巨噬細胞炎性蛋白1α、堿性成纖維細胞生長因子對肺癌腦轉(zhuǎn)移臨床診療的意義

符曉，朱巍

1包頭醫(yī)學院中心臨床醫(yī)學院，內(nèi)蒙古包頭014040

2包頭市中心醫(yī)院腫瘤科，內(nèi)蒙古包頭014040

在世界范圍內(nèi)，肺癌是病死率最高的惡性腫瘤，并且近年來發(fā)病率和病死率均呈逐漸上升趨勢，2018年全球癌癥數(shù)據(jù)庫顯示，肺癌新發(fā)病例數(shù)達209萬，占所有惡性腫瘤的11.6%，病死例數(shù)達176萬，占所有惡性腫瘤的18.4%。肺癌患者5年生存率提高，可能是由于人們意識到了吸煙的危害，早期肺癌患者接受了有效的胸腔鏡治療及放射治療，晚期肺癌患者接受了有效的靶向治療及免疫治療。在美國，盡管肺癌患者的結(jié)局總體較好，但肺癌的預后與確診時肺癌的分期情況相關(guān)，早期發(fā)現(xiàn)的肺癌患者預后明顯優(yōu)于晚期發(fā)現(xiàn)的患者。肺癌按病理類型不同可分為小細胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）和非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC），其中NSCLC約占85%。晚期NSCLC患者的5年生存率不足5%，在診斷時57%的NSCLC患者為晚期，20%的患者發(fā)生腦轉(zhuǎn)移，自然病程中腦轉(zhuǎn)移率高達44%，其中以肺腺癌腦轉(zhuǎn)移為主，若不治療，生存時間為1.0～2.0個月，接受標準放化療后，中位生存時間為8.8個月。SCLC占肺癌總數(shù)的10%～15%，局限期5年生存率為29%，廣泛期為3%，確診時大約2/3的患者已為廣泛期，據(jù)估計初診時有10%～20%的SCLC患者已經(jīng)發(fā)生腦轉(zhuǎn)移，自然病程中發(fā)生腦轉(zhuǎn)移的患者占65%，盡管接受標準化療方案的患者初始緩解率高達78%，但大多數(shù)患者會在完成初始治療后的6個月內(nèi)復發(fā)，中位生存時間約為10個月。盡管手術(shù)、放療、化療、靶向治療、免疫治療技術(shù)的進步延長了晚期肺癌患者的生存時間，但惡性腫瘤的早發(fā)現(xiàn)仍是延長患者生存時間的重要因素。為了實現(xiàn)肺癌腦轉(zhuǎn)移的早診斷早治療，本研究檢測血漿中兩種可能提示肺癌腦轉(zhuǎn)移的標志物巨噬細胞炎性蛋白1α（macrophage inflammatory protein-1 alpha，MIP-1α）、堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF），分析其臨床診療意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018年12月至2020年9月于包頭市中心醫(yī)院腫瘤科初診的肺癌患者的病歷資料。納入標準：①經(jīng)病理學明確診斷為肺癌；②生存期≥3個月；③卡氏功能狀態(tài)（Karnofsky performance status，KPS）評分≥60分。排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②合并嚴重內(nèi)科疾病，如心力衰竭、靜脈血栓、慢性阻塞性肺疾病、支氣管哮喘、急性胰腺炎、自身免疫疾病等；③不能按時隨訪者。根據(jù)納入、排除標準，共納入肺癌患者50例，按照肺癌的轉(zhuǎn)移部位分為腦轉(zhuǎn)移組（21例）和其他器官轉(zhuǎn)移組（29例），所有肺癌腦轉(zhuǎn)移患者給予腦放射治療，并于腦放射治療后第30天按時就診。于包頭市中心醫(yī)院健康體檢中心選取21名健康者作為健康對照組。健康對照組納入標準：年齡為40～75歲。排除標準：①無腫瘤疾病；②無嚴重內(nèi)科疾病，如心力衰竭、靜脈血栓、慢性阻塞性肺疾病、支氣管哮喘、急性胰腺炎、自身免疫疾病等。腦轉(zhuǎn)移組、其他器官轉(zhuǎn)移組與健康對照組的性別、吸煙史、飲酒史、體重指數(shù)（body mass index，BMI）比較，差異均無統(tǒng)計學意義（

