微生態制劑對過敏性紫癜患兒腸道菌群狀態的影響觀察

劉玲佩 李小兵 陳躍華 賴盼建

[摘要] 目的 探討微生態制劑對過敏性紫癜患兒腸道菌群狀態的影響。 方法 選取2017年6月至2019年6月我院收治的80例過敏性紫癜患兒，隨機數表法分為兩組，對照組40例利用常規藥物治療，試驗組40例在此基礎上加用微生態制劑治療。比較兩組的臨床療效，治療前后免疫學及尿蛋白指標水平、腸道菌群水平和治療6個月內的復發情況。 結果 治療結束后，試驗組治療有效率（95.00%）高于對照組（77.50%）（P<0.05）;兩組治療后血清球蛋白A（IgA）、補體C3、尿白蛋白（Alb）和β2-微球蛋白（β2-MG）水平均低于治療前;治療后，試驗組血清IgA、C3和尿液Alb 、β2-MG水平均低于對照組（P<0.05）;兩組治療后大腸桿菌水平低于治療前，雙歧桿菌和B/E值高于治療前;治療后，試驗組的大腸桿菌水平均低于對照組，雙歧桿菌和B/E值高于對照組（P<0.05）;對兩組患兒隨訪6個月，試驗組復發率為10.00%，低于對照組的27.50%（P<0.05）。 結論 口服酪酸梭菌活菌散可提高過敏性紫癜患兒臨床療效，改善腸道菌群失調狀態，減少復發率，安全性較高。

[關鍵詞] 過敏性紫癜;微生態制劑;腸道菌群;兒童

[中圖分類號] R554.6? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2021）13-0005-04

Observation of the effect of microecological preparation on the intestinal flora of children with allergic purpura

LIU Lingpei1? ?LI Xiaobing2? ?CHEN Yuehua1? ?LAI Panjian2

1.Department of General Medicine， Affiliated Jinhua Hospital， Zhejiang University School of Medicine， Jinhua? ?321000， China; 2.Department of Padiatrics， Affiliated Jinhua Hospital， Zhejiang University School of Medicine， Jinhua? ?321000， China

[Abstract] Objective To explore the effect of microecological preparation on the state of intestinal flora in children with allergic purpura. Methods Eighty patients with allergic purpura admitted to the hospital from June 2017 to June 2019 were selected. The patients were divided into 2 groups by random number table method. The control group （40 cases） was treated with conventional drugs， and the experimental group（40 cases） was added with microecological preparation based on the above treatment. The clinical efficacy， immunological and urinary protein index levels before and after treatment， intestinal flora levels， and relapse within 6 months of treatment were compared between the two groups. Results After treatment， the effective rate of treatment in the experimental group was 95.00%， higher than that（77.50%） in the control group （P<0.05）. The serum globulin A （IgA）， complement C3， urinary albumin （Alb） and β2-microsphere protein（β2-MG） after treatment in both groups were lower than those before treatment. After treatment， the levels of serum IgA， C3 and urine Alb and β2-MG in the experimental group were lower than those in the control group（P<0.05）. After treatment， the E. coli level in two groups was lower than that before treatment， and the Bifidobacterium and B/E values were higher than those before treatment. After treatment， the E. coli level in the experimental group was lower than that in the control group， and the Bifidobacterium and B/E values in the experimental group were higher than those of the control group（P<0.05）. The two groups of children were followed up for 6 months. The recurrence rate of the experimental group was 10.00%， lower than that 27.50% of the control group（P<0.05）. Conclusion The oral administration of Clostridium butyricum live bacteria powder can improve the clinical efficacy of children with allergic purpura， improve the state of intestinal flora imbalance， reduce the recurrence rate， and has higher safety.

[Key words] Allergic purpura; Microecological preparation; Intestinal flora; Children

過敏性紫癜是3～10歲兒童高發的過敏性疾病之一，據統計，亞洲<5歲患兒約占總患病兒童的50%[1]。過敏性紫癜根據侵犯部位的不同，分為單純型、腎型、關節型、腹型、混合型五種，臨床癥狀各不相同[2-4]。過敏性紫癜患兒治療周期長且病情反復，同時并發癥多，給患兒及其家長帶來極大的痛苦[5]。既往研究揭示了腸道菌群與過敏性疾病之間存在密切關系，兩者可能互為因果，相互影響，一般來說腸道微生態穩定的過敏性疾病患兒，臨床癥狀會出現一定程度的緩解，因此腸道微生態的相關與過敏性疾病的防治研究息息相關，臨床對于微生態制劑在過敏性疾病中的應用越發重視[6-7]。本研究討論了微生態制劑對過敏性紫癜患兒腸道菌群狀態的影響，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年6月至2019年6月我院收治的80例過敏性紫癜患兒，隨機數表法分為試驗組和對照組，每組各40例。兩組患兒的性別、年齡、發病病程、臨床癥狀比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。見表1。

