的延長而降低，且在產后2 h顯著高于其他時間點(P<0.05)，在產后24 h降低的趨勢趨于平緩，以產后14 d最低。妊娠后期飼糧蛋白質水平和產后時間的交互作用對驢乳中各氨基酸含量均具有顯著的影響(P<0.05)，其中，各氨基酸含量在HP組的產后2 h顯著高于其他各組合(P<0.05)，HP、MP和LP組從產后24 h開始，多數氨基酸含量下降的趨勢趨于平緩，Asp、Glu、Lys、Arg、Met和Leu含量以LP組的產后14 d最低，Ser、Gly、Ile和His含量以MP組的產后14 d最低，Thr、Val和Pro含量以HP組的產后14 d最低。

表3 妊娠后期飼糧蛋白質水平對驢乳中必需氨基酸含量的影響

表4 妊娠后期飼糧蛋白質水平對驢乳中非必需氨基酸含量的影響

2.3 產后不同時間的驢乳氨基酸平衡性

由表5可知，HP、MP組驢乳中EAA、NEAA、BCAA、FAA、LAA和DAA含量顯著高于LP組(P<0.05)；HP組驢乳中TAA含量顯著高于LP組(P<0.05)；HP組驢乳中EAA/NEAA和EAA/TAA有高于MP組的趨勢(P=0.05)。除EAA/NEAA和EAA/TAA外，驢乳中其余各指標與蛋白質含量的變化規律相似，均隨著產后時間的延長而降低，以產后2 h最高，從產后24 h開始降低的趨勢逐漸平緩，并以產后14 d達到最低；驢乳中EAA/NEAA和EAA/TAA在產后24 h達到最高，顯著高于產后2、6 h和14 d(P<0.05)。妊娠后期飼糧蛋白質水平和產后時間的交互作用對驢乳中各氨基酸平衡性指標具有顯著影響(P<0.05)，其中，EAA、NEAA、TAA、BCAA、FAA、LAA和DAA含量均以HP組的產后2 h最高，顯著高于其他組合(P<0.05)，除EAA/NEAA和EAA/TAA外，3組均在產后12 h開始下降，NEAA、TAA、BCAA、FAA、LAA和DAA含量均以LP組的產后14 d最低。

表5 妊娠后期飼糧蛋白質水平對驢乳中氨基酸平衡性的影響

3 討 論

3.1 妊娠后期飼糧蛋白質水平和產后時間對驢乳成分的影響

關于妊娠期飼糧蛋白質水平影響乳成分的研究報道較少，尤其是關于驢領域的研究尚未見報道。本研究得出，適當增加妊娠后期驢的飼糧蛋白質水平，可以提高驢乳中干物質、蛋白質與TAA的含量，但其影響主要體現在對初乳的影響方面，而且飼喂中等蛋白質水平的飼糧就可以達到提高產后初乳中干物質與蛋白質含量的效果，飼糧蛋白質水平以11.52%為宜。此外，產后時間也是影響乳成分的關鍵因素之一。多數資料認為，產后7 d之內的乳為初乳，之后為常乳。目前針對產后時間對驢乳成分影響的研究報道甚少。呂岳文等[7]研究指出，驢初乳中蛋白質、灰分、脂肪含量均隨泌乳期延長呈下降趨勢。牛霞等[9]研究報道，分娩后2 h的新疆褐牛乳中蛋白質含量是常乳的3.93倍，免疫球蛋白G(IgG)含量是常乳的108.14倍。陸東林等[10]發現，分娩后2 h的牛初乳中蛋白質、脂肪含量分別是常乳的5.03和1.95倍，且初乳中各種成分的含量隨泌乳時間的延長而逐漸接近常乳。本研究結果顯示，驢分娩后7 d內的初乳中干物質、蛋白質、脂肪和各氨基酸含量均顯著高于常乳，且以產后12 h之內較高，尤以產后2 h最高，其干物質、蛋白質與脂肪含量分別是產后12 h的1.79、3.62和1.51倍，分別是產后14 d的1.95、5.30和4.67倍。有研究指出，母畜在分娩前后，機體的蛋白質動員和氮代謝水平與分娩后泌乳能力有密切的關系。Theil等[11]指出，母豬分娩后的幾小時內乳腺在高速合成初乳，同時，母體蛋白質也能同氨基酸和糖類一樣被乳腺利用。在母豬分娩前機體氮代謝越劇烈，動員的蛋白質越多，初乳中蛋白質合成就越多[12]。伊犁馬妊娠后期攝入高能高蛋白質水平飼糧后，產后的干物質和粗蛋白質表觀消化率有升高的趨勢[6]。此外，妊娠期的乳腺發育決定了泌乳期乳腺上皮細胞的數量和母體后續的泌乳能力。姜洋洋等[13]研究發現，在妊娠后期適當提高飼糧蛋白質水平可以使藏母羊的乳池、腺泡、基底膜、肌上皮以及線粒體等亞細胞結構的發育更好，而乳腺腺泡、基底膜等又是乳蛋白合成的重要場所[14]；吳騁[15]研究指出，提高母豬妊娠后期的飼糧蛋白質水平可促進乳腺在妊娠期和泌乳期的發育，介導了泌乳期更高的乳蛋白率。因此，本研究得出的中、高蛋白質水平飼糧組的母驢其初乳中干物質、蛋白質與氨基酸含量增加，可能是由于產前飼糧蛋白質水平的提高可促進母驢的乳腺發育，增加產后母驢對干物質和蛋白質的消化率，進而增加了血液中的游離氨基酸含量，為乳腺的蛋白質合成提供了更多的前體物有關。目前相關的研究報道甚少，因此，有必要從乳腺的發育及產后營養物質代謝的角度深入研究其影響機制。然而，王賢東等[6]發現，在伊犁馬妊娠后期每天飼喂不同水平的蛋白質，產后初乳(產后12 h內)的乳脂率、乳蛋白率和總固形物含量無顯著差異，與本試驗結果不同，這可能與動物的種類、飼糧蛋白質水平等不同有關，目前的相關研究甚少，需要進一步探討。

