蒺黃蒲絞湯干預高脂血癥大鼠的作用和作用機制研究

李佳維，楊建梅（通訊作者）

（上海市徐匯區中心醫院 上海 200031）

高脂血癥（HLP）是一種脂質代謝紊亂引起的一種或多種脂質高于正常的疾病。動脈粥樣硬化（AS）最常見的危險因素是高脂血癥，AS又是心腦血管疾病的病理基礎，故可以說高脂血癥是心腦血管疾病的元兇。本此實驗研究了蒺黃蒲絞湯對高脂血癥模型大鼠的降脂作用，為臨床提供有效的實驗依據。

1.資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1實驗試劑及儀器 全自動生化分析儀（日立7180）、酶標儀（Thermo）、臺式水平離心機（Eppendorf，5810R 德國）等。TC、HDL-C、LDL-C試劑盒（積水醫療）、TG試劑盒（日本和光）、TNF-α、IFN-γ elisa試劑盒（達優）、CTRP9、APN elisa試劑盒（上海樊克生物）等。

1.1.2實驗動物 6周齡清潔級SD雄性大鼠，體重（180±20）g，購于北京維通利華實驗動物技術有限公司（SCXK(京)2015-0001）。大鼠飼養于上海中醫藥大學實驗動物中心，飼養環境溫度為（24±2）℃，自由采食飲水，適應性飼養。

1.1.3實驗藥物 蒺黃蒲絞湯處方為：絞股藍15 g，黃精15 g，生蒲黃15 g，白蒺藜15 g，地龍12 g，上述組方中藥材10劑混合，經浸泡煎煮濃縮調節至含生藥0.48 g/mL（小劑量）、0.96 g/mL（中劑量）和1.92 g/mL（大劑量），4℃冰箱保存備用。所有藥材均購自上海同濟堂藥業有限公司。辛伐他汀片：規格20 mg/片，杭州默沙東制藥有限公司，批號：LO18189。

1.1.4高脂飼料配方 90.5%基礎飼料，1%膽酸，3%膽固醇，5.5%花生油。

1.2 方法

1.2.1高脂血癥模型的建立 參照文獻[1]的方法，改進并建立大鼠高脂血癥模型。將6周齡SD清潔級雄性大鼠48只，按體重分為6組，每組8只，分別為正常組、模型組、辛伐他汀組、蒺黃蒲絞湯小、中、大劑量組。正常組予普通飼料，余各組均以高脂飼料。各組大鼠食物均經自由攝取4周。

1.2.2藥物干預 大鼠適應性喂養后，造模的同時開始給藥，正常組、模型組每日以2 mL蒸餾水灌胃。辛伐他汀組灌服辛伐他汀7.5 mg/kg·d，蒺黃蒲絞湯小劑量組灌服蒺黃蒲絞湯4.5 g/kg·d，中劑量組灌服9 g/kg·d，大劑量組灌服18 g/kg·d，連續給藥4周。每周稱重1次，調整藥物劑量。

1.2.3標本采集及檢測 給藥第28 d后禁食（不禁水），0.3%戊巴比妥鈉30 mg/kg腹腔注射，腹主動脈取血分離后-20℃冰凍保存待測。檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C。ELISE法檢測TNF-α、IFN-γ、APN、CTRP9。

1.3 統計學方法

采用SPSS 19.0統計軟件進行分析。計量資料符合正態分布時數據采用均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 蒺黃蒲絞湯對高脂血癥大鼠血脂的影響

與模型組比較：正常組的TC、TG、LDL-C水平低于模型組，HDL-C水平高于模型組（P＜0.01）,提示成功建立高脂血癥大鼠模型。辛伐他汀組、蒺黃蒲絞湯大劑量組可降低TG、TC、LDL-C，升高HDL-C（P＜0.01）。中劑量組可降低TG、TC、LDL-C（P＜0.01）。小劑量組可降低TG、TC（P＜0.01）。

與辛伐他汀組比較：蒺黃蒲絞湯小劑量組在降低TG、TC方面療效低于辛伐他汀組（P＜0.05）,在升高HDL-C、降低LDL-C方面療效低于辛伐他汀組（P＜0.01）。中劑量組在降低LDL-C方面療效低于辛伐他汀組（P＜0.05）。大劑量組降低TG、TC、LDL-C，升高HDL-C療效與辛伐他汀組無顯著差異（P＞0.05）。見表1。