P

＞0.05）（表1），具有可比性。

表1 3組研究對象的臨床特征

1.2 檢測方法

1.2.1 儀器及試劑離心機、-80℃冰箱由包頭市中心醫(yī)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學實驗室提供。全自動酶免分析儀、酶標儀、洗板機、全自動加樣儀、37℃恒溫箱等及人源MIP-1α試劑盒、人源bFGF試劑盒（微孔酶標板、標準品、樣本稀釋液、檢測抗體-HRP、20×洗滌緩沖液、底物A、底物B、終止液等）均購自上海瑞番生物有限公司。

1.2.2 檢測方法采用酶聯(lián)免疫吸附法對腦轉(zhuǎn)移組、其他器官轉(zhuǎn)移組、健康對照組進行血漿MIP-1α、bFGF檢測。腦轉(zhuǎn)移組患者行腦放射治療，腦放療前及腦放療后第30天，進行血漿MIP-1α、bFGF檢測。

1.3 療效評價

采用實體瘤療效評價標準（response evaluation criteria in solid tumor，RECIST）評價療效，使用顱腦MRI對腦轉(zhuǎn)移組的治療效果進行評價，根據(jù)靶病灶最大長徑的總和計算。完全緩解（CR）：所有靶病灶均消失；部分緩解（PR）：所有靶病灶的最大長徑總和減少30%以上；疾病進展（PD）：所有靶病灶的最大長徑總和增加20%以上；疾病穩(wěn)定（SD）：介于PR和PD之間。

1.4 統(tǒng)計學分析

2 結(jié)果

2.1 療效評價

放射治療后的患者中CR 4例，PR 17例，所有肺癌腦轉(zhuǎn)移患者經(jīng)腦放療后治療均有效。

2.2 MIP- 1 α、bFGF水平的比較

腦轉(zhuǎn)移組、其他器官轉(zhuǎn)移組、健康對照組血漿MIP-1α、bFGF水平比較，差異均有統(tǒng)計學意義（

P

＜0.01）；腦轉(zhuǎn)移組患者MIP-1α、bFGF水平均高于其他器官轉(zhuǎn)移組及健康對照組，其他器官轉(zhuǎn)移組患者MIP-1α、bFGF水平均高于健康對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（

