血清TBA、α-HBDH和E2在ICP患者中的表達及與病情、圍生兒結局的關聯性

許劍萍 徐月華 李健霞 錢靜 馬艾

妊娠期肝內膽汁淤積癥(Intrahepatic cholestasis of pregnancy，ICP)為一種妊娠期嚴重并發癥，好發于妊娠中晚期，患者臨床表現為黃疸、皮膚瘙癢等，且可對胎兒造成嚴重影響，引起胎兒窘迫、早產、新生兒死亡等多種圍產兒并發癥[1-3]。如何早期篩查并及時診斷該病對改善圍產兒預后極為重要。ICP發病機制復雜，多認為其發病受營養狀況、內分泌、遺傳等多因素影響[4]。總膽汁酸(TBA)為膽固醇于肝臟分解代謝最終產物，屬臨床評估ICP的靈敏指標，于疾病診斷中具有重要價值[5,6]。α-羥丁酸脫氫酶(α-HBDH)為非獨立特異酶之一，含有H亞基的LD-2、LD-1，表達水平可靈敏反映乳酸脫氫酶同工酶LDH2、LDH1活性，常被應用于心肌病、肝病臨床診斷、病情評價中[7]。雌二醇(E2)為一種雌激素，表達水平過高可影響患者肝功能，引起肝內膽汁淤積[8]。但目前臨床關于血清TBA、α-HBDH、E2與ICP患者病情及圍生兒結局的有關報道尚較少，為此本研究選取ICP患者與同期健康體檢孕婦各150例，實施血清TBA、α-HBDH、E2水平測定，旨在明確其在疾病進展中的作用及與病情、圍生兒結局的關系，為臨床診治提供一定參考，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年4月至2019年4月石家莊市第五醫院150例ICP患者為病例組，同期150例健康體檢孕婦為健康對照組。2組體重、孕周、年齡、產婦類型等比較，差異無統計學意義(P>0.05)。本研究經醫院倫理委員會同意。見表1。

表1 2組一般資料對比 n=150

1.2 納入與排除標準

1.2.1 納入標準：①病例組符合《妊娠期肝內膽汁淤積癥診療指南(2015)》[9]中ICP臨床診斷標準，并依據指南標準將病情程度分為重度、輕度；②健康對照組均為健康體檢孕婦，定期入院產檢并于本院完成分娩；③ 2組均為單胎妊娠，知曉本研究方案，自愿簽訂知情同意書。

1.2.2 排除標準：①原發性肝病與合并肝硬化、肝炎、脂肪肝等其他肝臟疾病者；②合并妊娠期高血壓、妊娠期心臟病、妊娠期糖尿病等其他妊娠期合并癥者；③合并嚴重感染、惡性腫瘤者；④合并腎、肺、心等其他臟器功能嚴重障礙者；⑤合并血液系統、精神系統、免疫系統疾病者。

1.3 方法 采集受檢者4 ml清晨空腹外周肘靜脈血樣，置入非抗凝試管中，采用離心機分離約10 min，轉速為3 000 r/min，離心半徑為8 cm，離心完成后取上層血清，-70℃冰箱中儲存待檢，剔除脂血、溶血標本。應用日立公司提供的7600型全自動生化分析儀及配套試劑盒以放射免疫法測定血清TBA、α-HBDH水平；采用上海君翼儀器設備有限公司提供的680型全自動酶標儀及配套試劑盒以酶聯免疫吸附法測定血清E2水平，相關操作嚴格依據儀器與試劑盒說明書由醫院專業檢測人員執行。

1.4 觀察指標 (1)2組血清TBA、α-HBDH、E2水平；(2)應用logistic回歸分析探討ICP發生影響因素；(3)病例組不同病情程度(重度、輕度)患者血清TBA、α-HBDH、E2水平;(4)病例組不同圍生兒結局患者(出現不良圍生兒結局、未出現不良圍生兒結局)患者血清TBA、α-HBDH、E2水平;(5)應用Spearman相關分析探究血清TBA、α-HBDH、E2水平與ICP患者病情、圍生兒結局的關聯性;(6)應用受試者工作特征曲線(ROC)評價血清TBA、α-HBDH、E2對ICP患者出現圍生兒并發癥的預測價值。

2 結果

2.1 2組血清TBA、α-HBDH、E2水平 病例組血清TBA、α-HBDH、E2水平高于健康對照組(P<0.05)。見表2。

表2 2組血清TBA、α-HBDH、E2水平比較

2.2 不同病情程度患者血清各指標水平 病例組病情程度為重度患者血清TBA、α-HBDH、E2水平高于輕度患者，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 病例組不同病情程度患者血清各指標水平比較

2.3 不同圍生兒結局患者血清各指標水平 病例組出現不良圍生兒結局(胎兒窘迫、早產、新生兒窒息、新生兒死亡)53例，未出現不良圍生兒結局97例。病例組出現不良圍生兒結局患者血清TBA、α-HBDH、E2水平高于未出現患者，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 病例組不同圍生兒結局患者血清各指標水平比較

