重組人干擾素α-2b、派特靈聯合二氧化碳激光治療女性尖銳濕疣的效果及對T淋巴細胞亞群和炎性因子的影響

李輝霞，馬軍格，楊長樂

尖銳濕疣(condyloma acuminatum, CA)是由人類乳頭瘤病毒(HPV)感染皮膚黏膜引起的傳染性性病，以生殖器、肛門部位增生損傷為主要特征，多發于皮膚與黏膜交界處較為潮濕部位，中青年人群(20～50歲)高發，以性接觸、母嬰傳播為主，復發率高、潛伏期長[1]。近年來，CA的發病率呈逐年升高的趨勢，且發病年齡逐漸年輕化，不但影響患者身體健康，也會產生嚴重的心理負擔，影響正常的工作、生活，危及家庭、社會，成為嚴重的社會公共衛生問題[2]。目前，在臨床上治療CA的主要方法有二氧化碳激光、微波治療、電灼術等，其中二氧化碳激光較為常用，可準確作用于疣體，見效快，去除病灶較徹底，對周圍正常組織損傷小，治療后無瘢痕殘留，但其僅可清除肉眼可見的病變組織，無法有效治療周圍潛伏病毒，易誤傷患部周圍健康組織，且治療后疼痛較為明顯，復發率較高[3]。相關文獻報道，單純采用二氧化碳激光治療CA的復發率為40%～50%[4]。重組人干擾素α-2b能與HPV表面受體相結合，激活抗病毒蛋白基因，發揮抗病毒作用；還可增強巨噬細胞吞噬功能，增強T淋巴細胞和自然殺傷細胞功能，提高機體免疫功能，促進疾病恢復[5]。派特靈作為一種純中藥制劑，可用于皮膚、黏膜及特殊部位，作用范圍廣，可通過細胞毒性作用抑制靶細胞增殖，引起靶細胞壞死脫落，同時對靶細胞內生存的病原體起到殺滅作用，并有效控制病灶復發，治療后無瘢痕殘留[6]。有相關研究顯示，免疫炎癥反應在CA的發生和發展過程中起重要作用[7]。故本研究旨在觀察重組人干擾素α-2b、派特靈聯合二氧化碳激光治療女性CA的效果及對T淋巴細胞亞群和炎性因子的影響，以期提高本病的治愈率，降低復發率。

1 資料與方法

1.1納入與排除標準

1.1.1納入標準：①均符合《皮膚性病免疫學》中CA的診斷標準[8]；②女性，首次發病；③2周內無局部抗病毒藥物、免疫調節劑等外用藥物應用史；④病程1～5個月；⑤皮損直徑<1.0 cm，多發且數目≤6個；⑥無二氧化碳激光治療禁忌證；⑦對重組人干擾素α-2b及派特靈耐受；⑧臨床資料完整。

1.1.2排除標準：①近期有免疫抑制劑和抗病毒藥物外用史者；②伴自身免疫性疾病，肝、腎、心腦血管、造血系統疾病；③認知或精神障礙，不能配合治療者；④對本研究所用藥物過敏者；⑤治療依從性差；⑥有二氧化碳激光治療禁忌證；⑦孕婦和哺乳期婦女；⑧患淋病、非淋菌性尿道炎、痔、直腸肛管惡性腫瘤、炎性息肉者；⑨臨床資料欠缺者。

1.2一般資料 選取我院2019年1月—2020年3月符合納入及排除標準的女性CA患者79例，年齡23～62(42.83±5.81)歲；病程1～5(3.53±0.61)個月；病灶數量1～6(3.42±0.61)個；病灶直徑1.4～7.2(4.02±0.94)mm；病灶部位：陰唇26例(32.91%)，會陰33例(41.77%)，肛周9例(11.39%)，陰道口11例(13.92%)。根據治療方法的不同將納入患者分為觀察組41例和對照組38例。兩組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。本研究經醫院醫學倫理委員會批準執行。

表1 不同方法治療女性尖銳濕疣兩組的一般資料比較

1.3治療方法

1.3.1對照組：對照組給予二氧化碳激光治療。患者取膀胱截石位，碘伏消毒皮膚，2%利多卡因局部麻醉后，應用YAG型二氧化碳激光治療儀(上海嘉定光電儀器有限公司)激光點射處理疣體，功率5～15 W，激光治療深度達到皮膚真皮淺層，寬度約疣體周圍1 mm。當疣體表面形成焦痂后邊治療邊用棉簽蘸0.9%氯化鈉注射液擦去焦痂，直至疣體清除。治療后皮損表面涂1‰甲紫(青海寶鑒堂國藥有限公司，國藥準字Z63020144)，保持創面清潔、干燥，并口服抗生素3 d預防感染。