P

＜0.05）。（表2）

表2 3組研究對象MIP- 1 α、bFGF水平的比較（pg/ml，± s）

2.3 腦放療前后MIP- 1 α、bFGF水平的比較

腦放療后腦轉(zhuǎn)移組患者MIP-1α、bFGF水平均較腦放療前明顯降低，差異均有統(tǒng)計學意義（

P

＜0.01）。（表3）

表3 腦放療前后腦轉(zhuǎn)移組患者MIP- 1 α、bFGF水平的比較（± s）

2.4 MIP- 1 α與bFGF的相關(guān)性

在腦轉(zhuǎn)移組和其他器官轉(zhuǎn)移組中，MIP-1α與bFGF不存在相關(guān)性（

r

=-0.075、-0.186，

P

＞0.05）；在健康對照組中，MIP-1α與bFGF呈正相關(guān)（

r

=0.615，

P

=0.003）。

3 討論

使用血漿檢測的方法發(fā)現(xiàn)腦轉(zhuǎn)移瘤是一種操作成本低、創(chuàng)傷小的腦轉(zhuǎn)移瘤診斷方式，代表生物學診斷腦轉(zhuǎn)移瘤技術(shù)，有別于顱腦MRI的解剖結(jié)構(gòu)診斷技術(shù)。本研究結(jié)果顯示，肺癌腦轉(zhuǎn)移患者血漿MIP-1α、bFGF水平均高于肺癌其他器官轉(zhuǎn)移患者及健康人群，證明MIP-1α、bFGF可能是提示肺癌腦轉(zhuǎn)移的相關(guān)因子。曹芽在相關(guān)研究中指出，肺癌患者腫瘤細胞的細胞質(zhì)及細胞膜可以表達MIP-1α，且在晚期肺癌患者中的表達高于早期肺癌患者及健康人，結(jié)果提示MIP-1α是肺癌的不良預后因素，對本研究結(jié)果有一定支持作用。相關(guān)研究指出，在轉(zhuǎn)移相關(guān)巨噬細胞（tumor-associated macrophage，TAM）中高水平的趨化因子C-C基元配體2（chemokine C-C motif ligand 2，CCL2）與趨化因子C-C基元受體2（chemokine C-C-motif receptor 2，CCR2）結(jié)合促進MIP-1α分泌，促進TAM聚集及TAM與腫瘤細胞的相互作用促進腫瘤轉(zhuǎn)移，支持MIP-1α對肺癌遠處轉(zhuǎn)移發(fā)揮一定作用。MIP-1α與T淋巴細胞跨內(nèi)皮遷移相關(guān)，過表達的MIP-1α能夠輔助T淋巴細胞遷移入腦。皮新苗等的研究指出，肺癌腦轉(zhuǎn)移患者細胞中MIP-1α的表達高于健康人，

MIP-1α

siRNA干擾的細胞跨內(nèi)皮遷移力下降，血管內(nèi)皮細胞黏附力明顯減低，跨內(nèi)皮電阻顯著升高，表明MIP-1α具有誘導肺癌發(fā)生腦轉(zhuǎn)移的作用，支持MIP-1α促進腦轉(zhuǎn)移的研究結(jié)果，MIP-1α可能為肺癌腦轉(zhuǎn)移的生物標志物。

bFGF是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的生物標志物之一，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤細胞增殖、分化、遷移有確定作用，相關(guān)研究已證實bFGF在成人腦腫瘤中過表達。Zhang等在研究中指出，bFGF可以通過促血管生成作用促進腫瘤細胞生長，抗bFGF治療可以通過抑制蛋白激酶B（protein kinase B，PKB，又稱AKT）/促分裂原活化的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信號通路阻止肺癌新生血管生成，起到抑制肺癌進展轉(zhuǎn)移的作用，支持本研究結(jié)果。Hu等的研究結(jié)果顯示抗bFGF治療對于SCLC和早期可手術(shù)的NSCLC有效，但是與晚期NSCLC的不良預后無關(guān)，需進一步研究加以驗證。Gridley等的研究結(jié)果顯示bFGF在腦腫瘤及肺腺癌腦轉(zhuǎn)移患者血液中高表達，經(jīng)腦放射治療后大多數(shù)測試對象血漿bFGF降低，提示bFGF可能提示肺癌腦轉(zhuǎn)移，可能具有指導肺癌腦轉(zhuǎn)移患者腦放療效果評價的作用，與本研究結(jié)果相契合，但近年來相關(guān)研究不足，仍有必要進行進一步的研究以確定其對發(fā)病或治療結(jié)果的作用。

本研究尚存在一些不足，僅研究兩個生物標志物對肺癌腦轉(zhuǎn)移的價值可能存在一定的局限性，盡管研究對象入組時盡量排除患者存在其他疾病的可能，但入組患者仍可能存在潛在的疾病，成為本研究的潛在干擾因素，不能非常確定MIP-1α和bFGF的增高是由肺癌腦轉(zhuǎn)移導致還是一些潛在疾病干擾了研究結(jié)果，因此應尋找更多可能提示肺癌腦轉(zhuǎn)移的生物因子進行聯(lián)合檢測，成為提示肺癌腦轉(zhuǎn)移的特異性因子組合，這將是以后研究的重點。收集病例時并非所有肺癌患者都能達到納入標準，導致樣本數(shù)量相對較少，應收集更多的臨床病例對本研究的結(jié)果加以驗證。