3.2 妊娠后期飼糧蛋白質水平與產后時間對驢乳氨基酸平衡性的影響

乳中蛋白質的營養價值與其所含氨基酸的種類及其比例有關，驢乳含有成年人需要的Met、Phe、Thr、Try、Val、Leu、Ile及Lys等8種EAA。EAA/NEAA和EAA/TAA可反映驢乳的蛋白質營養價值，其值越大，說明驢乳的氨基酸平衡性越好；LAA是指乳中所含EAA的量與人體所需蛋白質的EAA的量相比，比值偏低的氨基酸，由于這些氨基酸的不足，限制了人體對其他EAA和NEAA的利用；BCAA包括Ile、Leu和Val，在動物體內參與機體蛋白質的合成，本身不作為生物活性物質的前體參與機體代謝，但其中間代謝產物具有生糖、生酮功能，因此在氨基酸合成代謝中均有重要作用[16]；DAA的含量與比例決定了畜產品的風味，主要包括Gly、Glu、Tyr、Ala、Asp等。本研究結果顯示，適當增加飼糧蛋白質水平可提高驢乳中EAA、NEAA、TAA、LAA、DAA和BCAA的含量及EAA/NEAA、EAA/TAA，提示驢乳蛋白質的氨基酸平衡性得到改善，但其機制尚不清楚。張娜娜[17]在湖羊上的研究指出，妊娠期飼喂不同蛋白質水平的飼糧，其初乳乳清蛋白質的組成發生了顯著變化，這可能是本研究中母驢乳蛋白質的氨基酸平衡性發生變化的原因之一，但目前相關研究尚未見報道，還需今后深入探討。

此外，與牛乳、羊乳和駱駝乳相比，驢乳的EAA/NEAA升高，但EAA/TAA相近(牛乳：0.407；羊乳：0.420；駱駝乳：0.414)[18]，說明與其他乳畜比，驢乳是一種氨基酸豐富且平衡性好的乳產品。從產后時間的影響來看，產后2、6 h驢乳蛋白質的氨基酸平衡性較其他時間差，這可能與產后2、6 h驢乳的蛋白質中含有較多的免疫球蛋白有關。

4 結 論

適當提高妊娠后期母驢飼糧蛋白質水平可以提高驢初乳中干物質、蛋白質、EAA(除Met)和部分NEAA(Asp、Ala、Tyr、Arg、Ser、Pro及Gly)的含量以及EAA/NEAA與EAA/TAA；驢乳中干物質、脂肪、蛋白質及各氨基酸含量隨著產后時間的延長而降低，以產后2 h最高，產后6～12 h迅速降低，從產后24 h開始降低趨于平緩，產后14 d最低。