1.3.2觀察組：觀察組在對照組基礎上給予重組人干擾素α-2b聯合派特靈治療。二氧化碳激光治療疣體后，先用棉簽蘸取派特靈原液均勻涂于病灶表面，后用棉簽蘸取派特靈1∶50稀釋液(即原液0.5 ml+0.9%氯化鈉注射液25 ml)大范圍擦洗病灶周圍皮膚4～5次，每日1次。治療3 d后停用4 d為1個療程，連續治療3個療程。同時于二氧化碳激光治療后當日給予重組人干擾素α-2b(廈門特寶生物工程股份有限公司，國藥準字S20160001)100萬單位，隔日肌內注射，連續治療3周。

1.3.3治療后注意事項：兩組術后1個月內禁止性生活，配偶亦應接受檢查和治療，防止再次交叉感染。

1.4觀察指標

1.4.1臨床療效：①治愈：治療后病灶完全消失，創面完全愈合，醋酸白試驗陰性；②顯效：治療后病灶面積和個數減少>75%，創面大部分愈合，醋酸白試驗弱陽性；③有效：治療后病灶面積和個數減少>50%，但≤75%，創面部分愈合，醋酸白試驗中等陽性；④無效：病灶面積和個數無減少甚至增大，創面未愈合，醋酸白試驗強陽性[9]。總有效率=(治愈+顯效+有效)/總例數×100%。

1.4.2T淋巴細胞亞群：兩組治療前及治療后1 d抽取清晨空腹靜脈血5 ml，采用DxFLEX型流式細胞儀測定外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平，并計算CD4+/CD8+，流式細胞儀及相關試劑盒均購自美國貝克曼庫爾特有限公司。

1.4.3炎性因子：兩組治療前及治療后1 d抽取清晨空腹靜脈血5 ml，3000 r/min離心10 min取上清，應用全自動生化儀(濟南來寶醫療器械有限公司)，采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清白細胞介素-1(IL-1)、IL-6和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平。

1.4.4不良反應：觀察兩組治療期間不良反應發生情況。

1.4.5復發情況：對兩組達治愈標準者進行為期6個月的隨訪，觀察復發情況，復發標準為患者原病變部位和周圍出現新疣體，且醋酸白試驗陽性。

2 結果

2.1臨床療效比較 觀察組治療總有效率為90.24%，對照組為71.05%。觀察組治療總有效率明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同方法治療的女性尖銳濕疣兩組臨床療效比較[例(%)]

2.2T淋巴細胞亞群比較 治療前，兩組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比較差異均無統計學意義(P>0.05)。治療后，兩組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較治療前明顯升高，CD8+較治療前明顯降低，且觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+升高程度及CD8+降低程度均明顯大于對照組，差異有統計學意義(P<0.01)。見表3。

表3 不同方法治療女性尖銳濕疣兩組治療前后的T淋巴細胞亞群比較

2.3炎性因子比較 治療前，兩組IL-1、IL-6和TNF-α水平比較差異均無統計學意義(P>0.05)。治療后，兩組IL-1、IL-6和TNF-α均較治療前明顯降低，且觀察組降低程度明顯大于對照組，差異有統計學意義(P<0.01)。見表4。

表4 不同方法治療女性尖銳濕疣兩組治療前后的炎性因子比較

2.4不良反應比較 觀察組治療期間不良反應總發生率雖略高于對照組，但組間比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表5。兩組均未出現藥物過敏、神經系統功能紊亂、肝腎損傷等嚴重不良反應，患者發生的不良反應均較輕微，能耐受，無須特殊處理，停藥后癥狀自然消失。

表5 不同方法治療女性尖銳濕疣兩組治療期間不良反應比較[例(%)]

2.5復發情況比較 對兩組達治愈標準者進行為期6個月的隨訪觀察發現，觀察組20例治愈患者中復發2例(10.00%)，對照組15例治愈患者中復發6例(40.00%)。觀察組的復發率明顯低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。

3 討論

CA由HPV感染所致，潛伏期長、傳染性強、易反復。該病與個人衛生較差、不潔性生活有關，傳染途徑主要包括性交、間接接觸及母嬰傳播等。本病發病機制為HPV經肛門周圍皮膚黏膜或外生殖器微小損傷進入機體后，迅速感染基底細胞，HPV病毒基因隨角質形成細胞進行轉錄、翻譯并表達后組裝形成病毒顆粒，HPV病毒顆粒隨角質外排，刺激趨化因子、細胞因子及補體成分表達，影響巨噬細胞吞噬能力而發病[10]。女性CA以陰唇、會陰、宮頸、陰道口及肛周等部位多發，本研究納入病例的患病部位分別為陰唇26例(32.91%)，會陰33例(41.77%)，肛周9例(11.39%)，陰道口11例(13.92%)；多數患者無明顯臨床癥狀，有時可有疼痛、瘙癢、陰道分泌物過多、性交出血等癥狀，病初丘疹呈細小的紅色或污灰色雞冠狀、菜花樣或乳頭樣突起，后逐步增大，呈單個或多個集群分布[11]。