1.2 納入、排除標準

納入標準：①符合《諸福棠實用兒科學》中過敏性紫癜的診斷標準[9];②年齡3～14歲;③腎功能正常;④研究方案報送醫院倫理委員會批準，每例患者均征求家長知情同意。排除標準：①合并腎病綜合征者;②合并心、腦血管、肝、腎、消化道及造血系統等嚴重原發性疾病;③已使用微生態制劑、抗生素的治療;④合并原發性免疫缺陷疾病及精神病者;⑤中途退出治療者。

1.3 治療方法

對照組：采用常規方式治療，囑咐患兒臥床休息，避免劇烈運動，嚴格控制患兒飲食，同時給予相應的抗血小板聚集、抗過敏及補液等常規治療，合并感染的患兒給予敏感抗生素使用，伴有嚴重關節腫痛和胃腸道出血的患兒給予靜脈滴注甲基強的松龍（天津藥業焦作有限公司，國藥準字H20040845）10～80 mg/次，1次/d，治療3 d后改為醋酸潑尼松（天津力生制藥股份有限公司，國藥準字H12020123）口服20 mg/次，2次/d，癥狀減輕后逐漸減量，連續治療2周。試驗組：在同對照組的常規治療基礎上，加用口服酪酸梭菌活菌散（日本米雅利桑制藥株式會社，國藥準字S2012 0077），1.0 g/次，2次/d，早晚口服，連續治療2周。

1.4 觀察指標及評價標準

①兩組臨床療效[8]。治療結束后，對兩組患兒治療效果進行評估，治愈：腹部或關節疼痛消失，皮損消失、幾乎不見色素沉著，無新皮損出現。顯效：腹部或關節疼痛明顯減輕，70%以上的皮損消失，無或有少量新皮損出現。有效：腹部或關節疼痛有一定減輕，30%以上皮損消失，出現新皮損。無效腹部或關節疼痛無減輕甚至加重，皮損反復出現。治療有效率=（治愈+有效+顯效）/總例數×100%;②兩組治療前后免疫學指標比較。血清球蛋白A（IgA）、補體C3、尿白蛋白（Alb）和β2-微球蛋白（β2-MG）。治療前后抽取空腹患兒靜脈血5 mL，3000 r/min離心15 min，取上層清液，采用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測IgA、C3水平，采取上海晶抗生物工程有限公司生產試劑盒;收集患兒尿液樣品，檢測其中Alb、β2-MG水平;③兩組治療前后腸道菌群水平比較。治療前后，收集兩組患兒糞便樣品，采用16SrDNA熒光定量PCR技術測定糞便樣品中大腸桿菌、雙歧桿菌水平，計算兩者比值B/E，雙歧桿菌引物：上游 5-GAT TCT GGC TCA GGA TGA ACGC -3，下游5-CTG ATA GGA CGC GAC CCA T-3，擴增片段為230 bp;大腸桿菌引物：上游5-CAT GCC GCG TGT ATG AAG AA-3;下游5-CGG GTA ACG TCA ATG AGC AAA-3，擴增片段為95 bp;熒光染料由東洋坊上海生物科技有限公司提供;④兩組復發情況比較。采用門診和電話的方式對患兒隨訪6個月，每個統計周期均為1個月，患兒出院后 3 個月內再次出現過敏性紫癜的特征性皮疹，或伴隨相關消化道、關節、腎臟癥狀等，視為復發，1個統計周期內多次復發視為1例。

1.5 統計學處理

采用SPSS 18.0統計學軟件進行數據分析，計數資料用率表示，采用χ2檢驗，計量資料采用（x±s）表示，采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組臨床療效比較

治療結束后，試驗組治療有效率為95.00%，高于對照組的77.50%，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.2 兩組治療前后免疫學及尿蛋白指標比較

兩組治療后血清IgA、C3和尿液Alb 、β2-MG水平均低于治療前（P<0.05）;治療后，試驗組血清IgA、C3和尿液Alb、β2-MG水平均低于對照組（P<0.05）。見表3。