表1 各組大鼠血脂水平比較（±s，mmol/L）

表1 各組大鼠血脂水平比較（±s，mmol/L）

注：與模型組比較，**P＜0.01，*P＜0.05；與辛伐他汀組比較，▲▲P＜0.01，▲P＜0.05。

組別 只 TG TC正常組 8 0.33±0.11** 1.27±0.19**模型組 8 0.65±0.11 2.21±0.11辛伐他汀組 8 0.35±0.07** 1.64±0.25**蒺黃蒲絞湯小劑量組 8 0.48±0.15**▲ 1.85±0.15**▲蒺黃蒲絞湯中劑量組 8 0.38±0.09** 1.60±0.26**蒺黃蒲絞湯大劑量組 8 0.32±0.08** 1.56±0.13**組別 只 HDL-C LDL-C正常組 8 0.51±0.06** 0.17±0.02**模型組 8 0.37±0.07 0.57±0.06辛伐他汀組 8 0.48±0.06** 0.28±0.04**蒺黃蒲絞湯小劑量組 8 0.37±0.05▲▲ 0.53±0.12▲▲蒺黃蒲絞湯中劑量組 8 0.43±0.07 0.39±0.07**▲蒺黃蒲絞湯大劑量組 8 0.47±0.05** 0.36±0.09**

2.2 蒺黃蒲絞湯對高脂血癥大鼠TNF-α、IFN-γ的影響

與模型組比較：正常組、辛伐他汀組、蒺黃蒲絞湯小、中、大劑量組的TNF-α與模型組相比無顯著差異（P＞0.05）。正常組的IFN-γ低于模型組（P＜0.01）。辛伐他汀組、蒺黃蒲絞湯小、中、大劑量組均能降低IFN-γ（P＜0.01）。

與辛伐他汀組比較：蒺黃蒲絞湯小、中、大劑量組在降低TNF-α的作用上與辛伐他汀組無顯著差異（P＞0.05）。大劑量組降低IFN-γ的作用優于辛伐他汀組（P＜0.05）。見表2。

表2 各組大鼠血清TNF-α、IFN-γ比較（±s，pg/mL）

表2 各組大鼠血清TNF-α、IFN-γ比較（±s，pg/mL）

注：與模型組比較，**P＜0.01,*P＜0.05；與辛伐他汀組比較，▲▲P＜0.01，▲P＜0.05。

組別 只 TNF-α IFN-γ正常組 8 3.09±0.28 1.84±0.27**模型組 8 3.90±0.68 3.08±0.46辛伐他汀組 8 3.10±0.24 2.10±0.23**蒺黃蒲絞湯小劑量組 8 3.15±0.17 1.99±0.33**蒺黃蒲絞湯中劑量組 8 3.13±0.38 1.96±0.23**蒺黃蒲絞湯大劑量組 8 3.04±0.23 1.72±0.25**▲

3.討論

蒺黃蒲絞湯立方以“化痰降濁，活血通脈”為治療原則，由絞股藍，黃精，蒲黃，白蒺藜，地龍組成。方中絞股藍為君藥，有清熱解毒，化痰降脂之效。以黃精為臣藥，能健脾以助水濕運化，杜絕生痰之源。以生蒲黃為臣藥，能祛瘀活血降脂。以白蒺藜為臣藥，有疏肝理氣以助脾運，行氣活血以促降脂之功效。以地龍為佐藥，有清熱、熄風、通絡之效，能加強活血通絡的作用。諸藥并用，共奏化痰降濁，活血通脈之功。

1980年就有相關報道干擾素可引起脂質代謝紊亂。其中IFN-γ升高可導致TG及LDL-C的升高，HDL-C的降低，能促進TNF-α等炎癥因子的分泌,促進血管內皮炎癥的發生，從而形成動脈粥樣硬化。TNF-α由單核-巨噬細胞分泌而來，TC的明顯升高，促使大量TNF-α分泌，直接損傷血管內皮細胞。TC穿透內膜，在血管內壁形成動脈粥樣硬化斑塊[2-3]。本次研究檢測了血清IFN-γ、TNF-α水平，發現蒺黃蒲絞湯具有降低炎癥因子的作用，可通過降低IFN-γ，抑制TNF-α，減輕炎癥，起到調脂作用。APN是一種脂肪細胞因子，有調節脂肪組織和血管的功能，具有抗動脈粥樣硬化、抗炎等多種生物學效應[4-5]。

綜上所述，本次研究檢測了血清APN、CTRP9水平，發現蒺黃蒲絞湯可能通過調節脂肪細胞因子水平，抑制炎癥，調節脂代謝紊亂。