目前，治療CA的主要方法有二氧化碳激光、微波治療、電灼術等，其中在臨床上較為常用的是二氧化碳激光，能準確作用于疣體，起效較快，病灶去除徹底，對周圍正常組織損傷小，治療后無瘢痕殘留，但其僅能去除肉眼可見病變組織，無法有效清除病灶周圍潛伏的病毒，還易誤傷病灶周圍的健康組織，且治療后疼痛較為明顯，復發率較高[12]。

重組人干擾素α-2b是一種具有免疫調節作用的基因重組干擾素，其特點為：①抗病毒譜較廣；②能有效干擾HPV病毒mRNA轉錄和DNA復制，阻斷病毒增殖過程；③可誘導抗病毒蛋白產生，優化機體免疫系統對HPV病毒感染細胞的吞噬、溶解作用；④有利于提高機體免疫功能[13-14]。派特靈是一種外用純中藥復方制劑，由鴨膽子、大青葉、苦參、蛇床子、白花蛇舌草等中藥組成，具有清熱解毒、除濕散結和抗病毒的作用[15-16]。苦參具有抗病毒、抗菌、殺蟲、祛風、燥濕的功效，能激活和提高皮膚免疫功能，抑制HPV病毒合成、繁殖；大青葉含有靛藍、蕓苔素及苷類化合物，具有抗真菌、抗病毒和清熱解毒功效，且能提高機體免疫力；鴉膽子具有清熱解毒、抑制HPV病毒復制和合成的作用；蛇床子可抗病原微生物，抑制HPV病毒生長繁殖；白花蛇舌草具有抗感染、促進體液免疫及抑制疣體細胞生長、促進脫落的作用。派特靈通過細胞毒性作用選擇性抑制疣體細胞增殖、引起疣體細胞退行性變及壞死脫落，從而抑制和清除HPV；還能改變HPV病毒生存環境，增加表皮細胞代謝，促進病變組織和周圍潛伏病毒區域皮膚脫落及表皮細胞再生；另外其對皮膚組織刺激較小，不會浸潤損傷真皮層及皮下組織，不影響周圍正常皮膚組織，治療后無瘢痕殘留，能獲得較好外觀、患者滿意度高，且不良反應較輕微，使用方便[17]。故本研究旨在觀察重組人干擾素α-2b、派特靈聯合二氧化碳激光治療女性CA的效果及對免疫功能、炎性因子、預后的影響，以期提高本病的治愈率、降低復發率。本研究結果顯示，觀察組治療總有效率為90.24%高于對照組的71.05%；提示重組人干擾素α-2b、派特靈聯合二氧化碳激光治療可提高女性CA的治愈率。

有研究表明，HPV感染與機體免疫功能下降有很大關系，當機體免疫功能下降時，HPV感染率明顯升高[18]。T淋巴細胞亞群的平衡是維持機體免疫穩定、保證免疫防御及免疫監視功能正常的基礎。本研究顯示，治療后，兩組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較治療前明顯升高，CD8+較治療前明顯降低，且觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+升高程度及CD8+降低程度均明顯大于對照組。提示重組人干擾素α-2b、派特靈聯合二氧化碳激光治療可極大改善機體免疫功能，有利于女性CA患者疾病康復。相關研究證實，CA患者因細胞免疫功能下降，其血清IL-6和TNF-α等炎癥指標明顯高于健康人群[19]。血清IL-1、IL-6和TNF-α等炎性因子可作為衡量機體炎癥反應程度的重要指標，上述因子水平越低表示機體炎癥反應改善越明顯。本研究結果顯示，治療后，兩組IL-1、IL-6和TNF-α均較治療前明顯降低，且觀察組降低程度較對照組更顯著。提示重組人干擾素α-2b、派特靈聯合二氧化碳激光治療可極大改善女性CA患者機體炎癥反應程度。

二氧化碳激光治療CA后易復發的主要原因有以下幾點：①激光治療僅能破壞和消除肉眼所見臨床期疣體，不能完全清除周圍亞臨床感染和潛伏感染疣體；②患者自身免疫功能下降或病灶局部免疫狀態較低下，對HPV病毒的抵御力較差；③患者免疫功能下降、內分泌環境改變等促進HPV病毒繁殖[20]。本研究對兩組達治愈標準者進行為期6個月的隨訪觀察發現，觀察組復發率明顯低于對照組，提示重組人干擾素α-2b、派特靈聯合二氧化碳激光治療可有效控制復發率。安全性觀察也顯示，兩組治療期間不良反應總發生率比較差異無統計學意義，且均未出現嚴重不良反應，提示重組人干擾素α-2b、派特靈聯合二氧化碳激光治療安全性良好。

綜上所述，重組人干擾素α-2b、派特靈聯合二氧化碳激光治療女性CA，可有效提高臨床療效，改善機體免疫功能，抑制機體炎癥反應程度，降低治療后復發率，且治療安全性良好。