2.3 兩組治療前后腸道菌群水平比較

兩組治療后大腸桿菌水平低于治療前，雙歧桿菌和B/E值高于治療前（P<0.05）;治療后，試驗組的大腸桿菌水平均低于對照組，雙歧桿菌和B/E值高于對照組（P<0.05）。見表4。

2.4 兩組復發情況比較

對兩組患兒隨訪6個月，試驗組復發率為10.00%，低于對照組的27.50%（P<0.05）。見表5。

表5? ?兩組復發情況比較

3 討論

過敏性紫癜的病因暫未明確，對其發病機制的研究集中于免疫學、凝血機制和遺傳因素三個方面，近年來由于免疫技術的發展，證實了腸道菌群與免疫之間存在密切聯系，即腸道細菌能通過黏膜屏障與免疫細胞接觸[10]。過敏性疾病患者由于腸黏膜屏障功能受損誘發胃腸道反應，腸道菌群失調會影響其發病和轉歸，如過敏性紫癜患兒的乳酸桿菌、雙歧桿菌含量明顯低于健康兒童，伴有消化道癥狀的過敏性紫癜患兒陽性率更高[11]。陳鵬德等[12]通過高通量測序技術對過敏性紫癜患兒腸道糞便和黏膜菌群結構及多樣性進行研究，發現過敏性紫癜患兒糞便菌群病原菌增多而有益菌較少，且糞便菌群和結腸黏膜菌群結構和多樣性存在差異。因此，本研究中加用微生態制劑治療過敏性紫癜患兒，研究其對腸道菌群的影響。

本研究中，試驗組治療有效率高達95.00%，高于對照組，說明與常規治療相比，聯用酪酸梭菌活菌散治療過敏性紫癜患兒可提高治療有效率，推測是酪酸梭菌活菌散可以定植于腸道黏膜并進行繁殖，直接提升腸道雙歧桿菌數量，抵抗致病菌的入侵，加快腸道內益生菌的繁殖，改善腸道微環境，恢復腸道微生態的平衡，讓整體的治療效果得到提升。同時，經16SrDNA熒光定量PCR技術測定，治療后試驗組患兒糞便中的大腸桿菌水平均低于對照組，雙歧桿菌和B/E值高于對照組，證明了酪酸梭菌活菌散對增加腸道雙歧桿菌數量、改善腸道微環境的作用。與張靜等[13]研究結果相似。

在許多感染疾病中均有lgA和補體C3的參與，兩者形成的抗原抗體復合物會增加毛細血管的通透性，由此激活免疫系統，以致大量炎性因子和過敏介質釋放，從而產生變態反應并累及皮膚、腎臟、關節和消化道等器官，甚至內臟出血[14-19]。劉娜娜等[20]研究提示過敏性紫癜患兒的總IgE、IgA和補體C3對疾病的預后具有預測價值。除此之外，尿液中的Alb、β2-MG指標可以直觀的反映腎小球基底膜通透性的變化以及腎小管功能的異常，因此對用藥時間具有一定的指導性[21]。本研究中，治療后試驗組血清IgA、C3和尿液Alb、β2-MG水平均低于對照組（P<0.05），提示加用酪酸梭菌活菌散治療可以改善過敏性紫癜患兒血清免疫學及尿蛋白指標。推測與酪酸梭菌活菌散加快腸道內益生菌的繁殖，改善腸道微環境，恢復腸道微生態的平衡作用有關。對兩組患兒隨訪6個月，試驗組復發率為10.00%，低于對照組的27.50%，提示聯合酪酸梭菌活菌散治療對改善過敏性紫癜患兒的預后有一定療效，推測酪酸梭菌活菌散與其減輕腸黏膜損傷，保護腸黏膜屏障功能的作用有關。不過，本研究納入樣本較少，隨訪時間較短，不能完全掌握不同程度過敏性紫癜患兒的生存預后情況，有待進一步擴大樣本和隨訪時間。

綜上所述，酪酸梭菌活菌散可改善過敏性紫癜患兒腸道菌群失調狀態，降低血清IgA、C3和尿液Alb、β2-MG水平，減少復發率，治療有效率顯著提高。

[參考文獻]

[1] Liu SX，Li YH，Dai WK，et al. Fecal microbiota transplantation induces remission of infantile allergic colitis through gut microbiota re-establishment[J]. World Journal of Gastroenterology，2017，23（48）：8570-8581.