2.4 ICP影響因素的多元回歸分析 以是否發生ICP為因變量，將患者年齡、血清TBA、α-HBDH、E2作為自變量回歸分析，顯示血清TBA、α-HBDH、E2均為ICP發生的重要危險因素(P<0.05)。見表5。

表5 ICP發生有關影響因素的多元回歸分析結果

2.5 血清各指標水平與ICP患者病情、圍生兒結局的關聯性 Spearman相關分析可知，血清TBA、α-HBDH、E2水平與ICP患者病情程度呈正相關(P<0.05)，與ICP患者圍生兒結局呈負相關(P<0.05)。見表6。

表6 血清各指標水平與ICP患者病情、圍生兒結局的關聯性 n=150

2.6 ROC分析血清各指標對ICP患者出現不良圍生兒結局的預測價值 α-HBDH AUC為0.889，大于TBA(0.784)、E2(0.794)，當截斷值為>222.53時，敏感度83.02%，特異度為83.16%。見表7，圖1。

表7 ROC分析結果

圖1 ROC曲線

3 討論

ICP為婦產科多發疾病，主要危害圍產兒，屬一種造成圍產兒死亡的重要原因[10,11]。有資料報道，ICP在妊娠女性中的發病率為0.1%～15.6%，且呈現出逐年增高趨勢，已被劃為高危妊娠疾病[12]。探尋一種疾病早期篩查、病情評價方法一直為臨床研究重點課題。

TBA為臨床診斷ICP的重要實驗室指標物，在ICP發生、進展中起著重要作用。劉開顏[13]研究指出，ICP患者血清TBA表達可顯著增高。本研究顯示，病例組血清TBA水平高于健康對照組，且logistic回歸分析顯示血清TBA為ICP發生的重要危險因素。亦說明TBA與ICP發生、進展有著密切關系。臨床一直患者肝功能受到損害，肝臟對體內膽鹽的代謝、攝入、排泄受到阻礙，進而致使機體循環中TBA表達增高[14,15]。本研究中，病例組病情程度為重度患者血清TBA水平高于輕度患者，出現不良圍生兒結局患者高于未出現患者，相關分析顯示，血清TBA水平與ICP患者病情程度呈正相關，與圍生兒結局呈負相關，且ROC分析顯示，血清TBA表達增高可作為預測患者出現不良圍生兒結局的重要預測因子。表明血清TBA表達與ICP患者病情、圍生兒結局密切相關。隨著血液循環內TBA表達的增高，不僅會對皮膚神經末梢造成刺激，引起皮膚瘙癢，且會導致血管痙攣，絨毛間隙變窄，胎盤中血流灌注缺乏，絨毛合體滋養層明顯增加，胎盤功能退化，引起胎兒急性缺氧，造成胎兒宮內窘迫及死亡[16]；且有研究指出，膽汁酸含有的牛磺酸還會造成心肌收縮力下降，引起胎兒生長受限，導致早產、圍產兒窒息及死亡等并發癥[17]。因此，TBA高表達可從側面預示不良圍生兒結局。

α-HBDH可協助心肌、肝臟損傷診斷，在心肌及肝臟損傷時其表達可顯著增高。南燕等[18]研究指出，ICP大鼠部分肝細胞中會出現顆粒樣及空泡變性，同時，高TBA血癥會對大鼠心肌細胞造成損害。王桂青等[19]研究顯示，ICP患者α-HBDH表達顯著高于正常體檢孕婦。本研究中，病例組血清α-HBDH水平高于健康對照組，且logistic回歸分析顯示，血清α-HBDH為ICP發生的重要危險因素。血清α-HBDH表達增高可作為預測患者出現不良圍生兒結局的重要預測因子。表明血清α-HBDH表達與ICP患者病情、圍生兒結局具有密切關系。推測其原因為病情越嚴重患者膽汁淤積越嚴重，肝細胞損害越明顯，致使α-HBDH活性提升越高；反之，其表達增高亦可從側面提示機體代謝、肝功能異常等，可能會影響圍生兒結局。

E2是由血液內低密度脂蛋白膽固醇于各種酶作用下所轉化形成，在妊娠中晚期主要由胎盤分泌，金海[20]研究指出，ICP血清E2表達可顯著增高。本研究顯示，病例組血清E2水平高于健康對照組，且logistic回歸分析顯示，血清E2為ICP發生的重要危險因素，且血清E2表達與ICP患者病情、圍生兒結局具有密切關系。推測其原因為病情越嚴重患者膽鹽代謝障礙越明顯，血清E2表達越高；而血清E2高表達可對患者肝功造成影響，并與血脂代謝有一定關系，可能影響圍生兒結局[21]。

綜上，血清TBA、α-HBDH、E2于ICP患者中呈高表達，表達與患者病情、圍生兒結局密切相關，可作為預測患者出現不良圍生兒結局的重要預測因子。臨床需增強孕婦TBA、α-HBDH、E2水平監測，一旦出現異常應予以及時處理，以改善圍生兒結局。