[2] 邱碧波，黃彩芝，莫麗亞.過敏性紫癜患兒血清25羥維生素D水平變化及臨床意義[J].實用預防醫學，2019， 26（12）：1528-1530.

[3] 林林東，王曉冬，龔婭.過敏性紫癜患兒免疫球蛋白及T淋巴細胞亞群水平與疾病嚴重程度的相關性研究[J].國際檢驗醫學雜志，2018，39（13）：1651-1653.

[4] Smith TDH，Watt H，Gunn L，et al. Recommending oral probiotics to reduce winter antibiotic prescriptions in people with asthma：A pragmatic randomized controlled trial[J]. The Annals of Family Medicine，2016，14（5）：422-430.

[5] 宋玉美.皮質類固醇激素及免疫抑制劑對過敏性紫癜腎炎患兒的影響[J].實用臨床醫藥雜志，2018，22（5）：87-90.

[6] 柳園，王亞娟，石磊，等.生命早期腸道菌群失調與后期過敏性疾病發病風險的研究[J].中國抗生素雜志，2018， 43（6）：743-749.

[7] Oh S，Yap GC，Hong PY，et al. Immune-modulatory genomic properties differentiate gut microbiota of infants with and without eczema[J]. PLoS ONE，2017，12（10）：e0184955.

[8] 田穎，王予川. 孟魯司特鈉聯合丹參酮治療過敏性紫癜的療效分析[J]. 中國現代醫學雜志，2014，24（13）：70-72.

[9] 吳瑞萍，胡亞美，江載芳.諸福棠實用兒科學[M].6版.北京：人民衛生出版社，1996：674-679.

[10] 饒洪江.復方甘草酸苷聯合西咪替丁對過敏性紫癜患兒體征改善及血清T細胞亞群、IL-1β水平變化的影響[J].中國血液流變學雜志，2017，27（1）：86-88.

[11] 權春梅，任宗明，王能勇，等.過敏性紫癜患兒血清IgA1 異常糖基化水平及其與氧化應激指標的相關性研究[J].醫學臨床研究，2019，36（10）：1918-1919，1922.

[12] 陳鵬德，林燕，楊潔，等.過敏性紫癜患兒腸道菌群結構及多樣性研究[J].中國婦幼健康研究，2017，28（7）：747-752，757.

[13] 張靜，聞鈺.微生態制劑對小兒血液腫瘤化療后腸道菌群失調的影響[J].浙江臨床醫學，2018，20（11）：1818-1819.

[14] 桑苗，劉亞盼.雙歧桿菌四聯活菌聯合孟魯司特鈉對過敏性紫癜患兒炎性因子和免疫功能的影響[J].兒科藥學雜志，2019，25（4）：27-31.

[15] 李愛國，劉之彝，龍曉東，等.顱內動脈瘤介入栓塞術和顱內夾閉術治療高分級動脈瘤性蛛網膜下腔出血的臨床療效觀察[J].臨床外科雜志，2018，26（7）：497-500.

[16] 楊煥丹，張銳鋒，彭倩倩，等. 過敏性紫癜合并鏈球菌感染的臨床特點及血清免疫球蛋白和補體的變化[J]. 安徽醫藥，2019，23（3）：483-486.

[17] 張婷，武坤毅，王娜，等. 補體C5a受體1拮抗劑對小鼠上行性泌尿道感染的保護作用[J]. 中華腎臟病雜志，2018，34（6）：439-445.

[18] 王爽，鄒飛，吳思，等.人巨細胞病毒感染新生兒血清和腦脊液細胞因子的變化[J]. 中華實用兒科臨床雜志，2019， 34（11）：823-826.

[19] 李博，鄭歡偉，趙召霞，等.干擾素α-1b序貫拉米夫定聯合治療對慢性乙型肝炎患兒T淋巴細胞亞群、補體水平及肝功能的影響[J].中國醫藥導報，2019，16（14）：148-151.

[20] 劉娜娜，丁周志，陳瓊，等.過敏性紫癜患兒總IgE、IgA及補體C3水平對疾病預后的預測價值[J].中華全科醫學，2019，17（9）：1463-1466.

[21] 吳云剛，何方.過敏性紫癜患兒發生腎臟損害危險因素的Logistic回歸分析[J].中國中西醫結合皮膚性病學雜志，2019，18（5）：397-400.

（收稿日期：2020-11-12）